小児急性白血病におけるBH3 onlyの解析とその臨床的意義

小儿急性白血病BH3的分析及其临床意义

• 批准号: 13770389
• 负责人: 合井 久美子
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770389/
• 关键词: BH3 only; 急性リンパ性白血病; アポトーシス; 白血病細胞

小児急性リンパ性白血病(Acute lymphoblastic leukemia ; ALL)とBH3 onlyの関与については、t(9;22)転座型であるKOPN30, KOPN55, KOPN57の3細胞株、11q23転座型であるKOCL33, KOCL44, KOCL45, KOCL69, KOPN1の5細胞株、pre-B ALLであるKOPN32, KOPN35、NALM6の3細胞株を用いて、BH3 only発現解析をRNase Protection AssayとWestern blotting法を用いて行った。BH3 onlyのうち、Bad, Blk, Hrk, Bikの発現はいずれの細胞株でも低値であった。新規抗癌剤の候補の一つであるHDAC inhibitorをこれらの細胞株に投与したところ、すみやかにアポトーシスが誘導された。そこでHDAC inhibitor投与後のBH3 only遺伝子の発現解析を行ったところ、Bad, BikのmRNAの発現がすみやかに上昇した。しかしながら蛋白レベルではBadの発現変化はほとんどみられなかったが、Bik蛋白はHDAC inhibitorでアポトーシス誘導時に発現が増加した。これは血清除去後にKOPN30で発現増加がみられたのと同様の結果であった。またHDAC inhibitor添加後、BH3 onlyであるBidの活性化が認められた。しかしながら、その上流であるCaspase-8の活性化、もしくはTNF-receptor familyの発現増加は観察されなかった。以上により、小児のB-precursor ALLにおける血清除去、薬剤刺激などによるアポトーシス機序の一因としてBH3 onlyであるBik, Bidの活性化が関与している可能性が高いと考え、現在これら遺伝子のantisenseなどによる発現抑制実験を進行している。

Minor 児 Acute リ <s:1> パ パ leukemia (ALL)とBH3 only <s:1> is related to に て て て て, t(9; 22)転 locus type であるKOPN30, KOPN55, KOPN57 <s:1> 3-cell line, 11q23転 locus type であるKOCL33, KOCL44, KOCL45, KOCL69, KOPN1 <s:1> 5-cell line, pre-B ALLであるKOPN32 KOPN35, NALM6 <s:1> 3 cell lines を use を て, BH3 only occurrence analysis をRNase Protection AssayとWestern blotting を use て て lines った. BH3 only の う ち, Bad, series, Hrk, Bik の 発 now は い ず れ の cell lines で も low numerical で あ っ た. New rules on anticancer tonic の alternate の a つ で あ る HDAC inhibitor を こ れ ら の cell lines に cast with し た と こ ろ, す み や か に ア ポ ト ー シ ス が induced さ れ た. そ こ で HDAC inhibitor after VCS and の BH3 only legacy 伝 son の 発 now line analytical を っ た と こ ろ, Bad, Bik の mRNA の 発 now が す み や か に rise し た. し か し な が ら protein レ ベ ル で は Bad の 発 now - the は ほ と ん ど み ら れ な か っ た が, Bik protein は HDAC inhibitor で ア ポ ト ー シ ス induced に 発 now が raised し た. After the serum was removed, にKOPN30で showed an increase in がみられた と と similar to であった results であった. After the addition of またHDAC inhibitor, BH3 onlyであるBid <s:1> activation が recognition められた. し か し な が ら, そ の upper で あ る Caspase - 8 の activeness, も し く は TNF - receptor family の 発 now rights は 観 examine さ れ な か っ た. Above に よ り, small where の B - we ALL に お け る serum removed, 薬 tonic to stimulate な ど に よ る ア ポ ト ー シ ス machine sequence の for と し て BH3 only で あ る Bik, Bid の activeness が masato and し て い likely が る い と え test, now こ れ ら heritage 伝 son の antisense な ど に よ る 発 inhibit now be 験 を for し て い る.