チェックポイントコントロールにおけるRad24-RFC複合体の作用機構の解明

阐明 Rad24-RFC 复合物在检查点控制中的作用机制

• 批准号: 01J01742
• 负责人: 内木 隆寛
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J01742/
• 关键词: DNA損傷; チェックポイント

真核生物では、DNA損傷に応答してチェックポイントが活性化し、細胞周期の停止を引き起こす。出芽酵母のDNA損傷チェックポイントにおいて、ATM関連因子Mec1は中心的な役割を果たしている。Mec1はキナーゼであり、リン酸化によって下流にシグナルを伝達すると考えられている。Mec1はDNA損傷が生じると、損傷部位に結合することが報告されている。Rad9はDNA損傷に応答してMec1依存的にリン酸化されるタンパク質であり、このRad9のリン酸化はチェックポイントの活性化に必須である。前年度、Rad9がMec1同様、DNA損傷部位に結合すること、また、Rad9の損傷部位への結合にはMec1のキナーゼ活性が必要なことを明らかにした。今年度、引き続きRad9の損傷DNAへの結合についてMec1の関与に焦点をあて解析を行った。その結果、Mec1はin vitroにおいてRad9をリン酸化することが明らかになった。また、Mec1によるリン酸化サイトに変異を導入したRad9はDNA損傷部位への結合がみられなかった。これらの結果から、Rad9の損傷DNAへの結合には、Mec1によるリン酸化が重要であると考えられる。

Eukaryotes で で, DNA damage に応, <s:1> てチェッ, ポ, <s:1>, トが activation <s:1>, and <s:1> cessation of the cell cycle を lead to を and す す. Budding yeast DNA damage の チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に お い て, ATM masato even factor Mec1 は center な "を cut fruit た し て い る. Mec1 は キ ナ ー ゼ で あ り, リ ン acidification に よ っ て obscene に シ グ ナ ル を 伝 da す る と exam え ら れ て い る. Mec1 <s:1> DNA damage が birth じると, injury site に combined with する ると が report されて る る. Rad9 DNA damage は に 応 answer し て Mec1 dependent に リ ン acidification さ れ る タ ン パ ク qualitative で あ り, こ の Rad9 の リ ン acidification は チ ェ ッ ク ポ イ ン ト の activeness に must で あ る. Year, before Rad9 が Mec1 with others, DNA injury に す る こ と, ま た, Rad9 の injury へ の combining に は Mec1 の キ ナ ー ゼ active が necessary な こ と を Ming ら か に し た. This year, 続 続 Rad9 damaged DNAへ <e:1> is combined with に て てMec1 続 and に focus をあて to analyze を line った. Youdaoplaceholder0 そ results, Mec1 て in vitroにお て てRad9をリ <s:1> acidification する とが とが Ming ら になった になった になった. ま た, Mec1 に よ る リ ン acidification サ イ ト に - different を import し た Rad9 DNA injury へ は の combining が み ら れ な か っ た. こ れ ら の results か ら, Rad9 の damage DNA へ の combining に は, Mec1 に よ る リ ン acidification が important で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

Takahiro Naiki et al.: "Association of Rada with Double-Strand Breaks through a Mec1-Dependent Mechanism"Molecular and Cellular Biology. Vol.24, No.8. 3277-3285 (2004)

Takahiro Naiki 等人：“Rada 与双链断裂的关联突破了 Mec1 依赖性机制”分子和细胞生物学。