造血幹細胞から破骨細胞にいたる分化過程におけるK^+チャネルの発現調節とその意義

造血干细胞向破骨细胞分化过程中K^+通道表​​达的调控及其意义

• 批准号: 10877296
• 负责人: 川瀬 知之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877296/
• 关键词: 造血幹細胞; K^+チャネル; 分化; 破骨細胞

初年度に破骨細胞培養系を確立するに至らなかったこともあり、本年度の研究の中心を造血幹細胞の分化程度とK^+チャネルの活性および発現に移して検討を行った。Phorbol ester処理によりマクロファージに分化させた場合とDMSO処理により顆粒球に分化させた場合のそれぞれにおいて、K_<ATP>チャネル開口薬であるpinacidilの効果を比較した。しかし、いずれの場合においても、pinacidilによる過分極が観察され有意差は認められなかった。これは、Upstate社のポリクローナル抗体を用いたWesternblot法にからも確認された。これは、分化程度が不十分だった可能性もあり、さらに長時間処理をした場合について検討しているところである。また、比較参考的な見地から、ヒト舌扁平上皮癌細胞(SCC25)の増殖および分化活性とK_<ATP>チャネルの活性について検討した。K_<ATP>チャネル開口作用があるカルチトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)はSCC25細胞のK^+の細胞外への流出を促進し、同様の結果はpinacidilにおいても観察された。しかし、増殖に関しては、CGRPは増殖を弱いながらも有意に促進するのに対してpinacidilは効果が認められなかった。これは、K_<ATP>チャネル活性が直接増殖活性と連関しているとは言えないことを示唆している。また、CGRPは分化度の指標とされているケラチン18の発現に明らかな影響を及ぼさなかった。一方、われわれはごく最近、エナメル蛋白質がSCC25細胞の分化および増殖活性を顕著に抑制することを見出した。今後は、この系において、K^+の活性および発現がどのように調節されているか明らかにしていきたい。

In the first year, osteoclast culture lines were established, and in the current year, the center of research conducted a study on the differentiation, activity and development of hematopoietic stem cells. Phorbol ester treatment <ATP>was used to compare the effects of pinacidil on granulocyte differentiation. In the case of the middle, the middle, the middle. The Upstate antibody was identified by Western blot. The degree of differentiation is not very high, but the possibility of long-term processing is very high. The proliferation and differentiation activity of squamous cell carcinoma of the tongue (SCC25) cells were compared with those of the reference cells<ATP>. The effect of K_<ATP>(2 +) on the extracellular efflux of K^+ in SCC25 cells was promoted by CGRP, and the same effect was observed by pinacidil. The growth of CGRP is related to the growth of CGRP. The growth of CGRP is related to the growth of CGRP. The activity of K_cell is directly <ATP>increased. The index of CGRP differentiation was analyzed and the results showed that CGRP differentiation index was significantly lower than CGRP differentiation index. The expression of protein in SCC25 cells was inhibited by the inhibition of cell differentiation and proliferation. In the future, the activity of K^+ in the system will be regulated.