災症性骨吸収における破骨細胞でのシグナル伝達経路の解明とその分化・機能変化の解析

阐明灾难性骨吸收过程中破骨细胞的信号转导途径并分析其分化和功能变化

基本信息

批准号：
13771132
负责人：
山座孝義
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

歯周炎による骨吸収は、炎症反応により破骨細胞による骨吸収が惹起されたために歯槽骨の吸収が促進された為に生じ、重篤な場合には歯の喪失を招くことが知られている。本研究では炎症反応時に破骨細胞の機能を変化させる因子としてインターフェロン(IFN)とリポポリサッカライド(LPS)に注目し、これら因子の破骨細胞の分化・機能・生存について検索をおこなった。1)LPSおよびIFNの破骨細胞分化・機能に対する解析培養破骨細胞の分化過程においてLPSおよびIFNを作用させ、破骨細胞形成数ならびに吸収能をTRAP染色・ピット解析により検索した。LPSを作用させた場合、破骨細胞形成数に変化は認められなかったが、吸収能は増加傾向がみとめられた。一方、IFNを作用させた場合、破骨細胞形成数・吸収能ともに減少した。2)破骨細胞におけるアポトーシス関連遺伝子の解析アポトーシス関連遺伝子(iNOS,FasL,caspase 9)遺伝子発現の解析をLPSおよびIFN添加・無添加状態で比較した。LPS添加時ではこれらの遺伝子発現に有意差は認められなかったが、IFN処理時では、有意に発現が増加していた。3)LPSおよびIFNによる破骨細胞におけるアポトーシスについての検索LPSおよびIFN添加・無添加状態で、培養破骨細胞のアポトーシス現象を検索した。ヘキスト染色、TUNEL染色の結果、LPSを添加してもアポトーシスの促進は認められず、IFNを添加するとアポトーシスの促進が観察された。以上の結果より、破骨細胞に対してLPSは骨吸収能増加作用を有するが、分化・生存には影響を与えないことが示された。また、IFNは破骨細胞の分化・機能・生存のいずれの段階においても抑制的に作用することが判明した。本研究の内容は現在、論文作成中である。また、本研究の経費の一部を使用した内容を国際誌への発表ならびに現在印刷中である。

由于牙周炎引起的骨吸收是因为炎症反应促进了破骨细胞的骨吸收，从而促进肺泡骨吸收，并且在严重的情况下导致牙齿脱落。在这项研究中，我们专注于干扰素（IFN）和脂多糖（LPS），是改变炎症反应期间破骨细胞功能的因素，并寻找这些因素的分化，功能和存活。 1）在培养的破骨细胞，LPS和IFN分化过程中，LPS和IFN的破骨细胞分化和功能的分析用于作用，并通过陷阱染色和坑分析来搜索破骨细胞形成和吸收能力的数量。当使用LPS时，在破骨细胞形成的数量中未观察到变化，但是观察到吸收能力增加的趋势。另一方面，当应用IFN时，破骨细胞形成的数量和吸附能力都会降低。 2）分析与凋亡相关基因（INOS，FASL，caspase 9）基因表达的凋亡相关基因分析与LPS的分析（INOS，FASL，caspase 9），并添加了IFN或不添加LPS和IFN。尽管在添加LPS时在这些基因的表达中未观察到显着差异，但是在处理IFN时，表达显着增加。 3）通过LPS和IFN搜索破骨细胞的细胞凋亡，我们搜索了培养的破骨细胞中的凋亡现象，而无需添加或没有LPS和IFN。由于Hoechst和Tunel染色，即使添加LPS也没有观察到凋亡的促进，并且观察到添加IFN以促进凋亡。以上结果表明，LPS对破骨细胞有影响以提高骨吸收能力，但不会影响分化或存活。还发现，IFN在破骨细胞分化，功能和存活的所有阶段都起作用。这项研究的内容目前是在论文中。此外，使用这项研究的一些费用的内容正在国际期刊上发表，目前正在印刷中。