生殖細胞成立に関わるキナーゼmRNAの動態及びキナーゼによる転写制御の機構解析

参与生殖细胞形成和激酶转录控制的激酶 mRNA 动力学的机制分析

• 批准号: 11155218
• 负责人: 南 康博
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11155218/
• 关键词: 生殖細胞; 核内キナーゼ; Dmnk; 線虫; Ce-Cds-1; 減数分裂; 相同組み換え; RNAi法

本年度の研究においては、まずショウジョウバエの生殖細胞に特異的に発現する核内蛋白質キナーゼDmnk(Drosophila maternal nuclear kinase)に会合する分子の検索をyeast two hybrid法により行い、卵形成過程においてDmnkと類似の発現様式を呈するRNA結合蛋白質、Orbを同定することに成功した。また、Dmnk蛋白質には、択一的スプライシングの結果Dmnk-LとDmnk-Sが存在するが、Dmnk-SのみがOrbと会合することが明らかになった。我々はさらに、Orb蛋白質がDmnk mRNAに結合することを示唆する知見を得ている(論文準備中)。また我々は、データベースの解析結果をもとに、線虫のDmnk相同分子であるCe-Cds-1の同定、遺伝子クローニングを行った。Ce-Cds-1もDmnkと同様にforkheadassociated(FHA)ドメインをN末端側に有しており、最近注目を集めているCds1/Chk2ファミリーに属することが示された。Ce-Cds-1の機能を解析する目的で、RNA干渉法(RNAi)を行ったところ、F_2progenyの大部分が胚性致死であり、生存したものについてはHIM(high incidence of male)の表現型が認められた。さらに詳細な解析の結果、Ce-Cds-1が減数分裂における相同組み換えに必須の役割を担う蛋白質キナーゼであることが明らかになった(論文投稿中)。

This year's research has been successful in identifying RNA binding proteins and Orb binding proteins that are specifically expressed in germ cells using the yeast-two hybrid method. Dmnk-L and Dmnk-S exist and meet in the same way. We found that Orb protein binds to Dmnk mRNA, and we found that Orb protein binds to Dmnk mRNA. The analysis results of Ce-Cds-1, Ce-Cds-1 and Ce-Cds-1 were analyzed. Ce-Cds-1 and Dmnk are the same as forkheadassociated(FHA), and the N-terminal side has the most recent focus. Cds-1/Chk-2 has the most recent focus. For the purpose of functional analysis of Ce-Cds-1, RNA interference (RNAi) and F_2progeny are mostly recognized as embryonic lethality, survival, and HIM(high incidence of male) phenotypes. Detailed analysis results, Ce-Cds-1 meiosis, same group, necessary service, protein,(paper submission).

项目成果

Oishi,I., ---, and Minami,Y.: "Spatio-temporally regulated expression of receptor tyrosine kinases, mRor1, mRor2, during mouse development : implications in development and function of the nervous system"Genes to Cells. 4. 41-56 (1999)

Oishi,I., --- 和 Minami,Y.：“小鼠发育过程中受体酪氨酸激酶 mRor1、mRor2 的时空调节表达：对神经系统发育和功能的影响”《基因到细胞》。

Liu,Z-J.,Tanaka,Y.,---,and Minami,Y.: "A novel role for H-Ras in the regulation of VLA-4 integrin and VCAM-1 via c-Myc-dependent and -independent mechanisms"J.Immunol.. 163. 4901-4908 (1999)

Liu，Z-J.，Tanaka，Y.，---，和 Minami，Y.：“H-Ras 通过 c-Myc 依赖和独立机制调节 VLA-4 整合素和 VCAM-1 的新作用