エイズ感染阻子分子の分子設計法の基礎研究

艾滋病感染阻断分子的分子设计方法基础研究

• 批准号: 13015220
• 负责人: 杉村 和久
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015220/
• 关键词: エイズ; エントリーインヒビター; CCR5; ファージライブラリー; ヒト抗体; scFv; 感染防御; ペプチドミミック

私どもは1998年に受容体かリガンドの立体構造を認識する特異抗体で、かつその分子間の結合を阻害する活性をもつ抗体を用いると、ペプチドファージライブラリーから、受容体やリガンドの結合サイトの立体構造をコピーしたモチーフを有するファージクローンを単離できることを明らかにした。この方法論では膜7回貫通型受容体、CCR5のミミック分子を設計することも可能と考えられ、HIV-1感染を阻害する抗CCR5抗体、2D7を用いてCCR5ミミックの設計を試みた。その結果ファージクローンのレベルではHIV-1感染を阻害するクローンが単離できるものの、そのモチーフの合成ペプチドでは、阻害活性が再現することができなかった。この結果から、ペプチドファージライブラリーからヒト抗体を提示するファージライブラリーを用いる研究手法にシフトしHIV-1エントリーインヒビターを開発を試みた。この目的のために私どもは20名のヒト健常人の末梢血リンパ球を用いて、大規模なnon-immune human single chain Fv(scFv) libraryを4種類(VγとVλ、VγとVκ、VμとVγ、VμとVκ)作製することを達成した。このライブラリーは国際的にも優れて大規模なヒト抗体ライブラリーである。このライブラリー用いて、肥満細胞からのヒスタミンの放出を阻害するFcεRI特異的scFvの単離、およびIL-6に依存して増殖するヒトKT-3細胞の増殖を阻害するIL-6特異的scFvの単離に成功した。この成果はnon-immuneのライブラリーを用いてヒトの分子に対するヒトの抗体を作製できることを示した。現在、CCR5に特異的なヒトscFvの単離を1)CCR5陽性293細胞を用いた細胞パンニング法、および2)CCR5合成ペプチド168-178を用いたプラスチックパンニング法により試みている。

In 1998, the recipient

项目成果

杉村 和久, 吉満 正明, 御手洗 睦和, 新村 靖彦: "HIV-1エントリーインヒビター"臨床免疫. 35.5. 594-604 (2001)

Kazuhisa Sugimura、Masaaki Yoshimitsu、Mutsukazu Mitarai、Yasuhiko Niimura：“HIV-1 进入抑制剂”临床免疫学 35.5（2001）。

M.Kaji, M.Ikari, S.Hashiguchi, Y.Ito, R.Matsumoto, T.Yoshimura, J.Kuratsu, K.Sugimura: "Peptide Mimics of Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1) with an Antagonistic Activity"J. Biochem, 129 577-583, 2001. 129. 577-583 (2001)

M.Kaji、M.Ikari、S.Hashiguchi、Y.Ito、R.Matsumoto、T.Yoshimura、J.Kuratsu、K.Sugimura：“具有拮抗活性的单核细胞趋化蛋白 1 (MCP-1) 的肽模拟物

M.Kawaura T.Naito, M.Ueno, T.Akagi, K.Hiraishi, I.Takai, M.Makino, T.Serizawa, K.Sugimura, M.Akashi, M.Baba: "Induction of mucosal IgA following intravaginal administration of inactivated HIV-1-capturing nanospheres in mice"J. Med. Virol.. 66. 291-298 (20

M.Kawaura T.Naito、M.Ueno、T.Akagi、K.Hiraishi、I.Takai、M.Makino、T.Serizawa、K.Sugimura、M.Akashi、M.Baba：“阴道内注射后粘膜 IgA 的诱导

橋口 周平, 杉村 和久: "皮膚に塗るDNAワクチン"臨床免疫. 36.6. 949-952 (2001)

Shuhei Hashiguchi、Kazuhisa Sugimura：“应用于皮肤的 DNA 疫苗”临床免疫学 36.6（2001）。

K.Sugimura, R.Gejima, T.Nakashima, S.Hashiguchi, Y.Ito, S.Okuhata, N.Nishimoto, K.Yoshizaki: "Anti-IL-6 antibody-binding motif peptides inhibiting the signaling of human IL-6 to human IL-6 receptor but not murine IL-6 receptor"Scandinavian Journal of Immu

K.Sugimura、R.Gejima、T.Nakashima、S.Hashiguchi、Y.Ito、S.Okuhata、N.Nishimoto、K.Yoshizaki：“抗 IL-6 抗体结合基序肽抑制人 IL-6 信号转导