血球の分化と生存における細胞周期制御蛋白p21の新しい機能に関する研究

细胞周期调控蛋白p21在血细胞分化和存活中的新功能研究

• 批准号: 11877173
• 负责人: 水谷 修紀
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877173/
• 关键词: p21 CKI; Cytoplasm; Apoptosis; MAP kinese; ASKI; Monocyte; GFP; NLS

我々は細胞周期阻害因子p21が細胞質に発現することにより、アポトーシス阻害作用を発揮すること、.そのメカニズムとしてMAPKKKであるASK1が少なくとも1つの標的分子であることを昨年報告した(Asada et a1,EMBO J,1999)。今回我々は亜鉛誘導によらない恒常的に細胞質p21(DNLS-p21)を発現する新たなBaf3(IL-3依存性pro-B細胞株)およびU937細胞を樹立した。これらの細胞株を用いて、DNLS-p21と他の細胞周期制御因子との関係およびアポトーシス抵抗性について検討した。DNLS-p21はサイクリンD,E,AやCDK2と結合できたが、PCNAとは結合できなかった。L-3存在下ではモック細胞とDNLS-p21発現細胞のアポトーシス感受性に変化は見られなかったが、IL-3非存在下においては抗がん剤や酸化的ストレスによるアポトーシスに対してDNLS-p21発現細胞は有意に抵抗性を獲得していた。酸化的ストレスの際、アポトーシス特異的なMAPキナーゼ経路の活性化も抑制していた。以上の結果より、細胞質p21は単球系のみならずリンパ球系の細胞においてもアポトーシス阻害作用があることが判明した。このシステムは、アポトーシス特異的MAPキナーゼ経路の標的分子の同定の有用な手段となるのではないか、と考える。単球の分化の過程でどのようにしてp21が細胞質に発現するようになるのか。今年我々はこのヒントをつかんだ。p21の核内移行シグナルを含むGFP融合蛋白を単球系前駆細胞WEHI3BD+に発現させたところ、GFPのシグナルは核にのみ見られた。この細胞をビタミンD3で分化誘導するとGFPのシグナルが核のみではなく細胞質にも見られるようになった。この結果から単球への分化に伴ってp21の核移行シグナルをモジュレートする分子が発現してくるのではないかと考えられた。今後、この分子の同定をする予定である。

I 々 は cell cycle resistance against factor p21 が cytoplasm に 発 now す る こ と に よ り, ア ポ ト ー シ ス resistance against role を 発 swing す る こ と,. そ の メ カ ニ ズ ム と し て MAPKKK で あ る ASK1 が less な く と も 1 つ の target molecules で あ る こ と を yesterday reported in し た (Asada et a1, the EMBO J,1999. Now back to my 々 は 亜 lead induced に よ ら な い constant に cytoplasm p21 (DNLS - p21) を 発 now す る new た な Baf3 (IL - 3 dependency pro - B cell lines) お よ び を U937 cells establish し た. こ れ ら の cell lines を with い て, DNLS p21 と he の cell cycle suppression factor と の masato is お よ び ア ポ ト ー シ ス resistance に つ い て beg し 検 た. DNLS - p21 は サ イ ク リ ン D, E, A や CDK2 と combining で き た が, PCNA と は combining で き な か っ た. L - 3 in the presence of で は モ ッ ク cells と DNLS - p21 発 now cells の ア ポ ト ー シ ス susceptibility に variations change は see ら れ な か っ た が, IL - 3 the presence of に お い て は resistance が ん tonic や acidification ス ト レ ス に よ る ア ポ ト ー シ ス に し seaborne て DNLS - p21 発 now cells は intentionally に resistance を gain し て い た. Acidified ストレス <s:1> international and アポト シス シス シス specific なMAPキナ ゼ ゼ ゼ pathway <s:1> activation <s:1> inhibition of <s:1> て て た た た て て た た た た て た. Results above の よ り, cytoplasmic p21 は 単 ball is の み な ら ず リ ン パ ball is の cells に お い て も ア ポ ト ー シ ス resistance against role が あ る こ と が.at し た. こ の シ ス テ ム は, ア ポ ト ー シ ス specific MAP キ ナ ー ゼ 経 road の の target molecules might be useful の な means と な る の で は な い か と exam え る. The process of 単 globule <s:1> differentiation <e:1> で <s:1> <e:1> ように <s:1> てp21が cytoplasm に occurrence するようになる が が This year I 々, 々, ヒ, ヒ, トを, んだ, んだ, んだ. P21 の nuclear internal migration シ グ ナ ル を containing む GFP fusion protein を 単 before the ball is 駆 cells WEHI3BD + に 発 now さ せ た と こ ろ, GFP の シ グ ナ ル は nuclear に の み see ら れ た. こ の cells を ビ タ ミ ン D3 で induction す る と GFP の シ グ ナ ル が nuclear の み で は な く cytoplasm に も see ら れ る よ う に な っ た. こ の results か ら 単 ball へ に の differentiation with っ て p21 の nuclear migration シ グ ナ ル を モ ジ ュ レ ー ト す る molecular が 発 now し て く る の で は な い か と exam え ら れ た. In the future, the <s:1> molecule <e:1> will be determined to をする and である.

项目成果

Domenico Delia et al: "ATM protein and P53ser-15 phosphorylation in Ataxia- Telangiactasia (AT) patients amd AT heterozygotes"Br. J. Cancer. (in press).

Domenico Delia 等人：“共济失调毛细血管扩张 (AT) 患者和 AT 杂合子中的 ATM 蛋白和 P53ser-15 磷酸化”Br。

Minoru Asada et al: "p21Cip1/WAF1 is important for differentiation and survival of U937 cells"Leukemia. 12. 1944-1950 (1998)

Minoru Asada 等人：“p21Cip1/WAF1 对于 U937 细胞的分化和存活很重要”白血病。