頭頸部癌株におけるSCC抗原の発現機構と生物学的意義に関する分子生物学的解析

头颈癌SCC抗原表达机制及生物学意义的分子生物学分析

• 批准号: 13771245
• 负责人: 岸本 裕充
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771245/
• 关键词: 頭頸部癌; SCC抗原

扁平上皮癌の腫瘍マーカーのうち最も代表的なもののひとつであるSCC抗原は,cDNAで98%のhomologyを示すSCCA1とSCCA2の遺伝子から産生される.申請者らは.血中SCC抗原値が高値を示した上顎洞腺様扁平上皮癌患者に由来するヌードマウス移植腫瘍SCCMM株を樹立した.本腫瘍は原発腫瘍に類似した分化度の低い組織型を保持し,SCC抗原の免疫組織化学染色は陽性で,また血中のSCC抗原値も移植腫瘍の増大に伴って上昇したことから,SCC抗原の高発現機構を解析するのに適した系と考えられた.移植腫瘍から,DNA, RNAおよびタンパクを抽出し,SCCA1とSCCA2のゲノムDNAレベルでそれぞれ特異的に増幅するプライマーを設定して半定量的PCRを行い遺伝子増幅を検討した.つづいてRNAよりcDNAを作製し,SCCA1とSCCA2のcDNAをそれぞれ特異的に増幅するプライマーを設定し,半定量的なRT-PCRを行いmRNAの発現量を検討した.またウエスタンブロット法を用いて,SCC抗原の発現量を検討した.なお対照として,ゲノムPCRには正常ヒト由来末梢血白血球を,頭頸部癌株CaSki, KB, Detroit562, SCCKN, HSGを用いた.その結果,SCCMMにおいて,SCCA1,SCCA2遺伝子のコピー数は正常白血球と同じで,SCC抗原遺伝子の増幅は認められなかった.一方mRNAレベルでは,SCCMMについで発現の強かったCaSkiと比較して,SCCA1で80倍,SCCA2で120倍と,他の細胞株に比して著しい高発現を示した.さらにタンパクレベルでは、CaSkiの15倍の発現を認めた.SCCMMにおいて,SCC抗原遺伝子の増幅は認められなかったが,mRNAレベルでの高発現が見出されたことから,SCC抗原タンパクの高発現は,転写レベルの亢進によることが示された.しかし,mRNAレベルよりもタンパクレベルの方が低いので,転写後の発現調節機構があることも示唆された.

SCC antigen is the most representative of squamous cell carcinoma, and 98% of cDNA homology shows SCCA1 and SCCA2 gene expression. Applicant's answer. The SCCMM strain was established in patients with squamous cell carcinoma of the maxillary cavity, which showed high blood SCC antigen levels. The tumor was similar to the original tumor, but the degree of differentiation remained low. Immunohistochemical staining for SCC antigen was positive, and the SCC antigen value in the blood was increased. Transplantation tumor,DNA, RNA and DNA amplification, SCCA1 and SCCA2 must be used for DNA amplification. The cDNA of SCCA1 and SCCA2 were amplified by PCR, and the mRNA expression was detected by semi-quantitative RT-PCR. The detection of SCC antigen was studied by using the SCC antigen detection method. In contrast, PCR was used to detect normal peripheral blood leukocytes, head and neck cancer lines CaSki, KB, Detroit562, SCCKN, HSG. The results showed that SCCMM,SCCA1,SCCA 2,SCCA2,SCCA1, SCCA 1, SCCA 2, SCCA 1 SCCMM1 was 80-fold higher than SCCA2, and SCCA2 was 120-fold higher than SCCMM2. The 15-fold increase in SCC antigen expression was detected by SCCMM. The increase in SCC antigen expression was detected by SCCMM. The increase in SCC antigen expression was detected by mRNA. In addition, the mRNA expression is regulated by the expression regulation mechanism after writing.