アデノウイルスE1A誘導アポトーシスにおけるトポイソメラーゼIIα特異的分解機構

腺病毒E1A诱导细胞凋亡中拓扑异构酶IIα特异性降解机制

• 批准号: 11144212
• 负责人: 中島 琢磨
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11144212/
• 关键词: トポイソメラーゼIIα; ユビキチン; アデノウイルスE1A; 癌; アポトーシス; UbcH7; 細胞内蛋白分解; 細胞周期

ヒト上皮様癌細胞株KB由来MA1細胞では、アデノウイルスE1Aの発現によるアポトーシスの誘導過程においてトポイソメラーゼ(トポ)IIαのユビキチン(Ub)化と分解がDNA断片化に先行して亢進する。この分解に先行するCaspasesの顕著な活性化が起きないことから、トポIIαの異常分解をアポトーシス開始の決定要因の一つと推定し、(1)トポIIαを標的とする分子量約17kDのUb結合酵素(E2)がUbcH7であること、(2)UbcH7は、E1A誘導アポト一シスの過程でトポIIαの分解に先行して増加すること、(3)トポIIαのUb化と分解にはUbcH7の発現上昇は不十分で、細胞周期依存的に活性化するUb-リガーゼが必要なことを報告した。本年度はトポIIαのUb化と分解の開始機構の解明を目的とし、Two-hybrid法によりトポIIαに対するUb-リガーゼを検索中である。また、抗Ub抗体を用い、in vivoでUb化されたトポIIαを解析した結果、Ub化は約150kDのトポIIα部分分解産物に対して起こることが分った。この部分分解がどの様にして起こるか解析中である。

ヒ ト epithelial origin MA1 KB cells others in cancer cells で は, ア デ ノ ウ イ ル ス E1A の 発 now に よ る ア ポ ト ー シ ス の during induction に お い て ト ポ イ ソ メ ラ ー ゼ (ト ポ) II alpha の ユ ビ キ チ ン (Ub), decomposition of と が DNA fragment に first し て hyperthyroidism す る. こ の decomposition に first す る Caspases の 顕 the な activeness が up き な い こ と か ら, ト ポ II alpha の abnormal decomposition を ア ポ ト ー シ ス began の decided by の つ と presumption し, (1) ト ポ alpha を mark II と す る molecular weight about 17 kd の Ub combined with enzyme (E2) が UbcH7 で あ る こ と, (2) UbcH7 は , induced E1A ア ポ ト a シ ス の process で ト ポ II alpha の decomposition に first し て raised plus す る こ と, (3) ト ポ II alpha の Ub change と decomposition に は UbcH7 の 発 now rise は not very で, cell cycle dependent に activeness す る Ub - リ ガ ー ゼ が necessary な こ と を report し た. This year は ト ポ II alpha の Ub change と decomposition の began institutions の interpret を purpose と し, Two - hybrid に よ り ト ポ II alpha に す seaborne る Ub - リ ガ ー ゼ を 検 cable in で あ る. を use い ま た, resistance to Ub antibodies, in vivo で Ub change さ れ た ト ポ II alpha を parsing し た results about 150 kd, Ub は の ト ポ alpha part II decomposition product に し seaborne て up こ る こ と が points っ た. The <s:1> <s:1> part is decomposed into が に て samples from に て. In the analysis of <s:1> る る, である is given.

项目成果

Takeuchi, A., et al.: "Enhancer and silencer binding proteins involved in the rat cdc2 promoter activation at the G1/S boundary"Genes to Cells. 4. 229-242 (1999)

Takeuchi, A. 等人：“增强子和沉默子结合蛋白参与大鼠 cdc2 启动子在 G1/S 边界的激活”《基因到细胞》。

Ohi, N., et al.: "A novel adenovirus E1B19K-binding protein B5 inhibits apoptosis induced by Nip3 by forming a heterodimer through the C-terminal hydrophobic region"Cell Death & Differentiation. 6. 314-325 (1999)

Ohi, N. 等人：“一种新型腺病毒 E1B19K 结合蛋白 B5 通过 C 端疏水区形成异二聚体来抑制 Nip3 诱导的细胞凋亡”细胞死亡

Shirasuna, K., et al.: "The G10BP-1 gene encoding GC box binding protein, is a target of Myc and Jun/Fos"Genes to Cells. 4. 277-289 (1999)

Shirasuna, K. 等人：“编码 GC 盒结合蛋白的 G10BP-1 基因是 Myc 和 Jun/Fos”基因对细胞的靶标。

Yageta, M., et al.: "The adenovirus E1A domains required for induction of DNA replication in G2/M arrested cells coincide with those required for apoptosis"Oncogene. 18. 4767-4776 (1999)

Yageta, M., 等人：“在 G2/M 停滞细胞中诱导 DNA 复制所需的腺病毒 E1A 结构域与细胞凋亡所需的结构域一致”。

Tsunoda, H., et al.: "Effect of wild-type and mutated p53 and Id proteins on the induction of apoptosis by adenovirus E1A, c-myc, bax, and nip3 in p53 null mouse cerebellum cells"Biochem. Biophys. Res. Commum.. 255. 722-730 (1999)

Tsunoda, H. 等人：“野生型和突变型 p53 和 Id 蛋白对腺病毒 E1A、c-myc、bax 和 nip3 在 p53 缺失小鼠小脑细胞中诱导细胞凋亡的影响”Biochem。