权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

生物機能を応用したハイブリッド・ベクターの実用化と次世代ベクターの開発

应用生物学功能的杂合载体的实际应用和下一代载体的开发

基本信息

批准号：
12217079
负责人：
中西真人
金额：
$ 3.33万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝子治療の実用化のためには、既存のシステム(組換えウイルスや合成高分子)の限界を越えた新しい遺伝子導入・発現系の開発を進めなければならない。本年度は、膜融合リポソームなど我々が提唱してきたハイブリッドベクターの大量調製法を、新しいリポソーム作製法や特殊なゲル濾過法を用いて確立し、その物理的・生物学的性状(均一な直径250nmを持ち凍結できる等)を明らかにすると共に、その投与条件について検討し、灌流圧を調整すれば生体に障害をもたらさずに投与できることを見いだした。また、強い細胞障害作用を持った変異ナトリウムチャンネルcDNAを癌マーカーCEAのプロモーターにつないで癌特異性を持たせたキメラ遺伝子を作成し、これを封入したハイブリッドベクターを使って、ヌードマウスにヒト胃癌を播種して作成した胃癌腹膜転移モデルの遺伝子治療への応用に成功した。この成果は、正常細胞と癌細胞が組織内で複雑に混在している手術不能例でも、癌細胞特異的に発現するように工夫した致死性遺伝子を膜融合リポソームに封入して無差別に遺伝子導入することによって、癌細胞だけをすべて殺傷するできることを示している。さらに、細胞膜と核膜を共に通過する活性が報告されているProtein Transduction Dom ain(PTD)と呼ばれるペプチドを呈示したラムダファージを作成し、このファージ粒子を培養液中に加えるだけで動物細胞に遺伝子を導入できることを見いだした。その活性は陽荷電リポソームよりも高く、血清で阻害されず、endocytosisに依存していなかった。またこの系を使ってin vivoでマウスの肝臓に直接遺伝子導入することも明らかにした。

The application of gene therapy is in the process of developing new gene introduction and discovery systems. This year, membrane fusion solutions were developed using a number of modulation methods, new solutions, and special filtration methods to establish physical and biological properties.(uniform diameter 250nm), the total amount of water, the total amount of water, the total amount of water) In addition, the gene expression system has been successfully used for the treatment of gastric cancer peritoneal metastasis. The gene expression system has been successfully used for the treatment of gastric cancer. The results showed that normal cells and cancer cells were mixed in tissues, and cancer cell-specific expression was not possible. Lethal genes were isolated by membrane fusion, and non-differential gene introduction was possible. Protein Transduction Dom (PTD) and Protein Transduction Dom (PTD) were reported to be present in the culture medium. The activity of the enzyme is dependent on the activity of the enzyme, the activity of the enzyme and the activity of the enzyme. This is the first time that direct gene introduction into the liver of mice in vivo has been achieved.