raftによる神経細胞の分化・生存のシグナルの調節機構の解明

阐明raft对神经元分化和存活信号的调节机制

• 批准号: 11159203
• 负责人: 武藤 多津郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11159203/
• 关键词: GM1ガングリオシド; Trk; 神経栄養因子; チロシンキナーゼ; カヴェオラ

我々は、これまで神経疾患の新しい治療法開発を目指して種々の検討をしてきた。神経系組織の分化生存に必須の役割を果たすNGFをはじめとする神経栄養因子に着目し、その細胞内情報伝達を活性化させる内因性生理物質の探索をおこなってきており、神経細胞膜中のカヴェオラ(CV)という特殊な構造物中に多量に存在するGM1ガングリオシド(GM1)が神経栄養因子受容体のTrkを活性化させること、またその作用はGM1とTrkが強固に結合することが必要であることを見つけてきた。本年度の本研究では1)Trk中のGM1結合部位の同定、2)その結合部位を欠くdeletion mutant cDNAの作成とそのstable transfectantを作成し、3そのstable transfectant中のTrkのプロセッシングヘの影響とCV形成に対する影響を明らかにすることを目的に実験を進めた。その結果、1)GM1の結合部位はTrkのjuxtamembraneのextracellular側の糖鎖付加部位近辺であること、2)この結合部位を欠くdeletion mutantのTrkは細胞内プロセッシングに異常を来し正常に細胞膜にtargettingされないこと、またこの変異TrkはNGFに反応せず常に活性化された状態になっていることを見い出した(論文投稿中)。この結果をもとに、こうした変異Trkを発現する細胞系を用いて、CV機能に及ぼす影響を明らかにすると共にTrk始点とする細胞内情報伝達系への作用を主にキナーゼカスケードの観点から明らかにした。

God I 々 は, こ れ ま で 経 disorders の new し い therapy open 発 を refers し て kind 々 の beg を 検 し て き た. God 経 department organization survival に の differentiation must be cut を の service fruit た す model NGF を は じ め と す る god 経 tech students.their ownship raise factor に mesh し, そ の intelligence 伝 in cells of を activeness さ せ る endogenous physiological substances の explore を お こ な っ て き て お り 経 cell membranes, god の カ ヴ ェ オ ラ (CV) と い う special な に に abundant in structure す る this ガ ン グ リ オ シ ド (this) が god 経 tech students.their ownship raise factor by the capacity of body の Trk を activeness さ せ る こ と, ま た そ の role は this と Trk が strong に combining す る こ と が necessary で あ る こ と を see つ け て き た. This year, in this study, で で 1) the binding site of <s:1> GM1 in Trk was determined by <s:1>, 2) the binding site of そ <s:1> is を lacking くdeletion mutant cDNA samples were made into とそ stable samples, and を transfectant was made into を and 3そ stable samples In transfectant の Trk の プ ロ セ ッ シ ン グ ヘ の influence と CV form に す seaborne る influence を Ming ら か に す る こ と に を purpose be 験 を into め た. Youdaoplaceholder0 そ results: 1) the binding site of GM1 is Trk is juxtamembrane is extracellular, the glycolock-conjugated site is close to 辺である と と, 2) the binding site of を is short of くdeletion Mutant の Trk は intracellular プ ロ セ ッ シ ン グ に abnormal to normal に し を membrane に targetting さ れ な い こ と, ま た こ の - different Trk は model NGF に anti 応 せ ず often に activeness さ れ た state に な っ て い る こ と を see い out し た (in paper submitted). こ の results を も と に, こ う し た - different Trk を 発 now す を る cell line with い て, CV function に and ぼ す influence を Ming ら か に す る と altogether に Trk starting point と す る intelligence 伝 in cells of department へ の role を main に キ ナ ー ゼ カ ス ケ ー ド の 観 point か ら Ming ら か に し た.

项目成果

Mutoh T, Sobue G, Hamano T, Kuriyama M, Hirayama M, Yamamoto M, Mitsuma T.: "Decreased tyrosine phosphorylation of TrkB receptor in the spinal cords from the patients with amyotrophic lateral sclerosis."Neurochem Res. (in press).

Mutoh T、Sobue G、Hamano T、Kuriyama M、Hirayama M、Yamamoto M、Mitsuma T.：“肌萎缩侧索硬化症患者脊髓中 TrkB 受体的酪氨酸磷酸化降低。”Neurochem Res。

Hamano T, Mutoh T, Sugie H, Koga H, Kuriyama M.: "Phosphoglycerate kinase deficiency. An adult myopathic form with a novel mutation."Neurology. (in press).

Hamano T、Mutoh T、Sugie H、Koga H、Kuriyama M.：“磷酸甘油酸激酶缺乏症。具有新突变的成人肌病形式。”神经学。

Fukumoto S, Mutoh T, Hasegawa T, Miyazaki H, Okada M, Goto G, Furukawa K, Urano T, Furukawa K.: "GD3 synthase gene expression in PC12 cells resulted in the continuous activation of TrkA and ERK1/2, leading to enhanced proliferation"J. Biol. Chem.. (in pre

Fukumoto S、Mutoh T、Hasekawa T、Miyazaki H、Okada M、Goto G、Furukawa K、Urano T、Furukawa K.：“PC12 细胞中 GD3 合酶基因的表达导致 TrkA 和 ERK1/2 的持续激活，从而导致

Mitsuma N, Yamamoto M, Li M, Ito Y, Mitsuma T, Mutoh T, Takahashi M, Sobue G.: "Expression of GDNF receptor (Ret and GDNFR-α) mRNAs in the spinal cord of patients with amyotrophic lateral sclerosis."Brain Res. 820. 77-85 (1999)

Mitsuma N、Yamamoto M、Li M、Ito Y、Mitsuma T、Mutoh T、Takahashi M、Sobue G.：“肌萎缩侧索硬化症患者脊髓中 GDNF 受体（Ret 和 GDNFR-α）mRNA 的表达。”脑研究 820. 77-85 (1999)

Mutoh T, Kumano T, Nakagawa H, Kuriyama M.: "Involvement of tyrosine phosphorylation and in HMG-CoA reductase inhibitor-induced cell death of L6 myoblasts."FEBS Lett. 444. 85-89 (1999)

Mutoh T、Kumano T、Nakakawa H、Kuriyama M.：“酪氨酸磷酸化和 HMG-CoA 还原酶抑制剂诱导的 L6 成肌细胞细胞死亡的参与。”FEBS Lett。