Wechselwirkungen zwischen Membrantransportern im heterologen Expressionssystem

神经系统中的神经胶质细胞与神经系统中的神经胶质细胞一样具有功能性。通过突触Spalt的神经递质对神经元的营养作用。Gliazellen通过一种特殊的膜转运蛋白来实现这些功能：一种单羧基转运蛋白（MCT），它与细胞膜转运蛋白和神经元能量底物（如Laktat、Pyruvat或Ketonkörper）一起作用;一种谷氨酸-乙酰胆碱（EAAT），它与神经元的高亲和力氨基酸（如Glutamat）一起作用;使用一种钠-Bikarbonat-Kotransporter（NBC），其基础是产生细胞膜，其细胞溶质的pH值可以调节，也可以调节细胞外的pH值。在该项目中，所有三个天体都来自于Säugetieren geklonten Transporter，在Gliazellen（Astrozyten）vorkommen，在Frosch-Oozyten heterogram explorert韦尔登。通过体外转录、消化和分离，将来自cDNA克隆蛋白质的RNA固定在非洲爪蟾的非活体组织中。这是基于假设的韦尔登，即假设质子梯度和碳酸酐酶的活性都是由质子梯度和碳酸酐酶活性决定的。Nach Expression eines einzelnen oder zweier Transportproteine sollen Membranstrom in der Spannungsklemme und intrazelluläre Konzentrationen von H+ und Na+，und somit Transportaten，unter verzedenen Bedingungen in den Eizellen bestimmt韦尔登. Ziel is，Aufschlüber eine mögliche Kooperativität glialer Funktionen auf der Ebene von Membrantransportern zu erhalten.一个合作的运输车könnte能源sparen和一个Rückkopplung sogar“Abfallprodukte”一样，Kohlendoxid mit einbeziehen。

Gliazellen übernehmen in Nervensystemen wichtige Funktionen, wie z.B. die Aufrechterhaltung der ionalen Homöostase, Beseitigung von Neurotransmittern aus dem synaptischen Spalt sowie trophische Unterstützung für benachbarte Neurone. Dazu verfügen Gliazellen über eine Reihe spezifischer Membrantransportern für diese Funktionen: einen Monocarboxylattransporter (MCT), mit dem sie organische Säuren über die Membran transportieren und den Neuronen energiereiche Substrate wie Laktat, Pyruvat oder Ketonkörper zukommen lassen können; ein Glutamat-Aufnahmesystem (EAAT), mit sie hochaffin erregende Aminosäuren wie Glutamat, von Neuronen an erregenden Synapsen freisetzt, aufnehmen; sowie einen Natrium-Bikarbonat-Kotransporter (NBC), mit dem sie Basenäquivalente über die Zellmembran bewegen und ihren cytosolischen pH-Wert regulieren sowie den extrazellulären pH-Wert im Gewebe modulieren können. In dem beantragten Projekt sollen diese aus Säugetieren geklonten Transporter, die alle drei nebeneinander in Gliazellen (Astrozyten) vorkommen, in Frosch-Oozyten heterolog exprimiert werden. Dazu wird RNA aus der cDNA klonierter Proteine durch in vitro Transkription hergestellt, gereinigt und isoliert, und anschließend in unreife Oozyten des Krallenfroschs Xenopus laevis injiziert. Es soll die Hypothese überprüft werden, ob es Wechselwirkungen zwischen den Transportern gibt, und welche Rollen dabei der Protonen-Gradient und die Aktivität der Carboanhydrase spielen. Nach Expression eines einzelnen oder zweier Transportproteine sollen Membranstrom in der Spannungsklemme und intrazelluläre Konzentrationen von H+ und Na+, und somit Transportraten, unter verschiedenen Bedingungen in den Eizellen bestimmt werden. Ziel ist es, Aufschluß über eine mögliche Kooperativität glialer Funktionen auf der Ebene von Membrantransportern zu erhalten. Eine Kooperation verschiedener Transporter könnte Energie sparen und in einer Rückkopplung sogar "Abfallprodukte" wie das Kohlendioxid mit einbeziehen.