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免疫応答におけるT細胞レセプター・クロノタイプ検出システムの確立と免疫病への応用

免疫应答中T细胞受体克隆型检测体系的建立及其在免疫性疾病中的应用

基本信息

批准号：
07257102
负责人：
山本一彦
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07257102/
关键词：
T細胞レセプター PCR SSCP T細胞慢性関節リウマチ

项目摘要

前年度まで、我々が確立したT細胞クロノタイプ検出法を用いて、生体内および試験管内での特異抗原刺激に対するリンパ球集団におけるT細胞クロノタイプの動き、自己免疫疾患、骨髄移植、腫瘍などの免疫病におけるT細胞クローンの集積の状態を検討した。本年度は、これらのT細胞の認識する抗原について検討することを目的とした。まずこれら抗原特異的T細胞クローンのT細胞レセプターのCDR3領域のアミノ酸配列に注目し、これを解析した。たとえば、慢性関節リウマチの滑膜病変に集積しているクローンのDNAバンドを抽出し、塩基配列を決定しそのアミノ酸配列を推定した。その結果、異なる患者で、その病変に集積しているT細胞が、非常に類似したCDR3領域のアミノ酸配列のT細胞レセプターを使用していることが判明し、類似の病原エピトープを認識している可能性が示された。さらに、これら病変局所に集積しているT細胞が認識する抗原を、直接同定する新しい方法を検討した。従来、生体内で集積しているT細胞の抗原特異性を決定する有効な方法はほとんどない。この点で、SSCP法でのDNAの泳動度は再現性良く、同一のゲルでの検討でクローンの同一性を簡単に知ることが可能であることを利用した。すなわち、病変に集積しているT細胞クローンと、同一患者の末梢血リンパ球を可能性がある抗原と試験管内で混合培養して出現するT細胞クローンを比較することで、前者の抗原特異性を決定する方法を確立した。この方法を用いることで、たとえば、C型肝炎の肝臓に集積しているT細胞が、HCV特異的であることを示すことができた。すなわち本法は新しいT細胞の抗原特異性を決定する手法となりうることが判明した。

In the previous year, we established the T-cell extraction method and used it to test the specific antigen in the test tube.おけるT cells クロノタイプのmovable き, autoimmune diseases, bone marrow transplantation, tumors などのimmune disease におけるT cells クローンの综合のstatus を検した. This year, we will focus on the understanding of T cells and the purpose of understanding antigens.まずこれらAntigen-specific T cell クローンのT cell レセプターのCDR3 field のアミノacid ligation にattentionし, これをanalysis した. Synovial disease of chronic joints NA バンドを extracted し, base arrangement を determined しそのアミノ acid arrangement を presumed した.その results, different なるpatients で, その disease 変に综合しているT cells が, very similar したCDR3 field のアミノ acid arrangementのT cell レセプターを use していることが to identify し, similar のpathogen エピトープを to know している possibility がshow された.さらに, これら The disease bureau に accumulates している T cells が recognition する antigen を, directly determines the する new しい method を検した. Therefore, the antigen specificity of T cells accumulated in the body determines the effective method.このDOTで、SSCP method でのDNA swimming degree は good reproducibility く、identical のゲルでの検说でクローンのidentityを简単に知ることがpossibleであることをutilizationした.すなわち, disease collection しているT cell クローンと, peripheral blood リンパglobule をpossibility があるantigen と test tube of the same patient Comparison of the appearance of T cells in mixed culture and the determination of antigen specificity and establishment of the method in the former. The method is to use いることで, たとえば, and hepatitis C hepatitis C accumulation methodているT cells, HCV-specific であることをshows すことができた. This method is new, the antigen specificity of T cells is determined, and the technique is used to determine the antigen specificity of T cells.