G蛋白欠失VSVを用いたウイルス表面糖蛋白の機能解析

使用 G 蛋白缺失的 VSV 对病毒表面糖蛋白进行功能分析

• 批准号: 10877051
• 负责人: 岡崎 克則
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877051/
• 关键词: VSV; 糖蛋白; ヘルペスウイルス; gB; gC; グルコサミノグリカン; リセプター; gD; GFP; cell-to-cell感染

ヘルペスウイルス主要糖蛋白の機能を明らかにするためウシヘルペスウイルス1(BHV1)の糖蛋白gBあるいはgCを発現する株化細胞を樹立し、これらにG蛋白遺伝子を欠失した水疱性口炎ウイルス(VSVdelG-G)を感染させて表現型混合ウイルスの回収を試みた。培養上清中に放出されたウイルス粒子をMDBK細胞に接種し、感染性を獲得したか否かをGFPの発現によって調べた。それぞれの糖蛋白を単独で導入した場合あるいはトランスフェクションによってgB、gC、gDの3種を導入した場合にもVSVdelG-Gは感染性を獲得しなかった。したがって、ヘルペスウイルスが宿主細胞に感染する際にはgB、gCおよびgD以外のウイルス蛋白を必要とすることが考えられる。ヘルペスウイルス表面糖蛋白のリセプター特異性を明らかにするため、BHV1gCおよびgBを単独で発現して各種グルコサミノグリカン分子との結合活性を調べた。両糖蛋白はヘパリン、ヘパラン硫酸およびコンドロイチン硫酸Bと結合した。ヘパリン、ヘパラン硫酸およびコンドロイチン硫酸Bはウロン酸としてイヅロン酸を含み、コンドロイチン硫酸AおよびCはグルクロン酸のみを含む。したがって、gCおよびgBは[イヅロン酸-硫酸化アミノ糖]の繰り返し構造を認識するものと考えられる。また、ヘパリンおよびヘパラン硫酸のアミノ糖はグルコサミンであるのに対し、コンドロイチン硫酸群のそれはガラクトサミンであることから、アミノ糖種はgCの結合特異性に関与しないことが判った。BHV1はヘパラン硫酸の他にコンドロイチン硫酸Bもレセプターとして利用する可能性がある。

In order to clarify the function of the major glycoprotein, the glycoprotein gB of BHV1 (BHV1) is used to establish the expression of gC in cultured cells, and the G protein gene is used to detect the infection of vesicular stomatitis (VSVdelG-G). The supernatant was released from MDBK cells, and the infectivity was obtained. In the case of introducing three kinds of glycoproteins, namely gB, gC and gD, VSVdelG-G is infectious. When host cells are infected, proteins other than gB, gC, and gD are required. The binding activity of the protein is modulated by the specificity of the protein, BHV1gC and gB. The glycoprotein is a protein that binds to the protein. The acid B is the acid C. The acid A is the acid C. The acid B is the acid C. A study of the structure and structure of the acid and sulfated sugar The relationship between the structural heterogeneity of sulfur acid and sugar species is discussed. BHV-1 is the most likely to be used for other types of sulfuric acid.