Molekularer Mechanismus der Erzeugung unterschiedlicher HAIRLESS Proteinformen durch interne Translationsinitiation und ihre Bedeutung für die Entwicklung von Drosophila melanogaster

果蝇的无毛在NOTCH信号通路中起着拮抗剂的作用。组织化学韦尔登检测两种无毛蛋白质（120和150 kDa）。我们已经开始了新的研究，通过内部翻译开始了无毛异构体的研究。无毛基因通常被认为是一个“内部核糖体进入位点”（IRES）。最后一项研究发现，IRES是一种单细胞帽蛋白的合成，也可以通过分裂相进行，在分裂间期进行单细胞帽翻译。IRES在Zellkultur中具有良好的生物相容性，其功能和无毛变体在体内分析中具有良好的生物相容性。Vorversuche ergaben für beide Isoformen eine，allerdings verminderte，wildtypische Aktivität，was dafür spricht，dass beide gleichermaßen - vielleicht als Heterodimere - benötigt韦尔登.珠宝是独一无二的。将Notch-Zielgene复合物应用于Zellkultur和活体韦尔登。因此，只有韦尔登，宝石才是一种表现出的同种型，如果没有特殊的活性，就会出现。除此之外，我们还发现了韦尔登，由于IRES具有遗传性，因此也存在有丝分裂中的小亚型，并且在NOTCH-信号通路中存在正常的无毛功能。

HAIRLESS spielt in Drosophila eine wichtige Rolle als Antagonist im NOTCH-Signalweg. Histochemisch werden zwei HAIRLESS Proteinformen detektiert (120 und 150 kDa). Wir haben starke Hinweise darauf, dass die kürzere HAIRLESS Isoform durch interne Translationsinitiation entsteht. Offenbar besitzt das HAIRLESS Gen im translatierten Bereich eine 'internal ribosome entry site' (IRES). Neueste Arbeiten an Säugergenen lassen vermuten, dass eine IRES eine Cap-unabhängige Proteinsynthese auch während der Mitose erlaubt, neben der Cap-abhängigen Translation in der Interphase. Im geplanten Vorhaben soll die IRES mittels bicistronischer Konstrukte in Zellkultur eindeutig bestätigt werden und die Funktion der beiden HAIRLESS Varianten zudem in vivo analysiert werden. Vorversuche ergaben für beide Isoformen eine, allerdings verminderte, wildtypische Aktivität, was dafür spricht, dass beide gleichermaßen - vielleicht als Heterodimere - benötigt werden. Die jeweilige einzelne bzw. kombinierte Wirkung auf Notch-Zielgene soll in Zellkultur und in vivo untersucht werden. Zudem sollen Tiere erzeugt werden, die jeweils nur eine Isoform exprimieren, wodurch die spezifische Aktivität überprüfbar wird. Weiterhin soll untersucht werden, ob die IRES zellzyklusspezifisch genutzt wird, sich also die kleine Isoform in der Mitose anreichert und welche Bedeutung dies für die normale Funktion von HAIRLESS im NOTCH-Signalweg hat.