リンパ球幹細胞の分化決定における転写調節因子の役割

转录调节因子在决定淋巴干细胞分化中的作用

• 批准号: 10770139
• 负责人: 小川 峰太郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770139/
• 关键词: 胚性幹細胞; 血液細胞; 血管内皮細胞; 中胚葉; 転写因子; 試験管内分化; GATA1; Tal1; 個体発生; 転写調節因子; 細胞分化; 細胞接着分子

前年度までに、ES細胞の試験管内分化系を用いて、中胚葉および血管内皮細胞から造血細胞系譜へ至る発生過程を解析した。その結果、転写調節因子GATA1を発現する側部中胚葉細胞およびα4インテグリンを発現する血管内皮細胞を、それぞれ胚型赤血球および成体型血液細胞系譜の前駆細胞として同定した。本年度は、転写調節による血管細胞系譜の分化決定機構の解明をめざして、転写調節因子の発現誘導による細胞運命決定の実験的制御を試みた。まず、側部中胚葉マーカーであるFLK1および血管内皮細胞マーカーであるVE-カドヘリンの遺伝子プロモーターを用いて、ES細胞の試験管内分化系における側部中胚葉および血管内皮細胞特異的な外来遺伝子の発現誘導を試みた。その結果、これらのプロモーターではそれぞれの細胞系譜に特異的で十分な発現誘導を得ることが出来なかった。次に、アクチンプロモーターを利用した細胞系譜非特異的な強制発現系を用いて、Tall、GATA1、GATA2、の血管細胞発生に及ぼす影響を検討した。GATA1およびGATA2の強制発現においてはES細胞から中胚葉への分化が阻害され、それ以上の解析が不可能であった。テトラサイクリン応答性の誘導的発現などが必要であると考えられ実験系の構築している。Tallを強制発現するES細胞では、側部中胚葉および血管内皮細胞からの血液細胞分化の顕著な亢進が認められた。この場合においても側部中胚葉と血管内皮から分化する血液細胞系譜はそれぞれ胚型赤血球と成体型血液細胞系譜に限られており、Tallは血液細胞系譜への分化決定に関与するが血液細胞系譜内での運命選択には関与しないことが示唆された。さらに、GATA1プロモーター制御下でのGFP発現系と組み合わせることにより、側部中胚葉におけるTallの強制発現は中胚葉細胞から血液細胞への分化のごく初期段階に働くことが見いだされ、上記の結果を強く支持するものと考えられる。

Before the annual ま で の に, ES cells differentiation system test tube を with い て, mesoderm お よ び endothelial cells か ら pedigree へ hematopoietic cells to る 発 birth process analytical し を た. そ の results, planning to write regulating factor GATA1 を 発 now す る lateral mesoderm cells お よ び alpha 4 イ ン テ グ リ ン を 発 now す る を vascular endothelial cells, そ れ ぞ れ embryo type red blood corpuscle お よ び into body blood cells before pedigree の 駆 と し て with fixed し た. This year, the による and 転 institutions that regulate the <s:1> differentiation of vascular cell genealogies have explained that the をめざ て and 転 institutions have conducted を experiments on the occurrence of regulatory factors that induce による cell fate determination みた. ま ず, lateral mesoderm マ ー カ ー で あ る FLK1 お よ び endothelial cells マ ー カ ー で あ る VE - カ ド ヘ リ ン の posthumous son 伝 プ ロ モ ー タ ー を with い の て, ES cells differentiation system test tube に お け る lateral mesoderm お よ び な outside of vascular endothelial cell specific 伝 son の 発 induced を now try み た. そ の results, こ れ ら の プ ロ モ ー タ ー で は そ れ ぞ れ の cells pedigree に specific で very な 発 induced を must now る こ と が out な か っ た. に, ア ク チ ン プ ロ モ ー タ ー を using し た cell pedigree nonspecific な 発 is now compulsory を with い て, Tall, GATA1, GATA2, 発 raw に の vascular cells and ぼ す influence を beg し 検 た. GATA1 お よ び GATA2 の forced 発 now に お い て は ES cells か ら mesoderm へ の differentiation が resistance against さ れ, そ れ above analytical が の impossible で あ っ た. テ ト ラ サ イ ク リ ン 応 発 induced by a sex の is な ど が necessary で あ る と exam え ら れ be 験 is の build し て い る. Tall を forced 発 now す る ES cells で は, lateral mesoderm お よ び endothelial cells か ら の blood cell differentiation の 顕 the な hyperthyroidism が recognize め ら れ た. こ の occasions に お い て も lateral mesoderm と endothelial か ら differentiation す る blood cells pedigree は そ れ ぞ れ embryo type red blood corpuscle と into body blood cells pedigree に limit ら れ て お り, Tall は blood cells pedigree へ の differentiation decided に masato and す る が blood cells within the family で の luck sentaku に は masato and し な い こ と が in stopping さ れ た. さ ら に, GATA1 プ ロ モ ー タ ー under the system of imperial で の GFP 発 now is と group み close わ せ る こ と に よ り, lateral mesoderm に お け る Tall の forced 発 now は mesoderm cells か ら blood cells へ の differentiation の ご く early Duan Jie に 働 く こ と が see い だ さ れ, written の results strong を く support す る も の と exam え ら れ る.

项目成果

小川峰太郎: "造血システムの発生とAML1"蛋白質・核酸・酵素(邦文総説). 45・1. 18-25 (2000)

小川峰太郎：“造血系统的发育和 AML1”蛋白质、核酸和酶（日本评论）18-25（2000 年）。

西川伸一: "All B cells are progeny of endothelial cells :a new perspective"Immunol.Rev.. (印刷中).

Shinichi Nishikawa：“所有 B 细胞都是内皮细胞的后代：一个新的视角”Immunol.Rev..（出版中）。

小川峰太郎: "Expression of a4-integrin defines the earliest presursor of hematopoietic cell lineage diverged from endothelial cells." Blood.93・4. 1168-1177 (1999)

Minetaro Okawa：“a4-整合素的表达定义了从血液中分化出来的造血细胞谱系的最早前体。”93・4（1999）。

平島正則: "血管/血液の発生分化とES(Embryonic Stem)細胞" 診断と治療(邦文総説). 86・12. 1995-2000 (1998)

Masanori Hirashima：“血管/血液发育和分化以及ES（胚胎干细胞）”诊断和治疗（日本评论）1995-2000（1998）。

小川峰太郎: "Expression of α4-integrin defines the earliest precursor of hematopoietic cell lineage diverged from endothelial cells"Blood. 93・4. 1168-1177 (1999)

小川峰太郎：“α4-整合素的表达定义了从内皮细胞分化出来的造血细胞谱系的最早前体”血液 93・4（1999）。