腫瘍抑制遺伝子WT1のエピジェネティック変化による発現制御機構の解明

通过抑癌基因WT1的表观遗传变化阐明表达控制机制

• 批准号: 13770069
• 负责人: 副島 英伸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770069/
• 关键词: WT1; Wilms腫瘍; DNAメチル化; プロモーター; ゲノム刷り込み; 刷り込みドメイン; OBPH1; Obph1; 腫瘍抑制遺伝子; Bisulfite-Sequencing法; ルシフェラーゼレポーターアッセイ

WT1はウィルムス腫瘍(WT)の原因である癌抑制遺伝子であるが、その変異は約10%しか認められない。DNAメチル化により各種癌関連遺伝子が不活化されることから、WT1についても同様の機序が考えられる。WT22例について、WT1変異、11p13LOH、WT1発現定量、プロモーターメチル化解析を行った。10例にWT1発現低下を認め、1例が高メチル化を示した。この1例はLOHも認めたため、メチル化とLOHによるWT1のtwo hitが、発癌に関与していると考えられた。次に、レポーター遺伝子解析により、WT1プロモーターのメチル化が遺伝子発現を著しく抑制することが示された。これは、頻度は低いが、メチル化がWT1発現低下を起こすエピジェネティックな原因の一つであることを示唆する。一方、WT1変異とβ-カテニン変異は高頻度に合併することが報告されている。WT1発現低下例中にβ-カテニン変異は認められず、変異を認めた1例ではWT1発現は低下していなかった。これよりβ-カテニン変異とWT1発現量に関連はないと考えられた。WT1遺伝子座の近くには、WTに関連するゲノム刷り込みドメインが存在する。この刷り込みドメインはH19からIPL/IPlまでと考えられているが、IPL/IPl側の境界は決定されていない。我々は、従来の境界を越えた領域に新規刷り込み遺伝子OBPH1/Obph1を同定した。これによりヒト・マウスの刷り込みドメインは従来の境界を越えて伸長することがわかった。OBPH1/Obph1は、ヒト・マウス共に胎盤で母性アレル優勢発現を示したが、5'CpG島は両アレルとも低メチル化状態であった。本遺伝子の刷り込み状態は、DNAメチル化と関連しなかったが、ドメインレベルでの刷り込み調節機構により制御されている可能性が考えられる。

WT1 is a cancer-suppressing tumor (WT), which causes approximately 10% of cancer-suppressing tumors. DNA transformation, various cancer-related genetic mutations, inactivation of DNA, WT1, WT1, and WT1. WT22 case analysis, WT1 variation, 11p13LOH, WT1 quantification, and chemical analysis of WT1. 10 cases had low WT1 and 1 case had high WT1.この1caseはLOHもidentificationめたため, メチル化とLOHによるWT1のtwo hitが, 発 CancerにSeki and していると考えられた. Time に, レポーター伝子analytic により, WT1 プロモーターのメチル化が缝子発appears を出しく suppresses することがshows された.これは、frequency is low いが、メチル化がWT1発appears to be low and risesすエピジェネティックなreasonの一つであることをshows instigationする. On the one hand, WT1変differentとβ-カテニン変differentは High-frequency merger and することが report されている. In the case of WT1 low appearance, にβ-カテニン変义はcognitionめられず, 変different をcognition めた1 case, WT1 発appears low していなかった.これよりβ-カテニン変differentとWT1発现quantityにrelatedはないと卡えられた. WT1's remaining child seat is near, and WT's relationship is related to the existence of WT1.このbrush り込みドメインはH19からIPL/IPlまでと考えられているが, IPL/IPl side no realm はdetermination されていない. I am in the realm of the new realm and the new rules are the same as the OBPH1/Obph1.これによりヒト・マウスのbrush り込みドメインは従来の realm をOVER えて stretched することがわかった. OBPH1/Obph1は、ヒト・マウス公にplacentaでMaternalityアレルAdvantage 発The current version shows the 5'CpG island's low-level version. The status of the original brush of the son, the DNA of the DNA, the relationship between the DNA and the relationship, and the DNAンレベルでのbrush り込み adjustment mechanism によりcontrol されている possibility が考えられる.

项目成果

Ken Higashimoto: "Characterization and imprinting status of OBPH1/Obph1 gene : implications for an extended imprinting domain in human and mouse"Genomics. 80・6. 575-584 (2002)

Ken Higashimoto：“OBPH1/Obph1 基因的特征和印记状态：对人类和小鼠中扩展印记结构域的影响”Genomics 80・6 (2002)。

Yuji Satoh: "Significant reduction of WT1 gene expression possibly due to epigenetic alteration in Wilms' tumor"Journal of Biochemistry. (in press). (2003)

Yuji Satoh：“WT1 基因表达显着减少可能是由于维尔姆斯肿瘤的表观遗传改变所致”生物化学杂志。

向井 常博: "インプリンティングからみた個体発生と小児がん"ゲノム医学. 1・3. 47-53 (2001)

Tsunehiro Mukai：“从印记的角度来看个体发育和儿童癌症”基因组医学1・3（2001）。