有機アニオントランスポーター遺伝子群の構造機能相関解析

有机阴离子转运蛋白基因的结构-功能关系分析

基本信息

批准号：
12877380
负责人：
阿部高明
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はラット網膜より甲状腺ホルモンを輸送する2つの有機アニオントランスポーターoatp2およびoatp3を単離した。どちらも中枢神経系に甲状腺ホルモンを輸ぶ有機アニオントランスポーターであり血液脳関門、血液・髄液関門を構成制御する重要な分子であると考えられた。またoatp2の抗体を作製し肝臓の血管側に発現していることを明らかにした。また申請者はヒト肝臓のみ特異的に発現している新規有機アニオントランスポーターHuman liver specific transporter(LST)-1の単離に成功した。LST-1は甲状腺ホルモン、エイコサノイド、抱合型ステロイドを取り込んだ。免疫組織染色からLST-1は血管側の肝細胞膜に存在することりから血中からの内因・外因性物質を肝細胞に輸送する重要なトランスポーターであると結論づけた。さらにラットのホモログのrlst-1の肝臓での発現が胆汁うっ滞モデルでダウンレギュレーションを受けていることを明らかにした。我々は甲状腺ホルモンが単に拡散でなくトランスポーターによって脳、腎臓内、細胞内に取り込まれるという生理学的知見を複数のcDNAの発見により世界で初めて証明した。甲状腺ホルモンは中枢神経系の発達やエネルギー代謝を左右する重要なホルモンであり、中枢神経系においては甲状腺ホルモン取り込みの異常が知能発達傷害の原因になっている可能性があり、また細胞膜における甲状腺ホルモンの輸送異常が甲状腺ホルモン不応症(Refetoff症候群)の原因の一つとされており、本研究はこれら疾患の早期発見、治療につながる社会的意義が大きいと考えられ申請に至った。我々は甲状腺ホルモン不応症の発見者であるシカゴ大学のRefetoff教授と患者の遺伝子の検討を行ったところ膜輸送異常と考えられる症例を6家系発見した。今後、甲状腺の膜輸送異常の解明のため我々の単離した甲状腺ホルモントランスポーターの遺伝子異常を検索し、甲状腺ホルモン不応症の新たな病態解明を行う予定である。さらに発現細胞系を作り脳・脊髄関門のモデル系としてそれぞれの薬物の透過性、駆動力および相互作用を検討することは脳・脊髄関門の輸送機構を理解する上で意義があり、中枢への移行を目的とした薬物開発のスクリーニングに役立つと考えられた。

我们分离了两个有机阴离子转运蛋白OATP2和OATP3，它们从大鼠视网膜中运输甲状腺激素。两者都是有机阴离子转运蛋白，可将甲状腺激素运输到中枢神经系统，被认为是控制血脑屏障，血液和脑脊液屏障的重要分子。此外，产生了OATP2的抗体，并发现它是在肝脏的血管侧表达的。申请人还成功地分离了一种新型有机阴离子转运蛋白（LST）-1，该转运蛋白（LST）仅在人肝脏中特别表达。 LST-1摄入甲状腺激素，二十烷和偶联类固醇。免疫组织学得出结论，LST-1是一种重要的转运蛋白，将内源性和外源性物质从血液传递到肝细胞，因为它存在于血管侧的肝细胞膜中。此外，揭示了大鼠同源物中RST-1的肝表达在胆汁淤积模型中被下调。我们证明了世界上第一个生理发现，甲状腺激素是通过转运蛋白在大脑，肾脏和细胞中吸收的，而不是简单地通过转运蛋白扩散的。甲状腺激素是影响中枢神经系统和能量代谢发展的重要激素，在中枢神经系统中，甲状腺激素摄取的摄取的异常可能是智力发育损伤的原因，并且在细胞膜中甲状腺激素异常转运被认为是甲状腺酸性促芽孢杆菌的原因（参考）的原因（这项研究被认为在对这些疾病的早期发现和治疗方面具有很大的社会意义，我们达到了该应用。我们研究了芝加哥大学的Refetoff教授的患者的基因，他们发现了甲状腺激素难治性，并发现了六个被认为具有异常膜运输的患者家属。将来，我们计划在分离的甲状腺激素转运蛋白中寻找遗传异常，以阐明甲状腺激素难治性疾病的异常。此外，创建表达细胞系并检查每种药物作为大脑和脊髓屏障的模型系统的渗透性，驱动力以及相互作用对于理解大脑和脊髓屏障的转运机制具有重要意义，并且被认为有助于筛查旨在过渡到中央区域的药物发育。