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リンパ球幹細胞の分化決定における転写調節因子の役割

转录调节因子在决定淋巴干细胞分化中的作用

基本信息

批准号：
10770139
负责人：
小川峰太郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度までに、ES細胞の試験管内分化系を用いて、中胚葉および血管内皮細胞から造血細胞系譜へ至る発生過程を解析した。その結果、転写調節因子GATA1を発現する側部中胚葉細胞およびα4インテグリンを発現する血管内皮細胞を、それぞれ胚型赤血球および成体型血液細胞系譜の前駆細胞として同定した。本年度は、転写調節による血管細胞系譜の分化決定機構の解明をめざして、転写調節因子の発現誘導による細胞運命決定の実験的制御を試みた。まず、側部中胚葉マーカーであるFLK1および血管内皮細胞マーカーであるVE-カドヘリンの遺伝子プロモーターを用いて、ES細胞の試験管内分化系における側部中胚葉および血管内皮細胞特異的な外来遺伝子の発現誘導を試みた。その結果、これらのプロモーターではそれぞれの細胞系譜に特異的で十分な発現誘導を得ることが出来なかった。次に、アクチンプロモーターを利用した細胞系譜非特異的な強制発現系を用いて、Tall、GATA1、GATA2、の血管細胞発生に及ぼす影響を検討した。GATA1およびGATA2の強制発現においてはES細胞から中胚葉への分化が阻害され、それ以上の解析が不可能であった。テトラサイクリン応答性の誘導的発現などが必要であると考えられ実験系の構築している。Tallを強制発現するES細胞では、側部中胚葉および血管内皮細胞からの血液細胞分化の顕著な亢進が認められた。この場合においても側部中胚葉と血管内皮から分化する血液細胞系譜はそれぞれ胚型赤血球と成体型血液細胞系譜に限られており、Tallは血液細胞系譜への分化決定に関与するが血液細胞系譜内での運命選択には関与しないことが示唆された。さらに、GATA1プロモーター制御下でのGFP発現系と組み合わせることにより、側部中胚葉におけるTallの強制発現は中胚葉細胞から血液細胞への分化のごく初期段階に働くことが見いだされ、上記の結果を強く支持するものと考えられる。

In the past year, the differentiation of ES cells in vitro was analyzed, and the development process of mesoderm and vascular endothelial cells was analyzed. As a result, the expression of GATA1 in lateral mesodermal cells and α4 cells was determined in vascular endothelial cells and in embryonic erythrocytes and progenitor cells in adult blood cell lineages. This year, we tried to understand the mechanism of differentiation of vascular lineage and control the mechanism of cell fate determination in the expression of regulatory factors. Flk1 and vascular endothelial cells were used to induce the expression of foreign genes specific to ES cells in vitro differentiation lines. The result is that the cell lineage is very specific, and the cell lineage is very specific. To investigate the effects of non-specific stress response systems on vascular cell development using cell lineages, Tall, GATA1, GATA2, etc. GATA1 and GATA2 stress expression was inhibited by ES cell differentiation, and the above analysis was impossible. It is necessary to study the structure of the system. ES cells under Tall stress are hyperdifferentiated from lateral mesoderm and vascular endothelial cells. In this case, the blood cell pedigree of the lateral mesoderm and vascular endothelium differentiation is limited to embryonic erythrocytes and adult blood cell pedigree, and the fate selection of the blood cell pedigree is related to the differentiation of the blood cell pedigree. GATA1-induced GFP expression system under control is composed of two parts, one part, lateral mesoderm, and the other part, mesoderm cells.