生体金属による遺伝子発現制御

生物金属对基因表达的调节

• 批准号: 08249103
• 负责人: 木村 栄一
• 金额: $ 77.5万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08249103/
• 关键词: 大環状ポリアミン; DNaseI; 亜鉛錯体; Znフィンガー; 塩基配列認識; プロモーターDNA; TATAボックス; RNAポリメラーゼ; 人工β-cヌクレオチド; 亜鉛フィンガー; 生体金属; 遺伝子発現制御; Zn-フィンガー; 亜鉛; 核酸塩基; 転写因子; 抗HIV活性; 遺伝子プロモーター領域; DNA融解温度

1.核酸-合成金属錯体相互作用の研究:12員環テトラアミン(cyclen)の亜鉛錯体が、核酸塩基中イミド基をもつチミン(又はウラシル)だけを選択的に認識しComplexをつくることを発見したが、それを大きく展開し、DNA(例:大腸菌プラスミドDNA(150bp))中のTと選択的に結合することをDNaseI及びmicrococcal nuclease footprint法により証明した。更に、Zn^<2+>-cyclen錯体は、DNA TATAboxに選択的に結合し、転写因子TFIIDの活性化機構を抑え、今までに例のない全く新しいタイプの遺伝子発現制御分子となることが明らかとなった。また、それらの化学的、生化学的機構の結果、抗菌活性を示すことも発見した。(木村栄一)2.蛋白-核酸相互作用に関与する生体金属の研究:転写因子Spl中のZnフィンガー(転写因子)Cys_2-His_2型亜鉛配位構造motifを3倍に拡大した新たな9つのZn-フィンガーからなるペプチドを合成し、DNAの30塩基対配列を選択的に認識する分子を創造した。また、二つのSplDNA結合ドメインを適当な長さのグリシンポリペプチドでlinkした分子を合成し、それらがDNAをおれ曲げることを発見、新たな遺伝子発現制御小工分子となりうることを示した。(杉浦幸雄)(Fe^<2+>-EDTA)を大腸菌RNAポリメラーゼのCysやLysに共有結合させる方法を考案し、接触相手の転写因子蛋白やDNAとの接点部固定した。RNAポリメラーゼのシグマサブユニットのC端ドメインがDNAエンハンサー部と接触すること、サブユニット間の接点、シグマサブユニットのプロモーターDNAとの接点、多数の転写因子のポリメラーゼ上の接点等も明らかとなった。FeのO_2との反応を利用した分子間相互作用を解析する本法は、転写研究に新たなbreakthroughをもたらしたのみならず、他成分分子集合体や、多分子相互作用が主要な研究対象となって来た現代生命科学で、大変有用なtoolとなろう。(石浜明)

1. The nucleic acid - synthesis metal misprinted の interaction study: 12 membered ring テ ト ラ ア ミ ン (cyclen) の 亜 lead misprinted が, nucleic acid salt in イ ミ ド base を も つ チ ミ ン (は ウ ラ シ ル) だ け を sentaku に know し Complex を つ く る こ と を 発 see し た が, そ れ を big き く し and DNA (example: coliform プ ラ ス ミ ド DNA (150 bp)) in の T と sentaku に combined す る こ と を DNaseI and び micrococcal nuclease footprint method に よ り prove し た. More に, zinc ^ 2 + > < - cyclen misprinted は, DNA TATAbox に sentaku に combined し, planning to write factor TFIID の activeness を え suppression, this ま で に example の な い く all new し い タ イ プ の heritage 伝 son 発 system now royal molecular と な る こ と が Ming ら か と な っ た. The results of the chemical and biochemical mechanisms of また and それら, as well as the antibacterial activity of を, indicated that す と と また were observed in た た. (tech students.their ownship kimura a) 2. The protein, nucleic acid interactions に masato and す る raw metal の research: planning write factor in the Spl の zinc フ ィ ン ガ ー (planning write factor) Cys_2 - His_2 亜 lead coordination structural motif を に 3 times company, big し た new た な 9 つ の zinc - フ ィ ン ガ ー か ら な る ペ プ チ ド を し, DNA synthesis の 30 salt base polices List を select 択 's に to understand する molecules を to create た た. ま た, two つ の SplDNA combining ド メ イ ン を appropriate な long さ の グ リ シ ン ポ リ ペ プ チ ド で link し た molecular を synthetic し, そ れ ら が DNA を お れ qu げ る こ と を 発 see, new た な posthumous son 伝 発 now suppression coolie molecular と な り う る こ と を shown し た. (Chinese fir PuXingXiong (Fe) ^ 2 + > < - EDTA) を coliform RNA ポ リ メ ラ ー ゼ の Cys や Lys に mutual combination さ せ る method し を test case, contact your hand の planning write factor protein や DNA と の contact department fixed し た. RNA ポ リ メ ラ ー ゼ の シ グ マ サ ブ ユ ニ ッ ト の C end ド メ イ ン が DNA エ ン ハ ン サ と ー department contact す る こ と, サ ブ ユ ニ ッ ト の contact, シ グ マ サ ブ ユ ニ ッ ト の プ ロ モ ー タ ー DNA と の contact, most の planning write factor の ポ リ メ ラ ー ゼ の contact on も Ming ら か と な っ た. Fe の O_2 と の anti 応 を using し た intermolecular interactions を parsing す る は of this law, planning to write research new た に な breakthrough を も た ら し た の み な ら ず, his composition や molecular assembly, molecular interaction が な main study like と seaborne な っ て た modern life sciences で, big - useful な tool と な ろ う. (Akira Ishihama

项目成果

塩谷光彦: "Macrocyclic Zinc (II) Complexes for Selective Recognition of Nucleobases in Single- and Double-Stranded Polynucleotides." J.Bioimorg.Chem.3. 259-267 (1998)

Mitsuhiko Shioya：“用于选择性识别单链和双链多核苷酸中核碱基的大环锌 (II) 配合物。”J.Bioimorg.Chem.3 (1998)。

Eiichi Kimura: "Metal Sites in Proteins and Models Phosphatases,Lewis Acids and Vanadium" Springer-Verlag, 28 (1997)

Eiichi Kimura：“蛋白质中的金属位点和磷酸酶、路易斯酸和钒模型”Springer-Verlag，28 (1997)

X. H. Bu et. al: "Synthesis, Crystal Structure and Properties of the Copper (II) Complex of a New Dioxocyclam Appended with Two 8-Methylquinolines as Additional Donor Pendants" Inorg. Chim. Acta.249. 125-130 (1996)

X.H.Bu 等。

Yukio Sugiura: "Selective cleavage of tRNAphe with secondary and tertiary structures by enedyne antitumor antibiotics" Bioorg.Med.Chem. 5・6. 1229-1234 (1997)

Yukio Sugiura：“烯炔抗肿瘤抗生素对具有二级和三级结构的 tRNAphe 的选择性切割”Bioorg.Med.Chem. 1229-1234 (1997)。

T. Koike et. al: "Novel Properties of Cooperative Dinuclear Zinc (II) Ions : The Selective Recognition of Phosphomonoesters and Their P-O Ester Bond Cleavage by a New Dinuclear Zinc (II) Cryptate" J. Am. Chem. Soc. 118. 3091-3099 (1996)

T.小池等人。