年齢依存性生体分子に着目した分子生物学的アプローチによる年齢推定

使用专注于年龄依赖性生物分子的分子生物学方法进行年龄估计

• 批准号: 13877069
• 负责人: 安田 年博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877069/
• 关键词: 年齢依存性; 年齢推定; deoxyribonuclease I; 思春期; 遺伝子発現; 成長; 内分泌; 鑑識科学

本研究では、成長の各ステージに特異的な年齢依存性生体分子の検出を利用した年齢推定法の確立を目的として研究を実施した。1.新規な年齢依存性生体分子を見出すため、今回ヒト臓器および体液に存在する核酸分解酵素DNase Iに着目しその年齢依存性を精査した。その結果、ヒト脳下垂体には主要産生臓器である膵臓に匹敵する高レベルのDNase Iが存在しており、その活性は年齢依存的に大きく変動することが明らかとなった。0才から15, 6才までの幼・若年者由来の下垂体にはその活性はほとんど検出されず、他方およそ17才以上になると急激な活性の増加が認められ、女性では50才前後で活性は顕著に低下し、男性では年齢とともにその活性は減少した。さらに、RT-PCR解析から下垂体におけるDNase I活性の変動はDNase I遺伝子の発現調整によって制御されることが明らかとなった。その遺伝子は幼・若年者由来の下垂体ではほとんど発現せず、思春期の発来とともに発現し、女性では閉経期に対応してその発現レベルが低下した。他方、同一のDNase I遺伝子の発現によって産生される膵臓DNase Iには下垂体のそれとは対照的に年齢依存性を示さず、下垂体におけるDNase I発現の年齢依存性には臓器特異性が認められた。従って、下垂体DNase Iは内分泌との関連が示唆される年齢依存性を示す新規な生体分子であることが明らかとなった。今後、その遺伝子の年齢依存的発現の機構を解明する予定である。2.従前の研究で見出したマウス腎臓に分布する年齢依存性生体分子M-LPについて、今回その分子生物学的性状を解明した。M-LP遺伝子はマウス染色体16B1-B2領域に座位し、およそ5 kbに及ぶ3個のexonから構成されていた。M-LP完全長cDNAを構築したところ、194アミノ酸残基をコードするopen reading frameが含まれていた。今後、M-LPに相当するヒトホモローグを検索し、ヒトにおける新規な年齢依存性生体分子を見出す予定である。

This study で は, growth の ス テ ー ジ に specific な years 齢 dependence of molecular の 検 out を USES し た years 齢 estimate の establish を purpose と し て research を be applied し た. 1. The new rules な years 齢 dependence molecular を see out す た め, today back to ヒ ト viscera お よ び humoral に exist す る nucleic acid decomposition enzyme DNase I に with mesh し そ の years 齢 dependency を fine check し た. そ の results, ヒ ト 脳 pituitary に は mainly produces viscera で あ る Cui viscera に match す る high レ ベ ル の DNase I が exist し て お り, そ の active は years 齢 dependent に big き く - move す る こ と が Ming ら か と な っ た. 0 to か ら 15, 6 ま で の young, if years origin の pituitary に は そ の active は ほ と ん ど 検 out さ れ ず, fang お よ そ 17 just above に な る と nasty shock な active の raised plus が recognize め ら れ, female で は で activity before and after 50 to は 顕 low に し, male で は years 齢 と と も に そ の activity は reduces し た. さ ら に, rt-pcr analytic か ら pituitary に お け る DNase I active の - move は DNase I chose 伝 son の 発 now adjust に よ っ て suppression さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た. そ の posthumous son 伝 は young, if years origin の pituitary で は ほ と ん ど 発 now せ ず, pubescent の 発 to と と も に 発 し, women now で は 経 closed period に 応 seaborne し て そ の 発 now レ ベ ル が low し た. Fang, the same の DNase I heritage 伝 son の 発 now に よ っ て produce さ れ る Cui viscera DNase I に は pituitary の そ れ と は polices according to all に years 齢 dependence を さ ず, pituitary に お け る DNase I 発 齢 dependence is の years に は viscera specificity が recognize め ら れ た. 従 っ て, pituitary DNase I は endocrine と の masato even が in stopping さ れ る years 齢 dependency を molecular で す in new rules な raw body あ る こ と が Ming ら か と な っ た. In the future, the <s:1> cultural heritage 伝 will rely on 齢 for 齢 years. The <s:1> institution を will explain する and である. Before 2. 従 で の research shows し た マ ウ ス renal viscera に distribution す る years 齢 dependence body molecular M - LP に つ い て, today back to そ の molecular biology characters を interpret し た. M - LP heritage 伝 son は マ ウ ス areas of chromosome 16 b1, B2 し に seat, お よ そ 5 KB に and ぶ three の exon か ら constitute さ れ て い た. M - LP completely long cDNA を build し た と こ ろ, 194 ア ミ ノ acid residues を コ ー ド す る open reading frame contains が ま れ て い た. In the future, M - LP に す る ヒ ト ホ モ ロ ー グ を 検 し and ヒ ト に お け る new rules な す 齢 dependence raw molecular を see in designated で あ る.

项目成果

Toshihiro Yasuda: "Amphibian DNases I are characterized by a C-terminal end with a unique, cystein-rich stretch and by the insertion of a serine residue into the Ca^<2+>-binding site"Biochemical Journal. 357(2). 473-480 (2001)

Toshihiro Yasuda：“两栖动物 DNA 酶 I 的特征在于具有独特的富含半胱氨酸的 C 末端，以及将丝氨酸残基插入 Ca^2 结合位点”《生物化学杂志》。

竹下 治男: "STR座位HumTPOおよびHumLPL:日本人7集団のデータについて"DNA多型. 9. 178-181 (2001)

Haruo Takeshita：“STR 位点 HumTPO 和 HumLPL：来自七个日本人群的数据”DNA 多态性。 9. 178-181 (2001)

Reiko Iida: "Novel polymorphic Y-STRs DYS441, DYS442 and DYS443 : characterization and haplotype analysis"International Journal of Legal Medicine. (in press).

Reiko Iida：“新型多态性 Y-STR DYS441、DYS442 和 DYS443：表征和单倍型分析”国际法律医学杂志。

Toshihiro Yasuda: "Abrupt pubertal elevation of DNase I gene expression in human pituitary glands of both sexes"FEBS Letters. 510(1). 22-26 (2002)

Toshihiro Yasuda：“青春期男性和女性垂体中 DNase I 基因表达突然升高”FEBS Letters。

Toshihiro Yasuda: "Activity staining for detection of ribonucleases using dried agarose film overlay method after isoelectric focusing"Methods in Enzymology. 341. 94-112 (2001)

Toshihiro Yasuda：“等电聚焦后使用干燥琼脂糖膜覆盖法检测核糖核酸酶的活性染色”酶学方法。