分子モーター蛋白アクチン-ミオシンのX線・ESRによる動的構造解析と結晶化

使用 X 射线和 ESR 对分子运动蛋白肌动蛋白-肌球蛋白进行动态结构分析和结晶

基本信息

  • 批准号:
    12030218
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.15万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は筋収縮のエネルギー変換を蛋白質の分子構造に立脚して理解するために、最小単位であるアクチン単、2量、3量体とミオシン頭部の複合体のX線散乱実験とモーター蛋白用にESR精密角度計測を行った。Gアクチンを化学修飾し、全く重合しないがミオシンと結合するアクチンモノマーを調製し、ミオシン頭部S1との1:1複合体を形成させ、X線溶液散乱強度パターンのモデル計算フィットではアクチンモノマー分子上で、S1が長軸のまわりに90度以上回転した。この結果はATP加水分解中のアクチン-ミオシンの弱い結合の本体を捉えたものと考えれた。今年度はアクチン2量体、3量体を作成し、さらに高次の構造を解析した。重合しない2量体、3量体ともKl中の化学修飾で得られた。90mMKClでは2:1、3:1複合体ができた。また複合体形成によるATP分解促進やATPによる結合強度の変化も認められなかった。90mMKClにおける2:1または3:1複合体のX線散乱実験も成功し解析を始めた。その結果、アクチン単独では1、2または3量体×2を形成し、S1との結合で×2は解離し、1、2または3量体に1個のS1が結合すると解釈できた。アクチン・ミオシン複合体モノマーの結晶化も精力的に押し進めているがまだ成功には至っていない。モーター蛋白用高感度ESR測定のためループギャップ共振器を試作し、引続き調整中である。最近はミオシンネック軽鎖に結合したスピンラベルのESRスペクトルを頭部2つから由来するスペクトル和として精密fitした。それ以外の可能性(ランダム+単一角度)も検定したがフィットは悪かった。チューブリン(TU)結合部位の側鎖のスピンラベルはTUへのキネシン結合の飽和度に依存し、協同的に束縛を受けた。このことはキネシンの方向性のある運動が、TUサブユニット間で構造的に生じる結合強度の空間差によるという仮説を支持した。
We understand the molecular structure of the protein by ESR, and the X-ray scattering of the protein by ESR. G is chemically modified, completely overlapped, combined, modulated, and formed into a 1:1 complex at the head of S1. X-ray solution scattered intensity is calculated, and the long axis of S1 is rotated at more than 90 degrees. The results show that ATP hydrolysis is a weak combination of organic and inorganic substances. This year's high-order structure analysis is carried out in two volumes and three volumes. Chemical modification in the 2-and 3-volume combinations is possible. 90 mM KCl 2: 1,3:1 complex. ATP decomposition promotes ATP binding strength and changes in complex formation. 90 mM KCl 2:1 complex X-ray scattering analysis was successful. As a result, S1 and S2 are formed independently of each other, S1 and S2 are dissociated independently of each other, S1 and S2 are dissociated independently of each other, and S1 and S2 are dissociated independently of each other. The crystallization process of the complex was successfully completed. High sensitivity ESR measurement of protein Recently, the ESR has been selected from the following categories: The possibility of a change in angle is determined. The saturation of TU binding depends on and is constrained by the interaction of TU binding sites. The directional motion of the structure is supported by the spatial difference of the bonding strength.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
荒田敏昭: "筋肉モータータンパク質アクチンとミオシンのダイナミックな分子構造と相互作用"生化学. 72巻5号. 388-392 (2000)
Toshiaki Arata:“肌肉运动蛋白肌动蛋白和肌球蛋白的动态分子结构和相互作用”《生物化学》第 72 卷,第 5 期。388-392 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
T.Arata: "Angular Distribution of Spin-Labeled Light Chain of Myosin Heads in Muscle Figres, as Derived from Close Fit of ESR Spectrum"Journal of Muscle Res.Cell Motil.. 21(印刷中). (2000)
T.Arata:“肌肉图中肌球蛋白头的自旋标记轻链的角度分布,源自 ESR 光谱的紧密拟合”,肌肉研究杂志。细胞运动杂志 21(印刷中)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

