変異p53陽性p190タイプPh白血病細胞株における細胞死の分子機構

突变型p53阳性p190型Ph白血病细胞系细胞死亡的分子机制

• 批准号: 04807180
• 负责人: 水谷 修紀
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04807180/
• 关键词: bcl-2; IL-6; p190BCR; ABL; アポプトーシス; BCL-2

p53変異を有するp190BCR/ABL細胞株(KOPM30)の細胞死のメカニズムについて我々はいくつかの興味ある知見を得た。KOPM30はIL6刺激により約10-15%の分画で細胞死が誘導される。KOPM30には細胞内のbcl-2発現の強いものと弱いものの2相性が認められ、IL-6刺激によってbcl-2発現の弱い分画が消失した。bcl-2発現と細胞死の関連を明らかにする目的でレトロウイルスベクターにヒトbcl-2cDNAを組み込みこのウイルスによりKOPM30を形質転換し、bcl-2を約20倍強く発現するKOPM30-B5をクローニングした。この細胞をIL-6存在下で培養すると細胞死は全く誘導されなかった。このことはIL-6が増殖因子として作用するためには細胞内bcl-2発現に裏打ちされていることが必要とされていることを示唆していた。そこでbcl-2翻訳開始コドンを含む20bpのantisense fragmentを発現ベクターに組み込んだものを作成し、これをU937細胞株に導入した(AS-U937)。AS-U937をIL-6で刺激したところ顕著な細胞死を誘導することができた。現在CD20抗原を発現するプラスミドとbcl-2antisense plasmidとのcotransfectionによるアッセイ系を確立しているところであるが、我々の今回の実験結果はIL-6などの増殖因子が細胞増殖作用を発揮するためにはそのレセプター発現が認められることと同時に細胞内におけるbcl-2などの生存因子の発現が必要とされていることを物語っており、サイトカイン研究における新しい視点を提供するものと考えられる。

p190BCR/ABL cell line (KOPM30) is a cell line with p53 variation. KOPM30 was induced by IL6 stimulation in about 10-15% of the cells. The strong and weak expression of bcl-2 in KOPM30 cells disappeared, while the weak expression of bcl-2 in IL-6 cells disappeared. To clarify the relationship between bcl-2 expression and cell death, the bcl-2 cDNA was assembled and the KOPM30 gene was qualitatively transformed, and bcl-2 was approximately 20-fold stronger than KOPM30-B5 gene. These cells were cultured in the presence of IL-6 and were induced to die completely. The expression of bcl-2 in cells is essential for the development of IL-6. The bcl-2 gene was introduced into U937 cell line (AS-U937). AS-U937 IL-6 stimulates and induces cell death Now CD20 antigen production in the first place, bcl-2 antisense plasmid and cotransfection in the first place to establish the system, we now have the results that IL-6, a proliferation factor and cell proliferation in the first place, at the same time, intracellular bcl-2, survival factor production is necessary. A new perspective is provided.

项目成果

Miyamura K,Mizutani S.: "Long persistent bcr-abl positive transcript detected by polymerase chain reaction after marrow transplant for chronic Myelogenous Leukemia without clinical relapse:a study of 64 patients." Blood. 81. 1089-1093 (1993)

Miyamura K、Mizutani S.：“慢性粒细胞白血病骨髓移植后聚合酶链反应检测到长期持续的 bcr-abl 阳性转录本，无临床复发：一项针对 64 名患者的研究。”

Miyashita T,Mizutani S.: "Molecular diversification of dominant subclones in vivo and in vitro Ph-positive ALL." Leukemia. 17. 586-592 (1993)

Miyashita T，Mizutani S.：“体内和体外 Ph 阳性 ALL 显性亚克隆的分子多样化。”

K.Miyashita S.Mizutani et al.: "Long persistent bcr-abl positive transcript detected by polymerase chain reaction after marrow transplant for chronic myelogenous leukemia without clinical relapse:a study of 64 patients." Blood in press. (1992)

K.Miyashita S.Mizutani 等人：“慢性粒细胞白血病骨髓移植后聚合酶链式反应检测到长期持续的 bcr-abl 阳性转录本，无临床复发：一项针对 64 名患者的研究。”

T.Miyashita S.Mizutani et al.: "Monoclonal proliferation of blast cell in transient Myeloproliferative Disorder (TAM) in Down syndrome." in Modern Trends in Human Leukemia 11 Sprinfer-Verlag, 5 (1992)

T.Miyashita S.Mizutani 等人：“唐氏综合症中短暂性骨髓增殖性疾病 (TAM) 中母细胞的单克隆增殖。”

T.Miyashita S.Mizutani et al.: "Carrier detection in aγglobulinemia by X chromosome inactivation analysis." Acta Paediatr Jpn. 34. 267-272 (1992)

T. Miyashita S. Mizutani 等：“通过 X 染色体失活分析检测无γ球蛋白血症”Acta Paediatr Jpn 34. 267-272 (1992)