新規基底膜細胞接着分子ラミニン-8の機能解析

新型基底膜细胞粘附分子laminin-8的功能分析

• 批准号: 01J60068
• 负责人: 藤原 裕展
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J60068/
• 关键词: ラミニン; インテグリン; 細胞接着

・血管内皮細胞の接着、遊走におけるラミニン-8の機能解析血管新生は、血管内皮細胞と液性因子、そして細胞外マトリックスとの相互作用を必要とする複雑な現象である。ラミニン-8は胎児から成体までの全ての血管基底膜に存在するラミニンアイソフォームであり、血管新生の際の細胞接着や遊走に重要な役割を果たすと考えられるが、その役割は十分に理解されていない。そこで私は、血管内皮細胞の接着・遊走におけるラミニン-8の役割を、インテグリンを介するシグナル伝達に注目して解析した。ラミニン-8はラミニン-10/11、フィブロネクチンと比べて細胞接着活性が弱いが、フィブロネクチンよりも2倍も強く細胞の遊走を促進した。インテグリン抗体を用いた細胞遊走阻害実験により、ラミニン-8上での細胞遊走はα6β1インテグリンを介して起こることが明らかとなった。細胞遊走には極性を持った細胞骨格の再編が必要である。そこで私は、各細胞外マトリックス蛋白質に接着した細胞のアクチン骨格と接着斑の染色を行った。ラミニン-8に接着した血管内皮細胞は、ラッフリングの周辺に細かいアクチン繊維の縞と小さな接着斑を形成したが、フィブロネクチンに接着した細胞は細胞全体に太いアクチン繊維の束(ストレスファイバー)と大きな接着斑を形成した。アクチン骨格や接着斑の形成を制御するRhoファミリー低分子量G蛋白質(Rho, Rac, Cdc42)の活性を調べたところ、ラミニン-8に接着した細胞ではフィブロネクチンに接着した細胞に比べてRacの活性化が強く起こっていることが分かった。またラミニン-8上での強い細胞の遊走はドミナントネガティブRacで強く阻害された。これらの結果から、ラミニン-8は血管内皮細胞のRacを強く活性化することにより、α6β1インテグリン依存的な血管内皮細胞の遊走を引き起こしていることが明らかとなった。

·Functional analysis of vascular endothelial cell adhesion, migration and angiogenesis. Vascular endothelial cell and cytokine, extracellular interaction, and the need for complex phenomena. In the early stages of development, the basement membrane of all blood vessels existed in the fetus, and the cells in the angiogenesis process migrated and were important for the development of blood vessels. In addition, the vascular endothelial cells in the blood vessels of the patients were divided into three groups: The activity of the cells is weak, and the activity of the cells is 2 times stronger than that of the cells. The cell migration inhibition effect of the antibody on the cell migration was investigated. Cell migration is necessary to maintain the cell skeleton. The cells were stained with protein. The vascular endothelial cells in the middle and lower reaches of the blood vessel form small patches around the circumference of the blood vessel. The vascular endothelial cells in the middle and lower reaches of the blood vessel form large patches. The activity of Rho, Rac, Cdc42 is regulated by the activity of Rho, Rac, Cdc42, which is stronger than that of Rac. The strong cells in the upper part of the cell wall are blocked by the strong cells in the cell wall. The results showed that Rac activation of vascular endothelial cells was enhanced by α6β1-dependent Rac migration.

项目成果

Noora Petajaniemi: "Localization of Laminin Alpha4-Chain in Developing and Adult Human Tissues"The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 50(8). 1113-1130 (2002)

Noora Petajaniemi：“层粘连蛋白 α4 链在发育中和成人人体组织中的定位”《组织化学和细胞化学杂志》。

Yoshitaka Hayashi: "Identification and recombinant production of human laminin alpha4 subunit variants"Biochemical and Biophysical Research Communications. 299. 498-504 (2002)

Yoshitaka Hayashi：“人层粘连蛋白α4亚基变体的鉴定和重组生产”生物化学和生物物理研究通讯。