权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

鳥類ES細胞の樹立および希少鳥類復元への応用に関する発生工学的研究

禽类ES细胞建立及其在珍禽修复中的应用的发育工程研究

基本信息

批准号：
13760193
负责人：
鏡味裕
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760193/
关键词：
鳥類 ES細胞黒鳥骨鶏生殖細胞発生工学希少鳥類

项目摘要

多分化能を持つES細胞は鳥類においては未だ樹立されていない。そこで鳥類ES細胞の樹立および生殖細胞キメラを介した稀少鳥類復元への応用に関する研究をおこなった。放卵直後のニワトリ受精卵から胚盤葉を採取した。胚盤葉明域中央部に極在する比較的未分化な生殖細胞塊を選択的に採取した。これらの生殖細胞塊をPBSを用いて洗浄し、卵黄を完全に除去した。得られた生殖細胞分画をトリプシンを含むPBSに移しピペッティングによって完全な単一細胞へと解離した。この解離細胞をドナーとし、レシピエント胚盤葉に顕微注入した。操作胚を体外培養系を用いて21日間培養した。性成熟に達したキメラの生殖腺、精子、肝臓、筋肉を採取しDNAを精製した。このDNAをGene Scanによって解析したところ、ドナー由来の細胞(ゲノムDNA)がレシピエントの胚体に定着し、生殖腺、精子、肝臓、筋肉の全ての細胞および組織に発生分化し得ることが確認された。このことからニワトリ胚盤葉明域中央部に由来する細胞は多分化能を保持しており、この細胞から鳥類ES細胞樹立の可能性が示唆された。また、稀少鳥類の一種である黒烏骨鶏の受精卵を入手した。この受精卵から胚盤葉明域中央部の細胞塊を採取した。この細胞をドナーとして白色レグホンの胚盤葉に顕微注入した。体外培養によって異品種間キメラ胚が作出された。このキメラの左脚は黒烏骨鶏由来の細胞で全て置換されていた。この雌雄のキメラの交配によって黒烏骨鶏の復元が強く期待される。さらに現在、遺伝子組換え鳥類SCF、人由来LIF、TGF-beta、basic-FGFを培養液中に添加しドナー細胞と共に培養し、鳥類ES細胞の樹立および生殖細胞系列キメラの作出率の向上を試みている。

Multi-differentiation can maintain the same status as ES cell cycle. Different types of ES cells need to be used to determine the number of rare cells in the reproductive system, and to study the number of rare cells. After laying the eggs, the fertilized eggs were picked up and the embryos were picked up. The central part of the embryo plays an important role in the selection of undifferentiated reproductive cells. Wash the reproductive cells with PBS and remove the egg yolk completely. The cells are divided into two parts: one cell, one cell, Dissociate the cell from the cell and make sure that the embryo is microinjected. The culture of operating embryos in vitro was used within 21 days. The gonads, spermatozoa, liver, muscles and muscles were collected from the gonads, spermatozoa, liver, muscles and muscles of the sexually mature DNA. The DNA, Gene Scan, tissue differentiation and tissue differentiation were confirmed by the determination of embryo DNA, gonad, sperm, liver, muscle and muscle. It is important to understand that the multi-differentiation of cells in the central part of the region can maintain the possibility of cell growth in ES cells. A kind of rare and rare oysters. The fertilized eggs of the black carcass start with the eggs. The fertilized egg, the embryo, the central part of the domain, the cell, the embryo, the cell, the zygote, the fertilized egg, the fertilized egg, the embryo, the central part of the domain, the cell, the cell. The cells are white, the embryos are white, and the microinjection is fine. The embryos were cultured in vitro. The cause of the black bone in the left foot is that the cells are all set. Male and female, mating, bone, bone and bone. The current, sub-tissue specific SCF, human origin LIF, TGF-beta, basic-FGF culture solution are used to increase the production rate of reproductive cells in the culture solution of human, and ES.