Regulation der V-ATPase

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Vakuoläre H+-ATPasen (V-ATPasen, EC 3.6.1.3) stellen eine unter allen Eukaryonten konservierte Klasse elektrogener ProtonenPumpen dar, deren primäre Funktion im Aufbau von Protonen-Gradienten an den Endomembranen liegt. Im Gegensatz zu der weit fortgeschrittenen biochemischen Charakterisierung ist über die in vivo-Funktion der V-ATPasen und über ihre Regulation, vor allem in höheren Eukaryonten, relativ wenig bekannt. Mit der det3 Mutante von Arabidopsis, die eine reduzierte Aktivität der V-ATPase aufweist, bietet sich erstmalig die Möglichkeit einer detaillierten in vivo-Funktionsanalyse der V-ATPasen. Die Charakterisierung der det3 Mutante mittels biochemischer, molekularbiologischer und genetischer Methoden soll daher zu einem besseren Verständnis der Bedeutung der V-ATPasen für die Physiologie und Entwicklung Höherer Pflanzen führen. Insbesondere sollen regulatorische Mechanismen identifiziert werden, welche die Aktivität der V-ATPase steuern. Hierzu sollen auf molekularer Ebene im Two-Hybrid-System identifizierte, direkt mit DET3 interagierende Proteine, auf eine mögliche regulatorische Funktion untersucht werden. Mittels zweier Varianten der Suppressor-Analyse wurden auf genetischem Wege eine Reihe weiterer Regulatoren identifiziert, deren molekulare Charakterisierung bevorsteht.