細胞膜ラフトにおけるチロシンリン酸化と細胞がん化の解析

细胞膜筏中酪氨酸磷酸化与细胞癌变的分析

• 批准号: 16022243
• 负责人: 佐藤 賢一
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022243/
• 关键词: ラフト; チロシンリン酸化; ユーロプラキンIII; Src; シグナル伝達; 細胞膜容体; プロテアーゼ; 細胞運動性

アフリカツメガエル(以下、ゼノパス)の受精卵において、細胞膜ラフトに局在する新規のチロシンリン酸化タンパク質uroplakin III(以下、UPIII)を同定した。UPIIIはアミノ酸残基数265の単一膜貫通タンパク質で、アミノ末端側から細胞外ドメイン(191アミノ酸)、膜貫通領域(28アミノ酸)、そして細胞内ドメイン(46アミノ酸)からなる。チロシンリン酸化は細胞内ドメインのTyr-249に起こることがMS/MS質量分析から明らかとなった。UPIIIは哺乳動物では尿路上皮組織に高発現するUPファミリータンパク質の1つとして同定されており、他のUP分子種と共に尿路上皮組織の膜透過性の維持に働くことが示されている。また、UP分子種のうち、4回膜貫通型タンパク質であるUPIaとUPIbが尿路上皮に感染性を持つ病原大腸菌の宿主受容体であることが明らかとされており、関連する疾患の発症、発ガンにおける機能が注目されている。ゼノパス卵UPIIIの解析から、この分子が卵表面に存在し受精における精子との相互作用に関与することが明らかとなった(JBC,2005)。重要なことに、精子と卵UPIIIの相互作用には、精子由来のプロテアーゼによるUPIII細胞外ドメインの切断という事象が関わっていることも示された。この切断反応を阻害する合成ペプチドが、受精そのものを阻止することも明らかとなった。今回UPIIIの研究で示された膜タンパク質細胞外ドメインのプロテアーゼによる切断は、がん細胞の悪性化に伴う現象として知られており、最近ではCD44分子とその切断反応が関与するがん細胞の運動性、浸潤・転移能との関連で優れた報告がなされている。現在、ヒトがん細胞ラフト領域(MCF7、5637、ACHN等)に局在するUPIIIの切断と細胞機能の関係についてデータを蓄積している。

ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル (hereinafter, ゼ ノ パ ス) の fertilized egg に お い て, cell membrane ラ フ ト に bureau in す る new rules の チ ロ シ ン リ ン acidification タ ン パ ク qualitative uroplakin III (" を, UPIII) with fixed し た. UPIII は ア ミ ノ acid residue base 265 の 単 a transmembrane タ ン パ ク で, ア ミ ノ end side か ら extracellular ド メ イ ン (191 ア ミ ノ acid), transmembrane domain (28 ア ミ ノ acid), そ し て in cells ド メ イ ン (46 ア ミ ノ acid) か ら な る. チ ロ シ ン リ ン acidification は intracellular ド メ イ ン の Tyr - 249 に こ る こ と が MS/MS quality analysis か ら Ming ら か と な っ た. UPIII は mammals で は urinary epithelial tissue に high 発 now す る UP フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク の 1 つ と し て with fixed さ れ て お り, he の UP molecules of と に urinary epithelial tissue の membrane permeability の maintain に 働 く こ と が shown さ れ て い る. ま た, UP molecular の う ち type, 4 back to transmembrane タ ン パ ク qualitative で あ る UPIa と UPIb が urothelial に infectious を hold つ pathogenic coliform の host by let body で あ る こ と が Ming ら か と さ れ て お り, masato す る disorders の 発, 発 ガ ン に お け る function が attention さ れ て い る. ゼ ノ パ ス eggs UPIII の parsing か ら, こ の molecular が に on the egg surface し fertilization に お け る sperm と の interaction に masato and す る こ と が Ming ら か と な っ た (JBC, 2005). Important な こ と に, sperm と eggs UPIII の interaction に は, sperm origin の プ ロ テ ア ー ゼ に よ る UPIII extracellular ド メ イ ン の cut と い う things like が masato わ っ て い る こ と も shown さ れ た. こ の cut off against 応 を resistance against す る synthetic ペ プ チ ド が, fertilization そ の も の を stop す る こ と も Ming ら か と な っ た. Today back UPIII で の research in さ れ た membrane タ ン パ ク qualitative extracellular ド メ イ ン の プ ロ テ ア ー ゼ に よ る cut は, が ん cells の 悪 sexualising に with う phenomenon と し て know ら れ て お り, recently で は CD44 molecule と そ の cut the 応 が masato and す る が の ん cell motility, invasion, planning to move to と の masato even で optimal れ た report が な さ れ て い る. Now, ヒ ト が ん cells ラ フ ト areas (MCF7, 5637, ACHN) に bureau in す る UPIII の cut と cell function の masato is に つ い て デ ー タ を accumulation し て い る.

项目成果

Molecular identification and characterization of Xenopus egg uroplakin III, a raft-associated protein that is tyrosine-phosphorylated upon egg fertilization

非洲爪蟾卵尿斑蛋白 III 的分子鉴定和表征，这是一种卵子受精时酪氨酸磷酸化的筏相关蛋白

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biol.Chem. (In press)
• 作者: Miyazaki;T.;Takahashi K;Fukuhara A;Hamazaki T;Tomoda K;Murakami M;Sato K.et al.;Tokmakov A.A.et al.;Sakakibara K.et al.;Sakakibara K.et al.
• 通讯作者: Sakakibara K.et al.

Molecular dissection of egg fertilization signaling with the aid of tyrosine kinase-specific inhibitor and activator strategies

• DOI: 10.1016/j.bbapap.2003.11.017
• 发表时间: 2004-03-11
• 期刊: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS
• 影响因子: 3.2
• 作者: Sato, K;Iwasaki, T;Fukami, Y
• 通讯作者: Fukami, Y

Generation of an antibody specific to Xenopus fertilized eggs by subtractive immunization

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2005.00838.x
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Sakakibara, K;Sato, K;Fukami, Y
• 通讯作者: Fukami, Y

Fertilizome project : Study on the biological bridge between gametogenesis and embryogenesis.

Fertilizome项目：研究配子发生和胚胎发生之间的生物桥。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Current Proteomics 1
• 作者: Sato.K.;Sette;C.;Kurokawa;M.;Paronetto;M.P.;Iwasaki;T.;Fissore;R.A.;Fukami;Y.
• 通讯作者: Y.

Evidence that activation of a Src family kinase is not required for fertilization- associated [Ca^<2+>]_i oscillations in mouse eggs

有证据表明，小鼠卵子中受精相关的 [Ca^<2 >]_i 振荡不需要激活 Src 家族激酶

• 发表时间: 2004
• 期刊: Reproduction 127
• 作者: Miyazaki;T.;Takahashi K;Fukuhara A;Hamazaki T;Tomoda K;Murakami M;Sato K.et al.;Tokmakov A.A.et al.;Sakakibara K.et al.;Sakakibara K.et al.;Sato K.et al.;Kurokawa M.et al.
• 通讯作者: Kurokawa M.et al.