モデルがん細胞株を用いたチロシンキナーゼSrcの標的因子の同定

使用模型癌细胞系鉴定酪氨酸激酶 Src 的靶因子

• 批准号: 12215101
• 负责人: 佐藤 賢一
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215101/
• 关键词: 細胞がん化; がん遺伝子; 蛋白質チロシンリン酸化; シグナル伝達; A431細胞; Src; Stat; ホスホリパーゼC-gamma

本研究で私たちは「細胞膜受容体刺激に伴うチロシンキナーゼSrcの活性化にアダプター分子Shcが関与する」との仮説を立て、2つのモデル実験系〜がん細胞A431(上皮成長因子による受容体刺激)及びツメガエル卵(受精による受容体刺激)〜を用いて以下の3項目を明らかにした。1.ShcとSrcの相互作用とSrc活性化の相関。2.Shc-Src相互作用を伴う細胞応答。3.変異型ShcによるSrc活性化/細胞応答の阻止。さらに私たちは活性化Srcの標的因子として、がん細胞A431では転写因子Statを、ツメガエル卵では脂質分解酵素ホスホリパーゼC-gammaを同定した。前者は細胞増殖停止に、後者はカルシウム動員/卵活性化に働く分子である。以上の結果は、発がん/がん形質維持に働く2つの原がん遺伝子産物Src/Shcの相互作用が、細胞死や発生開始という細胞がん化の対局にある現象にも関わることを示している。インビボでのShcとSrcの相互作用の証明やとSrc活性化との関連づけが年度はじめに行えたことで、主要な課題であった標的因子同定の作業に多くの時間を費やすことが出来た。最終的には特定のShc分子種のみがSrc活性化やその標的分子のリン酸化に効果を持つことを示すことができそうで、同時並行で行っているShc-Src相互作用/Src活性化の試験管内再構成実験の結果と共に、2001年中に論文発表を行う予定である。受精/発生開始を待つ卵という、がん細胞と対局にある実験系でSrc型チロシンキナーゼの生理機能を解析していくことは、Srcがそのおかれた細胞環境に応じて、多面的な機能を発揮しうることを示していくことにつながる。またある意味で、発生開始とがん化や細胞死といった一見大いに相反するように見える生命現象が、実は極限られた細胞内シグナル分子の微妙な挙動の違いに由来するものであることを見ていくことになるかも知れない。

This study was carried out on the basis of the cell membrane receptor stimulation and activation of Src Sexualized にアダプターmolecule Shcが关与する」との仮说を立て、2つのモデルThe 実験 system ~ がん cell A431 (epithelial growth factor receptor stimulation) and びツメガエル egg (fertilization receptor stimulation) ~ を いて following の3 projects を明らかにした. 1. The interaction between Shc and Src is related to the activation of Src. 2.Shc-Src interaction is associated with cell response. 3. Prevention of abnormal Shc and Src activation/cell response.さらにprivately activated Srcのtarget factor として, がん cell A431 では転write factor St atを, ツメガエル egg では lipolytic enzyme ホスホリパーゼC-gamma を同定した. The former involves the cessation of cell proliferation, and the latter involves the mobilization/activation of egg molecules and the activation of molecules. The result of the above is that the shape and quality of the shape and quality are maintained and the product Src/Shc is maintained. Action, cell death, regeneration, and cell transformation. Proof of interaction between Shc and Src and activation of Src The factors that determine the line of work and the main topic are the same as the homework, time, and cost. The final にはspecific のShc molecule species のみがSrc activation やそのtarget molecule のリン acidification effect をhold つことをshow すことができそうで, simultaneously and in parallel でThe result of the in-tube reconstruction of Shc-Src interaction/Src activation was determined in the 2001 mid-year paper. Fertilization/birth begins, waiting for the egg, and analyzing the physiological functions of the cells and cells.くことは、Srcがそのおかれたcell environmentに応じて、many faces The function of the function is to show the function of the function.またあるmeansで, the beginning of the disease, the transformation of the cell, the death of the cell, the big thing at first sight, the opposite, the phenomenon of life, the limit of life The origin of the subtle movement of the シグナル molecules in the cellsるものであることを见ていくことになるかも知れない.

项目成果

Sato,K.-I.: "Tyrosine kinase-dependent activation of phospholipase Cγis required for calcium transient in Xenopus egg fertilization."Dev.Biol.. 224. 453-469 (2000)

Sato, K.-I.：“爪蟾卵受精中的钙瞬变需要磷脂酶 Cγ 的酪氨酸激酶依赖性激活。”Dev.Biol.. 224. 453-469 (2000)

Sato,K.-I.: "Adaptor protein Shc undergoes translocation and mediates up-regulation of the tyrosine kinase c-Src in EGF-stimulated A431 cells."Genes Cells. 5. 749-764 (2000)

Sato,K.-I.：“在 EGF 刺激的 A431 细胞中，接头蛋白 Shc 发生易位并介导酪氨酸激酶 c-Src 的上调。”Genes Cells。

Sato,K.-I.: "Hydrogen peroxide induces Src family tyrosine kinase-dependent activation of Xenopus eggs."Dev.Growth Differ.. 43. 55-72 (2001)

Sato,K.-I.：“过氧化氢诱导爪蟾卵的 Src 家族酪氨酸激酶依赖性激活。”Dev.Growth Differ.. 43. 55-72 (2001)

Sato,K.-I.: "Regulation of Xenopus oocyte maturation, egg fertilization and embryogenesis by protein-tyrosine phosphorylation."Curr.Top.Biochem.Res.. 2. 91-102 (2000)

Sato,K.-I.：“通过蛋白质酪氨酸磷酸化调节非洲爪蟾卵母细胞成熟、卵子受精和胚胎发生。”Curr.Top.Biochem.Res.. 2. 91-102 (2000)

Sato,K.-I.: "Fertilization signalling and protein-tyrosine kinases."Comp.Biochem.Physiol.B Biochem.Mol.Biol.. 126. 129-148 (2000)

Sato,K.-I.：“受精信号传导和蛋白酪氨酸激酶。”Comp.Biochem.Physiol.B Biochem.Mol.Biol.. 126. 129-148 (2000)