免疫担当細胞を用いた免疫疾患特異的なゲノム上での転写活性化領域マッピングの試み

尝试使用免疫活性细胞在免疫疾病特异性基因组上绘制转录激活区域图谱

• 批准号: 12204036
• 负责人: 山本 一彦
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12204036/
• 关键词: メチル化; 脱メチル化; 遺伝子不活化; SNP; ゲノム

SNPなどのゲノム情報が急速に蓄積されており、これらが疾患発症や病態形成にどのように関与しているかを解明していくことが重要な課題となっている。しかし、すべての疾患について全ゲノムのタイピングを行うことは不可能であり、集中的に解析すべきゲノム上の領域を設定することは有用と考えられる。ほ乳類では、インプリンティング、X染色体不活化などの遺伝子不活化がCpG島のメチル化によって調節されている。さらに、メチル化あるいは脱メチル化されている遺伝子はクラスターを形成していることが知られており、おそらくゲノム上の領域ごとに制御されていると考えられている。従って、メチル化を受けている領域に存在するSNPは疾患に関与している可能性は低く、転写活性化領域に存在するSNPは疾患の成立や病態の進展に関与している可能性が高いと考えられる。そこで、本研究では、比較的採取しやすい免疫疾患におけるリンパ球を対象にして、健常人と各疾患罹患の患者で、脱メチル化している領域を解析するシステムを確立することを目的とした。方法は、健常人と患者から末梢血リンパ球を採取し、DNAを抽出し、メチル化感受性4塩基切断酵素にて切断できた領域以外の脱メチル化領域を優先的に増幅したライブラリーをそれぞれまず構築しつつある。これには、suppression PCRの原理を用い、分子内アニーリングとその内側の配列へのプライマーアニーリングとを競合させて、両端に同じ配列をもった分子の増幅を阻害する方法を用いた。次に健常人と患者間での比較で、疾患特異的に脱メチル化される領域を濃縮するライブラリーを構築出来るシステムの開発を予定している。

SNP is in a bad mood because of the rapid accumulation of symptoms, symptoms, It is not possible to have a full diagnosis of the disease and disease. It is not possible to determine whether it is possible to do so, and it is useful to use the domain settings on the centralized parsing system. Breast cancer, breast cancer, X chromosome inactivation, CpG inactivation, breast cancer, X chromosome inactivation, X chromosome inactivation, breast cancer, X chromosome inactivation, breast cancer, breast cancer In the first place, you know, you know, In the field of medical treatment, there is a low possibility of SNP disease and disease, and there is a possibility of SNP disease in the field of writing activity. the possibility of disease progression is high. The results of this study are as follows: in the study, in this study, in the study, in the study, in this study, in this study, in the field Methods in normal patients, peripheral blood samples were collected, DNA was extracted, and chemosensitivity was detected. 4-base cutting enzyme was used to cut off the enzyme in the first place outside the field of treatment. The principle of suppression PCR is used in this paper, and the method is used in the same way as the same arrangement in the end and the same arrangement in the end. The patients in the secondary health group were compared, and the patients with specific diseases were diagnosed in the field. The patients were not affected by the disease, and the patients in the secondary health group were not in the market.

项目成果

Fujio K.: "Molecular cloning of a novel type 1 cytokine receptor similar to the common gamma chain."Blood. 95. 2204-2210 (2000)

Fujio K.：“与常见伽马链相似的新型 1 型细胞因子受体的分子克隆。”血液。

Sasaki M.: "Accumulation of common T cell clonotype in the salivary glands of patients with human T lymphotropic virus type I-associated and idiopathic Sjogrens syndrome."J.Immunol.. 164. 2823-2831 (2000)

Sasaki M.：“人类 T 淋巴细胞病毒 I 型相关和特发性干燥综合征患者唾液腺中常见 T 细胞克隆型的积累。”J.Immunol.. 164. 2823-2831 (2000)

Misaki Y.: "Gane-transferred oligoclonal T cells predominantly persist in perrpheral blood from an adenosine deaminase-deficient patient during gene therapy."Molecular.Therapy. 3. 24-27 (2001)

Misaki Y.：“在基因治疗期间，Gane 转移的寡克隆 T 细胞主要存在于腺苷脱氨酶缺陷患者的外周血中。”分子治疗。

Nagase H.: "Expression of CXCR4 in eosinophils : Functional analyses and cytokine-mediated regulation."J.Immunol.. 164. 5935-5943 (2000)

Nagase H.：“CXCR4 在嗜酸性粒细胞中的表达：功能分析和细胞因子介导的调节。”J.Immunol.. 164. 5935-5943 (2000)

Fujio K.: "Functional reconstitution of class II MHC-restricted T cell immunity mediated by retroviral transfer of the αβ TCR complex"J. Immunol.. 165. 528-532 (2000)

Fujio K.：“通过 αβ TCR 复合物的逆转录病毒转移介导的 II 类 MHC 限制性 T 细胞免疫的功能重建”J.Immunol.. 165. 528-532 (2000)