有機アニオントランスポーターモデルマウス

有机阴离子转运模型小鼠

基本信息

批准号：
19659032
负责人：
阿部高明
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659032/
关键词：
薬物代謝学生体内解析

项目摘要

近位尿細管特異的に発現しているグルコーストランスポーターsglt2のプロモーター遺伝子領域と近位尿細管特異的にCre蛋白を発現するSglt2-Creマウスをフランスのグループより入手した。予備実験としてGFP蛋白を発現する事が可能なROSA26-tTA-GFP-loxPマウスと近位尿細管特異的プロモーターであるSglt2-Creマウスを交配し、近位尿細管特異的にGFP、tTAを発現するマウスを作製し、実際このプロモーターが目的蛋白質(予備実験ではGFP)を近位尿細管に発現させることが出来ることが確認されたので、このプロモーターを用いて腎臓特異的にヒトOATP-Rを過剰発現させたトランスジェニックラットを作製した。hOATP-Rは、腎臓からのジゴキシン排泄に関与する事が知られている(Mikkaichi T et al. Proc Natl Acad Sci USA 101 : 3569-3574, 2004)。作製されたsglt2-hOATP-Rトランスジェニックラットにて、尿中ジゴキシン排泄について検討した。その結果、ヒトOATP-Rの腎特異的発現ラットであるTG(+)ラット(N=6)では、陰性対象であるTG(-)ラット(N=5)に比べて、優意に投与ジゴキシン量に対する尿中ジゴキシン排泄量の比の増加が確認でき、近位尿細管特異的に遺伝子を発現させる方法が樹立された。

表达葡萄糖转运蛋白SGLT2的启动子基因区域的SGLT2-CRE小鼠，该葡萄糖转运蛋白SGLT2特异性表达，并从法国组获得CRE蛋白。在初步实验中，能够表达GFP蛋白和近端小管特异性启动子的ROSA26-TTA-GFP-LOXP小鼠SGLT2-CRE小鼠与特异性表达GFP和TTA近端小管的小鼠配对。已经证实，该启动子实际上可以在近端小管中表达靶蛋白（初步实验中的GFP），因此，使用该启动子制备了具有肾脏特异性过表达人OATP-R的转基因大鼠。众所周知，HOATP-R参与了肾脏的地高辛排泄（Mikkaichi T等人Proc Natl Acad Sci USA 101：3569-3574，2004）。在制备的SGLT2-荷兰普 - R转基因大鼠中研究了尿道地高辛排泄。结果，在Tg（+）大鼠（n = 6）中，其表达了对人OATP-R的肾脏特异性，尿道毒素排泄与施用的地高毒素的量的比率更可能增加尿道地高毒素的比率增加，而尿道毒素排泄的比率与给药的二高氧蛋白（n = 5）的量相比，与Tg（n = 5）相比，n = 5）是n = 5）。特别是在近端小管中建立了。