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細胞膜損傷の修復に寄与する開口放出の調節機構に関する分子生理学的研究

胞吐作用修复细胞膜损伤调控机制的分子生理学研究

基本信息

批准号：
14780539
负责人：
東郷建
金额：
$ 2.56万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780539/
关键词：
膜修復開口放出遺伝子発現調節 CREB GFP MAPキナーゼ MEK3 6 PKC 非筋型ミオシンイメージング FM1-43 カルシウム

项目摘要

細胞膜損傷の修復には、損傷箇所から流入するカルシウムイオンが誘起する開口放出が必要である。また、細胞膜に繰り返し損傷を与えると2回目の損傷修復は1回目よりも早く、損傷時の開口放出量も多い。この促進反応には転写因子CREBを介した遺伝子発現の調節が必要である。そこで、このCREB依存的な遺伝子発現をモニターする目的で、レポーター遺伝子CRE-d2EGFPを恒常的に発現する細胞を作出し、細胞膜損傷後にd2EGFPの発現量が増大することを確認した。またp38 MAPキナーゼ阻害剤存在下で遺伝子発現が抑制さることを見出した。以上のことを受け、細胞膜損傷後にp38 MAPキナーゼ依存的にCREBがリン酸化されているか、またMAPキナーゼが細胞膜損傷後にリン酸化されて活性化されているかを、抗phospho-CREB抗体や抗phospho-p38抗体を用いたウエスタンブロッティングや蛍光抗体染色によって解析し、実際に細胞膜損傷がp38 MAPキナーゼを活性化し、結果としてCREBを活性化していることを確認した。また、細胞膜損傷からMAPキナーゼの活性化に至る情報伝達系についても検討を加え、p38はMEK3/6によって活性化されること、更にMEK3/6はプロテインキナーゼCによって活性化されることを見出した。

It is necessary for the repair of cell membrane damage and the inflow of damaged cells. The cell membrane is damaged and the damage is repaired. The damage is released early and the amount of damage is increased. The regulation of gene expression is necessary in order to promote the development of gene expression. This study confirms that CREB-dependent gene expression increases after cell membrane damage, while CREB-dependent gene expression increases after cell membrane damage. P38 MAP is not the only way to suppress the occurrence of the virus in the presence of the inhibitor. p38 MAP-dependent CREB is activated after membrane damage, anti-phospho-CREB antibody and anti-phospho-p38 antibody are activated after membrane damage, and p38 MAP-dependent CREB is activated after membrane damage. CREB activation The cell membrane damage, MAP and C activation, information transfer system, p38 and MEK 3/6 activation, and MEK3/6 activation were observed.