血液細胞系譜の分化決定と転写因子の役割

血细胞谱系分化的测定和转录因子的作用

• 批准号: 12215071
• 负责人: 小川 峰太郎
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215071/
• 关键词: 転写因子; 血液細胞; 胚性幹細胞; 血管内皮; 中胚葉; エンハンサー; 発生学; マウス

中胚葉から発生する胚型血液細胞系譜と、血管内皮から発生する成体型血液細胞系譜という血液細胞発生の2つの分化系路の枠組みの中で、TAL1、GATA2、c-Myb、AML1などの転写因子が担っている階層的な役割を理解することを目的とし、胚性幹細胞(ES細胞)から中胚葉細胞および血管内皮細胞を経て血液細胞に至る試験管内分化系を用いて、特定の転写因子の強制発現がもたらす影響を解析した。TAL1の発現誘導により、GATA1を発現する中胚葉細胞サブセットが特異的に増加することを見いだした。このサブセットは胚型血液細胞系譜の前駆細胞を含み、TAL1の強制発現は胚型血液前駆細胞の実数の増加をもたらした。しかし同時に、このサブセット中の血液前駆細胞の頻度自体は影響を受けないことも示された。これは、GATA1とTAL1がともに発現するだけでは中胚葉細胞を血液細胞系譜へ分化決定させるのに不十分であるということを示している。GATA1、GATA2、c-Mybに関しても同様の検討を試みたが、これらの転写因子の強制発現はES細胞の分化・増殖の抑制に働くことが明らかになった。従って、特定の細胞系譜に特異的に遺伝子発現を誘導するシステムを開発する必要性が生じた。今年度は、血管内皮細胞に特異的に発現する遺伝子のプロモーター・エンハンサーの性格付けを行った。FLK1およびVE-カドヘリン遺伝子の転写調節領域は、いずれもES細胞の試験管内分化系で血管内皮細胞特異的にマーカー遺伝子の発現を誘導し、この領域を含むコンストラクトは有効な遺伝子ベクターになることが示唆された。今後、このベクターを用いて血管内皮細胞が血液細胞系譜に分化するプロセスを人為的に操作したいと考えている。

Mesoderm か ら 発 raw す る pedigree と type embryo blood cells, endothelial か ら 発 raw す る into body blood cells pedigree と い う blood cells 発 2 つ の differentiation is の way の 枠 group み の で, TAL1, GATA2, c - Myb, AML1 な ど の planning write factor が bear っ て い る class cut を な service understand す る こ と を purpose と し, embryonic stem Cells (ES cells) か ら mesoderm cells お よ び endothelial cells を 経 て に to る blood cells differentiation system test tube を with い て, specific の planning write factor の forced 発 now が も た ら す effect を resolution し た. TAL1 の 発 now induced に よ り, GATA1 を 発 now す る mesoderm cells サ ブ セ ッ ト が specific に raised plus す る こ と を see い だ し た. こ の サ ブ セ ッ ト は type embryo blood cells before pedigree の 駆 を み, TAL1 の forced 発 now は type embryo の 駆 before blood cells be Numbers is の raised を も た ら し た. The frequency of <s:1> pre-駆 cells <s:1> in <s:1> blood is influenced by the autologous <s:1> in に and <s:1> サブセット サブセット サブセット を を is indicated by けな された と と と と された された された された された された された された された された された された された された を を を された と と された された された された された された. こ れ は, GATA1 と TAL1 が と も に 発 now す る だ け で は mesoderm cells を blood cells pedigree へ decided さ せ る の に not quite で あ る と い う こ と を shown し て い る. GATA1, GATA2, c - Myb に masato し て も with others の 検 please try を み た が, こ れ ら の planning write factor の forced 発 now は の ES cell differentiation, raised colonization の inhibit に 働 く こ と が Ming ら か に な っ た. 従 っ て, specific の cells pedigree に に of specific 伝 son 発 now を induced す る シ ス テ ム を open 発 す る necessity が raw じ た. Our に は, vascular endothelial cell specific に 発 now す る heritage 伝 son の プ ロ モ ー タ ー · エ ン ハ ン サ ー の character pay け を line っ た. FLK1 お よ び VE - カ ド ヘ リ ン posthumous son 伝 の planning, regulating field は, い ず れ も の ES cell differentiation system test tube で vascular endothelial cell specific に マ ー カ ー posthumous son 伝 の 発 を induced し, こ を の field containing む コ ン ス ト ラ ク ト は have sharper な posthumous son 伝 ベ ク タ ー に な る こ と が in stopping さ れ た. In the future, こ の ベ ク タ ー を with い て genealogy に が blood vascular endothelial cells differentiation す る プ ロ セ ス を man-made に operation し た い と exam え て い る.

项目成果

山下 潤: "Embryonic stem cell-derived Flk1 positive cells serve as vascular progenitors"Nature. 408. 92-96 (2000)

Jun Yamashita：“胚胎干细胞衍生的 Flk1 阳性细胞充当血管祖细胞”Nature 408. 92-96 (2000)。

横溝 智雅: "Requirement of Runx1/AML1/PEBP2αB for the generation of hematopoietic cells from endothelial cells"Genes to Cells. 6. 13-23 (2001)

Tomomasa Yokomizo：“从内皮细胞生成造血细胞的 Runx1/AML1/PEBP2αB 的要求”《基因到细胞》（Genes to Cell）。

小川峰太郎: "Identification of CD19^-B220^+ c-Kit^+Flt3/Flk-2^+ cells as early B lymphoid precursors before preB-I cells in juvenile mouse bone marrow."Int.Immunol.. 12. 313-324 (2000)

Minetaro Okawa：“在幼年小鼠骨髓中，CD19^-B220^+ c-Kit^+Flt3/Flk-2^+ 细胞在 preB-I 细胞之前被鉴定为早期 B 淋巴前体细胞。”Int.Immunol.. 12. 313 -324 (2000)

西川伸一: "All B cell are progeny of endothelial cells : a new perspective."Immunol.Rev.. 175. 112-119 (2000)

Shinichi Nishikawa：“所有 B 细胞都是内皮细胞的后代：一个新的视角。”Immunol.Rev.. 175. 112-119 (2000)

久保肇: "Involvement of vascular endothelial growth factor receptor-3 in maintenance of integrity of endothelial cell lining during tumor angiogenesis."Blood. 96. 546-553 (2000)

Hajime Kubo：“血管内皮生长因子受体 3 参与维持肿瘤血管生成过程中内皮细胞衬里的完整性。”Blood。 96. 546-553 (2000)