日本人の健常者におけるチロシナーゼ多型データベースの作成

创建日本健康受试者酪氨酸酶多态性数据库

基本信息

  • 批准号:
    14770403
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.73万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究の目的は日本人の正常人100人に関してチロシナーゼ遺伝子配列のデータベースを構築し、これを公開することで、各研究機関における白皮症診断の際に必要な遺伝子変異の検証の労力を減少させることである。日本人健常者100人を対象にチロシナーゼ遺伝子のエクソン、エクソン周辺及びプロモーターの全配列をダイレクトシーケンス法により決定した。具体的には、まず集めた日本人健常者109人のDNAを用いて、PCRによりチロシナーゼの各エクソン、エクソン近傍及びプロモーター配列をそれぞれ増幅した。この際polymeraseはアニーリングの正確性を期すために、Hot start法が容易にできるABI社のTaqGOLDを使用した。PCR後Millipore社のMultiScreen PCR plateを用いPCR productを精製し、アガロース電気泳動とデジタルカメラによる泳動像の撮影後に、画像解析ソフトSCION IMAGEを用いDNA量を測定した。精製PCR productを鋳型としてBeckman CoulterのDTCS kitを用いてサイクルシーケンス反応を行い、ワットマン社のフィルターユニットに膨潤したSephadexG-50を加えたカラムで精製した後、名古屋大学共通機器センターに設置されているBeckman Coulter社のCEQ2000XLを用いてDNAの配列を解読した。DNAの配列は各々のPCR productごと双方向に解読され、検証が行われた。その後配列アライメント用ソフトClustal Xを用い遺伝子配列の多型の検出を行った。現在これらのデータをまとめ論文を執筆し、提出の準備を進めている最中である。
The purpose of this study was to construct, disclose, and reduce the burden of differential diagnosis of leukaemia among 100 healthy Japanese subjects. Japanese healthy people 100 people to the image of the child's The DNA of 109 Japanese healthy individuals was amplified by PCR and DNA sequencing. This method is easy to use because of the legality of polymerase release. After PCR Millipore's MultiScreen PCR plate was used for PCR product purification, image analysis, and DNA content determination. After purification of PCR product, Beckman Coulter's DTCS kit was used for DNA sequencing and sequencing. Beckman Coulter's CEQ2000XL was used for DNA sequencing and sequencing. DNA sequencing is a two-way PCR product. The following is a list of the types of cluster X that are used for cluster alignment. Now I'm writing a paper, and I'm preparing for it.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
柴田真一, 安江 敬, 他: "Dermoscopyを用いた悪性黒色腫と基底細胞癌の鑑別"日皮会誌. 113. 37-42 (2003)
Shinichi Shibata、Takashi Yasue 等人:“使用皮肤镜检查区分恶性黑色素瘤和基底细胞癌”日本皮肤病学会杂志 113. 37-42 (2003)。
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