权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

両生類イモリの心臓における再生に関する分子細胞生物学的研究

两栖蝾螈心脏再生的分子细胞生物学研究

基本信息

批准号：
11878146
负责人：
松田良一
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878146/
关键词：
イモリ再生成長因子心臓ブロモデオキシウリジン

项目摘要

本研究では\無尾両生類イモリを用い、損傷を受けた心臓組織における再生能について検討した。その結果、以下のようなことが明らかとなった。1)トリカインメタンスルフェートにより、全身麻酔ちたイモリの胸部を切開し、液体窒素で冷却したステンレス棒を心臓に3秒間3回押し当てることにより、凍傷を追わせた。縫合後、イモリを蘇生させ、経日的にBrdUを腹腔内注射し、48時間後に心臓を摘出し、凍結切片を作成した。カエル心筋ミオシン重鎖にたいするウサギ・ポリクロナル抗体を作成し、市販の抗BrdUモノクロナス抗体と二重染色したところ、損傷後14日目の心筋組織においてのみ、細胞質に心筋タイプのミオシンを発現し、核にBrdUを取り込んだ細胞が検出された。2)損傷を受けた心筋細胞を分離し、10%胎児牛血清、50%L-15培地を用いて培養した。経日的にBrdUを48時間取り込ませ、増殖細胞のモニターを行った。細胞は増殖を開始したが、1)で見られた心筋タイプのミオシン重鎖とBrdUを両方とも含む細胞の検出には成功しなかった。そこで、さらに培養条件を改善すべく、和光純薬製Ultroserを2%の濃度で添加したところ、心筋細胞の増殖を確認した。このUltroserは、FGF、IGF等の種々の成長因子を含むので、目下、Ultroserに含まれる心筋細胞の増殖因子の解明をおこなっている。

In this study, we investigated the effects of biological damage on tissue regeneration. The result is that the following is the result. 1) The whole body is numb, the chest is cut open, the liquid is cooled, the heart is pressed back in 3 seconds, and the frostbite is recovered. After suture, the heart was extracted 48 hours later, and frozen sections were prepared. In addition, the anti-BrdU antibody and double staining were performed on the 14th day after injury, and the cytosol and cytoplasm of the cardiac muscle tissue were detected. 2)The injured heart muscle cells were isolated and cultured in 10% fetal bovine serum and 50% L-15 medium. The time of day is 48 minutes. Cell proliferation begins with 1) the heart muscle cells begin to re-lock and 1) the cells begin to re-lock and 1) the cells begin to re-open. The culture conditions were improved, and the growth of cardiac muscle cells was confirmed by adding 2% Ultroser to the culture medium. These Ultroser, FGF, IGF and other growth factors contain the growth factors of heart muscle cells.