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口腔ソマトセンサリー刺激の標的分子クローニングおよび作動機構の分子生物学的解析

口腔体感刺激作用机制的靶分子克隆及分子生物学分析

基本信息

批准号：
12019214
负责人：
阿部啓子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトが感じる広義の「味の感覚」は、味蕾を介した化学感覚である味覚と、味蕾を介さない感覚である体性感覚に分類される。本研究では後者の体性感覚に注目し、舌後部および咽頭部に投射し、味覚と体性感覚の両者を司る舌咽神経について解析を行った。口腔咽頭部への体性感覚刺激に対し、それに応答した細胞を同定することは困難であることから、舌咽神経節(Petrosal Ganglion;PG)の細胞の初代培養系を確立し、数日間培養した舌咽神経細胞に対して様々な刺激を行い、それに応答する細胞をカルシウムイメージングにより解析した。その結果、3μMのカプサイシンによって、一部の細胞の細胞内カルシウムイオン濃度の上昇が引き起こされた。そこで、測定後の細胞を、カプサイシンの受容体であるVR1の抗体で抗体染色を行ったところ、応答した細胞との相関が見られた。このことから、PG細胞において、VR1によってカプサイシンが受容されていることが示唆された。続いて、他の刺激性天然有機化合物の溶液による刺激を調べたところ、ジンゲロン(1mM)、アリルイソチオシアネート(1mM)、クロトニルイソチオシアネート(1mM)、ジアリルスルフィド(1mM)、ジアリルジスルフィド(1mM)、ジプロピルジスルフィド(5mM)といった物質でもカルシウムイオン濃度の上昇が引き起こされた。ここで、同一の細胞が複数の刺激物質に応答することが多く、その関係を調べたところ、カプサイシン、ジンゲロンに応答する細胞群とイソチオシアネート類、スルフィド類に応答する細胞群があることが明らかとなった。さらに、これらの物質に反応する細胞と、VR1の類似体であるVRL-1との関係を明らかにするため、応答測定後の細胞を抗VRL-1抗体で抗体染色したところ、相関は認められなかった。

"Taste" is the meaning of "taste" and "taste bud" is the classification of "taste" and "taste bud". This study focuses on the analysis of the latter's somatic sensory system, the projection of the posterior part of the tongue and the pharynx, and the analysis of the sensory system of the tongue and pharynx. The primary culture system of Petrosal Ganglion (PG) cells was established and analyzed in response to somatic sensory stimulation in the oropharynx and head. The results showed that the intracellular concentration of 3μM protein increased in some cells. After the test, the cell and the receptor were stained with antibody. This is the first time I've ever seen one of these things. In addition, the solution of other excitatory natural organic compounds was adjusted to the following conditions: excitation temperature, pH (1 mM), allogeneic solution recovery (1 mM), allogeneic solution recovery (5 mM), and increase in the concentration of allogeneic substance. The same cell has a plurality of stimulating substances, and the relationship between them is modulated. The same cell has a plurality of stimulating substances. The same cell has a plurality of stimulating substances. The same cell has a plurality of stimulating substances. The relationship between VRL-1 and VRL-1 in cells and VRL-1 in cells was investigated.