小児心疾患におけるカルシウムシグナルの役割

钙信号在小儿心脏病中的作用

• 批准号: 14770368
• 负责人: 中村 公俊
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770368/
• 关键词: calreticulin; カルシウム; トランスジェニックマウス; cre recombinase; 心臓; 発生

Calreticulinは心筋細胞の発生に重要な役割を果たしているカルシウム結合タンパクである。本研究ではcalreticulinの発現レベルを心臓発生の各段階において調節できるトランスジェニックマウスを作成した。まず、Cre-loxPシステムを用いたトランスジーンによる発現調節系を作成した。私が作成したこのトランスジーンは、loxP配列間に存在するストップコドンを持つ。そのloxP配列の5'側にユビキタスなプロモーター、3'側にcalreticulin cDNAをコードしており、calreticulinの過剰発現を抑制している。このトランスジーンを用いて、in vitroでCre recombinaseを発現させることにより、calreticulinの過剰発現を誘導できることを確認した。このトランスジーンを用いて、トランスジェニックマウスを作成した。このトランスジェニックマウスと心臓特異的なCre recombinase発現マウスとの交配を行ない、心臓特異的にcalreticulinが過剰発現しているマウスを作成することに成功した。このマウスは成体において心臓に野生型の約20倍のcalreticulinを発現している。しかもこのマウスは生後6-8週に進行性の徐脈性不整脈を起こして死亡することが明らかになった。一方、私がこれまでに作成したcalreticulin欠損マウスを用いて、この欠損マウスの心臓発生の異常が、細胞質に存在するカルシウム結合タンパクであるcalcineurinにより調節されていることを明らかにした。Calreticulin欠損マウスは、心臓の発生異常により胎生致死である。しかし、calcineurinシグナルが常に活性化しているトランスジェニックマウスとの交配により、calreticulin欠損マウスに活性型calcineurinを発現させた。すると心臓の発生異常を示す表現型が軽減され、出生後も生存しているマウスが出現した。このマウスを用いて心臓以外の組織におけるcalreticulin欠損の影響を確認した。すると低血糖、高脂血症などの代謝異常を起こすことが明らかになった。

Calretinin is important for the development of cardiac muscle cells. In this study, the development of calretinin was studied. The system for the regulation of the occurrence of the disease is established. The system is designed to maintain a high level of connectivity between loxP arrays. The 5'side of the loxP sequence is closely related to calretinol, and the 3' side of the loxP sequence is closely related to calretinol. The expression of Cre recombinase in vitro is confirmed by the expression of calretinin. This is the first time that I've seen you. This transfer was successful when it was discovered by heart-specific NCrerecombinase and mating, and heart-specific Ncalreticulin was unintentionally discovered and completed. The calretinol is about 20 times higher than that of the wild type. 6-8 weeks after birth, the pulse is progressive and irregular. In addition, there is a lack of calcitulin in the production of abnormal cells and cytoplasm, which are combined with calcitulin in the regulation of calcitulin. Calreticulin deficiency, heart failure and abnormal development Calcineurin is usually activated during mating, and calretin-deficient during mating. The phenotype of the heart is reduced, and it appears after birth. The effect of calretinol deficiency on tissue is confirmed. Hypoglycemia, hyperlipidemia, metabolic abnormalities, etc.

项目成果

Okumura K, Nakamura K et al.: "Salivary gland progenitor cells induced by duct ligation differentiate into hepatic and pancreatic lineages"Hepatology. 38. 104-113 (2003)

Okumura K、Nakamura K 等人：“导管结扎诱导的唾液腺祖细胞分化为肝和胰谱系”肝病学。