活性酸素ストレス応答性チロシンキナーゼの遺伝子クローニング

活性氧应激反应性酪氨酸激酶基因克隆

• 批准号: 10877028
• 负责人: 蒲生 忍
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877028/
• 关键词: 酸化ストレス; Srcキナーゼ; 過酸化水素; 細胞周期; STAT二量体; p21; WAF1; 増殖阻害; 細胞死

我々は、過酸化水素により活性化されEGFレセプターなどのチロシンリン酸化するキナーゼを見い出し、酸化ストレス応答チロシンキナーゼOxidant-Stress activated tyrosine Kinase:OSKと名付けた。本研究では1,OSK活性が約80KDaの過酸化水素依存的にチロシンリン酸化される蛋白の出現と一致すること、2,SrcキナーゼのN端を認識する抗体と抗ホスホチロシン抗体がこの蛋白を認識すること、3,レセプター型チロシンキナーゼの活性化に必須のMnイオンが必要であること、4,Srcキナーゼ阻害剤HerbimycinやGenisteinはOSKを阻害しないことを明らかにした。従って、OSKはSrcと構造的な類似性を示すが異なる特性を持つチロシンキナーゼであると結論した。また、EGFによるA431細胞の増殖停止および細胞死誘導に対して検討し、1,増殖停止にはEGF刺激後速やかに転写産生されるCDK阻害タンパクp21/WAF1が必須であること、2,EGFによる増殖停止にはSTAT1αとNFκBが協調的に作用すること、3,高密度状態での細胞死誘導にもNFκBがSTAT1αの発現を誘導すること、4、高密度状態では経時的にSTAT二量体の構成が変化することをを明らかにした。従ってEGFレセプターからのシグナルがSTAT二量体構成の変化により、p21/WAF1による増殖停止からICEプロテアーゼの発現による細胞死へと変換されると示唆された。

I 々 は, acidic water element に よ り activeness さ れ EGF レ セ プ タ ー な ど の チ ロ シ ン リ ン acidification す る キ ナ ー ゼ を see い し, acidification ス ト レ ス 応 answer チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ Oxidant - Stress activated tyrosine Kinase: OSK と name pay け た. This study で は 1, OSK activity about 80 kda が の too acidic water element dependent に チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ る protein の appear consistent と す る こ と, 2, Src キ ナ ー ゼ の n-terminal を know す る antibody と resistance ホ ス ホ チ ロ シ ン antibody が こ の protein を know す る こ と, 3, レ セ プ タ ー type チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の activeness に must の Mn イ オ ン が necessary で あ る こ と, 4 Src キ ナ ー ゼ resistance against tonic Herbimycin や Genistein は OSK を resistance against し な い こ と を Ming ら か に し た. 従 っ て, OSK は Src と constructed な similarity を shown す が different な る features を hold つ チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ で あ る と conclusion し た. ま た, EGF に よ る A431 cells stop の raised colonization お よ び induced cell death に し seaborne て 検 for し, 1, the good breeding to stop に は EGF stimulation speed や か に planning write produce さ れ る CDK resistance against タ ン パ ク p21 WAF1 / が must で あ る こ と, 2, EGF に よ る raised colonization stop に は STAT1 alpha と NF kappa B が coordinating role す に predominate る こ と, 3, high density state で の induced cell death に も NF kappa B predominate が STAT1 alpha の 発 now を induced す る こ と, 4, and high density state で は 経 when に STAT 2 quantity body の constitute が variations change す る こ と を を Ming ら か に し た. 従 っ て EGF レ セ プ タ ー か ら の シ グ ナ ル が STAT 2 quantity body composition の variations change に よ り, p21 WAF1 / に よ る raised colonization stop か ら ICE プ ロ テ ア ー ゼ の 発 now に よ る cell death へ と variations in さ れ る と in stopping さ れ た.

项目成果

Charlotte M. Proby: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris"British Journal of Dermatology. (印刷中). (2000)

Charlotte M. Proby：“用于识别和靶向寻常型天疱疮中抗原特异性 B 细胞的嵌合分子的开发”英国皮肤病学杂志（2000 年出版）。

Jiabing Chen: "In vivo targeting delivery of therapeutie gene into experimental squamous cell carcinomas using anti-EGF receptor antibody: Immunogene approach" Human Gene Therapy. 9.12. 2673-2681 (1998)

Jiabing Chen：“使用抗 EGF 受体抗体将治疗基因体内靶向递送至实验性鳞状细胞癌：免疫基因方法”人类基因治疗。

Yuichiro Ohtake: "Antibody-mediated suicide gene delivery to melanoma cells in vitro and exvivo" Japanese Journal of Cancer Research. (印刷中).

Yuichiro Ohtake：“抗体介导的自杀基因在体外和体外传递到黑色素瘤细胞”，日本癌症研究杂志（正在出版）。

Shinobu Gamou: "Reactive oxygen-enhanced EGF receptor phosphorylation.In“Redox Regulation of Cell Signaling"(Ed Parker & Yodoi)(印刷中)" Marcel-Dekker,Inc.,

Shinobu Gamou：“活性氧增强 EGF 受体磷酸化。在“细胞信号传导的氧化还原调节”中（Ed Parker 和 Yodoi）（印刷中）” Marcel-Dekker, Inc.,