歯根膜組織の老化機構に関する研究

牙周膜组织衰老机制的研究

基本信息

批准号：
12877301
负责人：
沢禎彦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877301/
关键词：
歯根膜テロメアテロメラーゼ TRAP 老化 p53 オステオカルシン

项目摘要

本年度は,ヒト培養歯根膜細胞のテロメア長分析を行った.その結果,1)1回の分裂で切れるテロメア長は150bpで,50-100bp/回という従来の報告とほぼ一致した.2)平均的テロメア長は表皮線維芽細胞の平均的テロメア長である16kbpより短かった.3)ドナー年齢に相関したテロメア短小化は観察されなかった.4)同一のドナー由来の歯根膜組織から,平均3kbpの短いテロメア長を有する株と,平均13kbpの長いテロメア長を有する株が,またその両者をカバーする範囲のテロメア長を示す株が確立された.本結果から,歯根膜線維芽細胞は年齢に相関せず一般的に短いテロメアを有することが示唆され,表皮など他の一般的結合組織繊維芽細胞よりも細胞寿命の短い可能性が考えちれた.一方,歯根膜細胞株のあるものは長いテロメアを示したことから,歯根膜におけるテロメラーゼ活性発現型歯根膜幹細胞の存在を考えた.テロメア長を検索した細胞株について,そのテロメラーゼ活性をTRAPアッセイによって測定し,また免疫染色によってテロメラーゼ蛋白発現を検索した.その結果,1)TRPPアッセイでは,典型的なテロメラーゼ活性を示す結果は得られなかったが,細胞株のテロメア長とは関係なく,弱いテロメラーゼ活性の存在を示唆する増幅されたTRAP産物が観察された.2)抗テロメラーゼ抗体陽性の細胞が観察された.以上について,申請者は現在投稿準備中であり,今後,歯根膜幹細胞の探究と分離を試み,培養歯根膜作製への応用を目標とする基盤研究を申請する.

今年，我们对人培养的牙周韧带细胞进行了端粒长度分析。结果表明，1）在一个有丝分裂中切断的端粒长度为150 bp，几乎与先前每次一次50-100 bp的报道一致。 2）平均端粒长度比表皮成纤维细胞的平均端粒长度短。 3）未观察到与供体年龄相关的端粒缩短。 4）原始牙周韧带组织与端粒长度短的菌株和一个长度长的端粒长度为13 kbp的菌株，并且长长的端粒长度为13 kbp，并且端长长的菌株，两者的长度长。该结果表明，牙周蛋白成纤维细胞与年龄不相关，并且通常具有短端粒，并且人们认为细胞寿命可能比其他常见的结缔组织成纤维细胞（如表皮）短。另一方面，某些牙周韧带细胞系显示长端粒，因此我们考虑了表达牙周韧带中端粒酶活性的牙周韧带干细胞的存在。对于搜索端粒长度的细胞系，通过陷阱测定法测量端粒酶活性，并通过免疫染色搜索端粒酶蛋白表达。结果，1）TRPP测定未显示典型的端粒酶活性，但是观察到具有阳性抗细胞素酶抗体的细胞的细胞，表明观察到弱端粒酶活性的存在，表明存在弱端粒酶活性。关于这些原因，申请人目前正准备提交，将来我们将尝试调查和分开牙周韧带干细胞，并申请旨在应用培养的牙周韧带生产的基础研究。