魚類アレルゲンの分析法の確立、エピトープ解析および低減化技術の開発

鱼类过敏原分析方法的建立、表位分析及还原技术的开发

• 批准号: 01J02160
• 负责人: 濱田 友貴
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: 東京水産大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J02160/
• 关键词: 魚類のアレルゲン; パルブアルブミン; ウシガエル; IgE結合エピトープ; T細胞エピトープ; コラーゲン; cDNA

1、初年度に全塩基配列および演繹アミノ酸配列を明らかにしたマサバパルブアルブミン(PA)をもとに、合成ペプチドを作製しIgE結合エピトープの解析を行った。複数の患者血清を合一して評価したところ、複数のエピトープが存在することを明らかにした。現在、さらに研究を進めているところである。2、各種魚肉加熱抽出液のアレルゲン性は魚種間で異なる。この原因を解明するために、各魚種普通筋中のPA含量を測定し、そのアレルゲン性を複数の患者血清を用いて調べた。その結果、アレルゲン性の差は含量だけでは説明がつかず、PAのアミノ酸配列と含量の両方が関与していると考えられた。3、魚類同様、筋肉に多量のPAをもつウシガエルを試料に、PAの精製およびその性状解明を行った。また、魚類アレルギー患者血清を用いてウシガエルPAと魚類PAの交叉性を調べた。その結果、魚類のPAではβ型が主流であったが、ウシガエルにはαとβの二種類が存在した。またウシガエルPAとの反応性は患者間で異なり、同じPAをアレルゲンとする患者にとってもエピトープが異なることが示唆された。さらにウシガエルPAがPA患者のエピトープ判断に応用できると考えられた。4、昨年度から引き続き行りているPAのT細胞エピトープ解析は、樹立がうまくいかず、甲殻類のアレルゲンであるトロポミオシンで再検討を行った。その結果、トロポミオシンに反応するT細胞の樹立に成功した。現在、トロポミォシンの合成ペプチドを用いたT細胞エピトープ解析を行っているところである。また同条件で再度PAでの感作を試みている。5、イムノブロットおよびELISAによる複数の魚類アレルギー患者血清を用いたスクリーニングを行った。その結果、すべての患者においてPAかコラーゲンのいずれか、もしくは両方に反応が認められた。しかし、イムノブロットとELISAの相関は必ずしも得られず、今後の診断基準には両測定方法を併用して行う必要があると判断した。

1. In the first year, the total base alignment and deduction of the acid alignment are clearly defined, and the synthesis of IgE binding is performed. A plurality of patients 'serum levels were measured and analyzed. Now, I'm going to study it. 2, all kinds of fish heated extract liquid and different sex between fish species. The reason for this is that the PA content in the common tendons of various species is determined, and the serum of multiple patients is adjusted. The results show that the difference in the content of PA is related to the content of PA. 3, fish, muscle meat, a large amount of PA, PA, refined and other characteristics of the solution The serum of fish and fish is used to regulate the cross-reactivity of fish PA. As a result, the PA of fish has two types: alpha and beta. It's not like we're going to be able to do this. For example, if you are a patient with PA, you can use it to determine whether or not you are a patient. 4. The analysis of PA T cells in the past year has been carried out again. As a result, T cells were successfully established. Now, the synthesis of T-cells is very important. The same conditions were met and the feeling was tested again. 5. The use of fish serum in the treatment of multiple diseases. The result is that the patient has to go to the hospital to find out what to do. The method of determination of future diagnostic criteria is necessary.

项目成果

Yuki Hamada et al.: "Purification, reactivity with IgE and cDNA cloning as the major allergen of mackerels"Food and Chemical Toxicology. 41. 1149-1156 (2003)

Yuki Hamada 等人：“作为鲭鱼主要过敏原的 IgE 的纯化、反应性和 cDNA 克隆”食品和化学毒理学。

Yuki Hamada: "Purification, reactivity with IgE and cDNA cloning as the major allergen of mackerels"Food and Chemical Toxicology. (印刷中). (2003)

Yuki Hamada：“作为鲭鱼主要过敏原的 IgE 和 cDNA 克隆的纯化、反应性”《食品和化学毒理学》（出版中）。

濱田友貴, 塩見一雄: "魚類アレルギー患者血清のカエルパルブアルブミンに対する反応性"食物アレルギー研究会会誌. 3. 83-86 (2003)

Yuki Hamada、Kazuo Shiomi：“鱼过敏患者血清对青蛙小清蛋白的反应”，食物过敏研究组杂志，3. 83-86 (2003)。

Yuki Hamada: "Reactivity of IgE in fish-allergic patients to fish muscle collagen"Allergology International. (印刷中). (2003)

Yuki Hamada：“鱼过敏患者的 IgE 对鱼肌肉胶原蛋白的反应”，国际变态反应学（2003 年）。

Yuki Hamada et al.: "Reactivity of IgE in fish-allergic patients to fish muscle collagen"Allergology International. 65. 285-291 (2003)

Yuki Hamada 等人：“鱼过敏患者 IgE 对鱼肌肉胶原蛋白的反应性”国际变态反应学。