荒田 敏昭其他文献

タンパク質結晶の熱物性値における結晶異方性の影響について
晶体各向异性对蛋白质晶体热物理性质的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    牧 祥 ;田中 誠一 ;藤原 誠之 ;Eka Erzalia ;加藤 瑞葵 ;肥後 克匡 ;井阪 優希 ;萩原 政幸 ;荒田 敏昭
  • 通讯作者:
    荒田 敏昭

荒田 敏昭的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('荒田 敏昭', 18)}}的其他基金

電子スピンで探るモーターたんぱく質の分子ゆらぎ
利用电子自旋探索运动蛋白的分子波动
  • 批准号:
    19037016
  • 财政年份:
    2007
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
モーター蛋白質アクトミオシンの結晶化とX線とESRによる分子構造解析
运动蛋白肌动球蛋白的结晶以及使用 X 射线和 ESR 的分子结构分析
  • 批准号:
    11156218
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
ESRとX線解析で捉える分子モーター・アクトミオシンの動的構造
ESR 和 X 射线分析捕获分子运动肌动球蛋白的动态结构
  • 批准号:
    10175217
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
分子モータ・アクトミオシンのESRによる動的構造解析とその結晶化
ESR及其结晶对分子运动肌动球蛋白的动态结构分析
  • 批准号:
    09279223
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
筋肉アクトミオシンのエネルギ-変換複合体の立体構造
肌肉肌动球蛋白能量转换复合物的三维结构
  • 批准号:
    03223209
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
アクチン・ミオシン複合体の分子微細運動と接触面微細構造
肌动蛋白-肌球蛋白复合物的分子微运动和接触表面微结构
  • 批准号:
    02239208
  • 财政年份:
    1990
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
張力を発生している筋肉におけるアクトミオシンの構造
产生张力的肌肉中肌动球蛋白的结构
  • 批准号:
    61780204
  • 财政年份:
    1986
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
張力発生中のアクトミオシン ATP アーゼ反応中間体の構造
张力产生过程中肌动球蛋白 ATP 酶反应中间体的结构
  • 批准号:
    60780189
  • 财政年份:
    1985
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
F-アクチンに結合したミオシン頭部の ATP による構造変化
ATP 诱导的肌球蛋白头与 F-肌动蛋白结合的结构变化
  • 批准号:
    59780173
  • 财政年份:
    1984
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

相似海外基金

モーター蛋白質アクトミオシンの結晶化とX線とESRによる分子構造解析
运动蛋白肌动球蛋白的结晶以及使用 X 射线和 ESR 的分子结构分析
  • 批准号:
    11156218
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
ESRとX線解析で捉える分子モーター・アクトミオシンの動的構造
ESR 和 X 射线分析捕获分子运动肌动球蛋白的动态结构
  • 批准号:
    10175217
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
分子モータ・アクトミオシンのESRによる動的構造解析とその結晶化
ESR及其结晶对分子运动肌动球蛋白的动态结构分析
  • 批准号:
    09279223
  • 财政年份:
    1997
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
アクチン・ミオシン複合体のX線溶液散乱と結晶化
肌动蛋白-肌球蛋白复合物的X射线溶液散射和结晶
  • 批准号:
    08214207
  • 财政年份:
    1996
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
アクチン・ミオシン頭部複合体の結晶化とX線回析
肌动蛋白-肌球蛋白头复合物的结晶和X射线衍射
  • 批准号:
    07224206
  • 财政年份:
    1995
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
アクチン・ミオシン複合体の結晶化の試みとX線回析
尝试结晶肌动蛋白-肌球蛋白复合物和 X 射线衍射
  • 批准号:
    06235209
  • 财政年份:
    1994
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
アクトミオシン単体複合体の調製、結晶化の試みとX線回折学的研究
肌动球蛋白简单复合物的制备、结晶尝试及X射线衍射研究
  • 批准号:
    05244208
  • 财政年份:
    1993
  • 资助金额:
    $ 1.15万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了