消化器固形癌特異的発現トランスポーターLST-2を用いた癌指向性抗癌剤の開発

利用胃肠道实体瘤特异性表达转运蛋白LST-2开发癌症定向抗癌药物

基本信息

批准号：
17016006
负责人：
阿部高明
金额：
$ 3.26万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は消化器固形癌細胞に特異的に発現する新規有機アニオントランスポーターLST-2を単離した。LST-2はメトトレキセート(MTX)を飽和的にかつ濃度依存的に輸送し培養細胞へのLST-2遺伝子の導入は細胞のMTXに対する感受性を高めることが明らかとなった。消化器固形癌ではLST-1やfolateトランスポーターの発現はほとんど無いことからLST-2のみに運ばれる特異的基質が解明されることにより、消化器固形癌を特異的にターゲットとする新規アニオン系抗癌剤の開発が可能となると考えられた。そこでLST-2アデノウイルスを作製しLST-2アデノウイルスを導入した細胞はアフリカツメガエル卵母細胞発現系より容易かつ効率的に基質を輸送することが明らかとなりアデノウイルスを用いたトランスポーターの強制発現系を樹立した。LST-1およびLST-2アデノウイルスを培地中に投与したヒト培養肝細胞は胆汁酸、ステロイドホルモンをベースに比べて約30〜100倍取り込みんだ。さらに我々はスキッドマウスに消化器固形癌細胞を移植し、生着した癌組織にLST-2組み換えアデノウイルスを注入し、更に腹腔内にMTXを投与したところ、コントロールに比較してLST-2のアデノウイルスを注入した癌細胞は約4週でほぼ消滅することを確認した。

我们分离了一种新型有机阴离子转运蛋白LST-2，该转运蛋白LST-2在消化固体癌细胞中特异性表达。 LST-2以饱和和浓度依赖性的方式转运甲氨蝶呤（MTX），并且已表明将LST-2基因引入培养细胞中会增加细胞对MTX的敏感性。由于LST-1或叶酸转运蛋白在固体消化癌中几乎没有表达，因此人们认为，通过阐明仅运输到LST-2的特定底物，可以开发出新型的贫血抗癌剂，该抗癌剂专门针对固体消化癌。因此，发现与Xenopus卵母细胞表达系统更容易有效地运输的LST-2腺病毒在易于运输的LST-2腺病毒中生产和引入的细胞，并建立了使用腺病毒的转运蛋白的强制表达系统。在培养基中施用的LST-1和LST-2腺病毒施用的人培养的肝细胞比胆汁酸和类固醇激素的碱高约30-100倍。此外，我们将胃肠道固体癌细胞移植到滑冰小鼠中，将LST-2重组腺病毒注射到雕刻的癌症组织中，然后腹膜内施用MTX，并确认注射了LST-2腺病毒的癌细胞几乎在4周后消失了4周，与对照组相比，它几乎消失了。