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In vivoでがん転移を促進するマイコプラズマ分子の構造と機能

体内促进癌症转移的支原体分子的结构和功能

基本信息

批准号：
06670237
负责人：
杉村和久
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670237/
关键词：
癌転移マイコプラズマサイトカイン遺伝子発現

项目摘要

マウスを用いたヒト大腸癌RPMI4788細胞の肺転移の実験系に関するこれまでの研究により、In vivoでマイコプラズマ由来のAg243-5分子が肺への癌転移促進作用を示すことが明らかにされた。本研究ではこの分子機構を明らかにするため、In vitroの実験系においてAg243-5が細胞にいかなる影響を及ぼすのかについて検討を進めた。サイトカインの産生に及ぼす影響を検討するために、Ag243-5投与後のマウスの脾臓および肺について,IFN-α,IFN-β,IFN-γ,TNF-α,TNF-β,IL-1α,IL-1β,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-9,IL-10,G-CSF,M-CFS,GM-CSF,LIF,TGF-βの遺伝子発現に及ぼす影響をRT-PCR法で検討した。その結果、いずれの遺伝子発現においてもヒト大腸癌RPMI4788細胞の肺転移との関連性は認められなかった。このため、当初予定していたAg243-5遺伝子のトリプトファンをコードするTGA(通常はストップコドンとして読まれる)をTGGに改変し、E.ColiでAg243-5遺伝子を発現させ、リコンビナントAg243-5を調整する計画は延期された。接着分子の発現に対する影響を検討する必要があると考えられる。ヒト末梢血リンパ球のcDNAについて、Ag243-5のホモログの有無を調べるため、Ag243-5遺伝子断片を作成し,Southern blot解析、およびAg243-5遺伝子の合成プライマーを用いたRT-PCRを行ったが、ヒトでのホモログは見いだされなかった。既知のタンパク分子データーバンクを用いたアミノ酸配列のホモロジー検索からも、何らかの機能を推測させるモチーフは得られていない。今後、本研究を推進するためには、Ag243-5の生理活性を追跡しうるIn vitroの実験システムの確立が必須であると考えられる。

Study on the role of Ag243 -5 In promoting lung metastasis of colorectal cancer RPMI4788 cells In this study, the molecular mechanism of Ag243 -5 in vitro was investigated. To investigate the effects of Ag243 -5,IFN-α,IFN-β,IFN-γ,TNF-α, TNF-β,IL-1α,IL-1β,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-9,IL-10,G-CSF,M-CFS,GM-CSF,LIF,TGF-β on the development and development of CFS gene in the spleen and lung. The results showed that there was no correlation between lung metastasis and gene expression in colorectal cancer RPMI4788 cells. The TGA(usually the TGA) changes the TGG, the E.Coli Ag 243 -5 gene discovery, and the TGA changes the Ag243 - 5 gene adjustment program. The next step is to examine the effects The cDNA sequence of the terminal protein, the presence or absence of Ag243-5 gene, the Ag 243 -5 gene fragment, the Southern blot analysis, and the synthesis of Ag243 -5 gene were analyzed by RT-PCR. It is known that the molecular structure of the compound can be used to predict the function of the compound. In the future, the physiological activity of Ag243 -5 must be traced to establish the system of vitro.