白血病発症におけるAML1遺伝子変異の生物学的意義に関する研究

AML1基因突变在白血病发生发展中的生物学意义研究

基本信息

批准号：
13216088
负责人：
奥田司
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216088/
关键词：
AML1 AML1-MTG8 RUNX1 ETO 白血病染色体転座転写因子 ES細胞

项目摘要

AML1(PEBP2αB/RUNX1)遺伝子はヒト急性白血病症における遺伝子変異のもっとも高頻度の標的であり、これは造血初期発生において重要な役割を担う転写因子をコードしている。当該研究ではAML1の生物作用の分子メカニズムや、染色体相互転座によって形成される融合型AML1遺伝子産物による白血病発症機構について、主としてマウスにおける遺伝子ターゲティングを用いた手法によって多面的に解析した。そして、下記の諸点を明らかにした。1.AML1の生物活性を検討する新規実験システムとして、その第4エクソンにAML1のcDNAをノックインさせてin vivo造血を再構築させる実験系を樹立した。2.融合型AML1-MTG8遺伝子を片方のAML1遺伝子座にノックインさせたES細胞はキメラマウスにおいて定常造血に貢献することができることを明らかにした。3.しかし、AML1-MTG8ノックイン細胞はキメラマウスの寿命内では白血病転化を生じず、この融合遺伝子は造血器腫瘍発生において必要となるものの、十分ではないことが示された。4.発がん性アルキル化剤であるENUの投与によってキメラマウスの一部で白血病発症が誘導されたが、効率は悪く、その投与方法には更なる工夫が必要であるものと考えられた。5.AML1遺伝子変異の生物作用を個体のレベルで検討するための手始めとして野生型AML1のcDNAをAML1遺伝子座のエクソン4にノックインさせたgermlineマウスを作成し、これが生存可能であり、ほぼ正常の造血が構築されることを見出した。このマウスは下記実験における正常コントロールとして用いることができる。6.ヒト骨髄異形成症候群(MDS)で認めた挿入型変異をノックイン導入したマウスES細胞を樹立し、現在、その造血における作用について解析中である。

AML1（PEBP2αB/RUNX1）基因是人类急性白血病中最常见的遗传突变靶标，该靶标在编码转录因子中，在早期造血性发育中起着重要作用。在这项研究中，AML1生物学作用的分子机制以及由染色体插入形成的融合AML1基因产物引起的白血病发育机制，以多种方式分析，主要使用小鼠中的基因靶向。并阐明了以下几点：1。作为研究AML1生物学活性的新型实验系统，建立了一个实验系统，其中将AML1 cDNA撞到了第四个外显子中，以在体内重建造血。 2。我们已经揭示了在一个AML1基因座以融合型AML1-MTG8基因敲打的ES细胞可以有助于嵌合小鼠的稳定造血。 3。然而，AML1-MTG8敲入细胞在嵌合小鼠的寿命内不会引起白血病转化，尽管该融合基因是造血肿瘤发展所必需的，但已证明它是不足的。 4。致癌烷基化剂ENU诱导了某些嵌合小鼠的白血病的发展，但效率效率低下，在给药方法中认为需要进一步的创造力。 5。为了研究AML1基因突变在个体水平上的生物学作用，我们创建了一种种系小鼠，将野生型AML1 cDNA撞倒到AML1基因座的外显子4中，发现它是可行的，几乎可以构建正常的造血剂。在以下实验中，该小鼠可以用作正常对照。 6。我们已经建立了在人骨髓发育综合征（MDS）中观察到的插入突变被撞倒的小鼠ES细胞，目前正在对其对造血剂的影响进行分析。