全く新しい癌治療法の主導権を握る有機カチオントランスポーター遺伝子の単離機能解析

有机阳离子转运蛋白基因的分离和功能分析将带来全新的癌症治疗

• 批准号: 16659348
• 负责人: 阿部 高明
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659348/
• 关键词: トランスポーター; 有機カチオン; アドリアマイシン

癌細胞の抗癌剤耐性に関与する、排出側transporterの詳細が明らかになりつつある一方、抗癌剤の取り込みに寄与する側の分子機構は、未だ不明の点が多い。我々は、抗癌剤Adriamycinの取り込みを担うOrganic Cation/Adriamycin Transpoter, OCA1を単離することに成功した。本研究では、更なる取り込み側transporterの単離および機能解析を目的とした。OCA1からprimerを作製し、肝・腎などのLibraryからのRapid Amplification of cDNA End法による新規transporterの単離を試みたが、新規のtransporterは単離し得なかった。そのため、OCA1の機能解析を進めることとした。Adriamycinに対する感受性規定にOCA1が関与しているか否かを検討した。Northern blotでOCA1の発現が認められないJurkat cell(白血病細胞株)にOCA1をtransfectし、Adryamicinに対する感受性をコントロールと比較した。その結果、OCA1を遺伝子導入していないJurkat cellと比較して、2μMのAdryamicinに対するviabilityが有意に低下していた。次に臨床検体でのOCA1の発現を調べたところ、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病細胞において、OCA1高発現白血病細胞株HL-60と比較して平均2倍のmRNAの発現が認められた。また、60種類の癌細胞株におけるOCA1の発現強度をrealtime RT-PCRでしらべたところ大腸癌や膵癌細胞で高い発現が認められた。さらにこれらの細胞のOCA1発現と各種抗癌剤に対する感受性を比較し相関する薬剤を同定することができた。

Cancer cell anti-cancer agent resistance related to, efflux side of the transporter details of the clear and clear, anti-cancer agent selection and delivery side of the molecular mechanism, unidentified points. I am interested in the selection of Adriamycin, an anti-cancer drug. Organic Cation/Adriamycin Transporter, OCA1 This study aims at analyzing the function of the side transporter. OCA1 Rapid Amplification of cDNA End Method for Primer Production, Liver, Kidney, Library, and New TransducerのAdriamycin sensitivity requirements for OCA1 are discussed. Northern blot identification of OCA1 expression in Jurkat cells (leukemic cell lines), OCA1 transfection, Adryamin sensitivity, and comparison. As a result, the viability of OCA1 gene transfer to Jurkat cells was intentionally lower than that of 2μM Adryamicin. The expression of OCA1 was modulated in clinical models, acute osteoblastic leukemia, acute leukemia cells, and OCA1-highly expressed leukemia cell line HL-60. Compared with HL-60, the expression of OCA1 mRNA was 2-fold higher on average. The realtime RT-PCR was used to detect OCA1 in 60 kinds of cancer cell lines. The OCA1 of these cells shows the same sensitivity to cancer.