Gタンパク制御因子の細胞内分布に依存した神経機能の調節機構
神经元功能的调节机制依赖于 G 蛋白调节因子的细胞内分布
基本信息
- 批准号:03J01938
- 负责人:
- 金额:$ 1.73万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
神経特異的な三量体Gタンパクの制御因子RGS8には選択的スプライシングによって生じるN端部分の異なった2種の分子(RGS8とRGS8S)が存在し、それぞれが異なった受容体系を制御することが示唆されている。この受容体特異的なRGS8の情報伝達制御の分子機構を明らかにするため、相互作用が期待されるムスカリン受容体に注目し、実際にRGS8と相互作用するかどうか検討を行った。まず初めに組み換えタンパクを用いてプルダウン実験を行った。結果、RGS8はM1受容体の第3細胞内(i3)ループと強く結合し、またM3受容体のそれとは弱く結合した。しかしM2受容体のi3ループとは結合しなかった。またRGS8SはRGS8と比較して結合能が弱かった。変異体解析を行うとRGS8のM1受容体結合サイトはN端9残基中に存在し、その中でも8番目と9番目のアルギニン残基が相互作用に重要であった。また、全長のM1受容体とRGS8の相互作用は生細胞中でも観察された。更に受容体結合能を減弱させたRGS8の点変異体はM1受容体からのシグナルを効率的に抑制することが出来なくなった。以上の結果からRGS8はそのN端部分で受容体の第3細胞内ループと直接結合することが明らかとなり、更にこのような相互作用がRGS8の受容体特異的なシグナル伝達制御の分子機構の実体であることが強く示唆された。更に小脳プルキンエ細胞からRGS8を複合体として精製し、生体内でRGS8と相互作用する受容体系を見つけ出す目的で、L7プロモーターを用いてタグ付きのRGS8をプルキンエ細胞に発現するトランスジェニック(Tg)マウスの作製を試みてきた。しかし3年間を通して本研究の目的を満たすような高発現のTgマウスは作製出来なかった。今後、プロモーターの変更やBACを用いる方法、またはタグ付きRGS8を発現するノックインマウスの作製などのストラテジーの変更が必要であると考えられた。
God's special three-dimensional body GタンパクのControl factor RGS8にはselect択's スプライシングによって生じるN-terminal part のdifferent なったTwo kinds of molecules (RGS8 and RGS8S) exist and are different from each other.このReceiver-specific なRGS8 のInformation 伝达control のmolecule mechanism を明らかにするため、Interaction period Waiting for the attention of the されるムスカリン receptor, the interaction of the RGS8 and the するかどうか検question を行った. The first めに group み is replaced by the えタンパクを with the いてプルダウン実験を行った. As a result, RGS8 showed strong binding to the M1 receptor in the third cell (i3) and weak binding to the M3 receptor.しかしM2 receptor のi3ループとは combines しなかった.またRGS8S and はRGS8と are relatively weak in binding energy. Analysis of isoforms showed that the presence of the M1 acceptor-binding residue in the N-terminal 9 of the RGS8 receptor and the interaction of the residues in the 8th and 9th end of the N-terminal are important. The interaction between full-length M1 receptor and RGS8 was observed in raw cells. The binding energy of the receptor is further reduced, and the efficiency of the receptor binding ability of the M1 receptor is weakened. The above results show that the N-terminal part of RGS8 is directly bound to the receptor in the third cell of the third cell, and the N-terminal part is directly bound to the receptor.のようなinteractionがRGS8のreceptor-specific なシグナル伝达controlled molecule mechanism の実体であることが强く时憆された. Updated details of the cell and RGS8 complex and the interaction of RGS8 in vivo and the acceptance system of the target, L 7プロモーターを用いてタグFUきのRGS8をプルキンエcellに発成するトランスジェニック(Tg)マウスのproducedをtrialみてきた.しかし三年を通してThe purpose of this study is を満たすような高発行のTgマウスはproducedなかった. From now on, the プロモーターの変やBACをいる method and the またはタグpayきRGS8を発 are nowするノックインマウスのproducedなどのストラテジーの変 Updated がであると卡えられた.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Molecular cloning and characterization of a new RGS protein of Medaka.
青鳉新 RGS 蛋白的分子克隆和表征。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Itoh;K.Nagatomo;Y.Kubo;Y.Sugimoto;O.Saitoh
- 通讯作者:O.Saitoh
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Differential effects of the Lurcher mutation on the channel activity of human and mouse GluD2 receptors.
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- DOI:
- 发表时间:
2023 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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柚崎 通介
パルミトイル化サイト欠失型AMPA受容体ノックインマウスにおける興奮性神経活動の亢進と発作感受性の上昇 Disruption of AMPA receptor-palmitoylation leads excitatory/inhibitory imbalance and elevated seizure susceptibility
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- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
伊藤 政之;山下 真梨子;山田 大輔;奥野 浩行;阿部 学 ;山崎 真弥;夏目 里恵;金子 雅規;貝塚 利恵;崎村 建司;関口 正幸;和田 圭司;星野 幹雄;三品 昌美;林 崇 - 通讯作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
竹内 絵理;山田 大輔;斎藤 顕宜;伊藤 政之;林 崇;山田 光彦;和田 圭司;関口 正幸 - 通讯作者:
関口 正幸
高頻度チロシリン酸化MAP1Bの神経発生過程における機能解析
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- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
竹内 絵理;山田 大輔;斎藤 顕宜;伊藤 政之;林 崇;山田 光彦;和田 圭司;関口 正幸;伊藤 泰行 - 通讯作者:
伊藤 泰行
Disruption of AMPA receptor-palmitoylation leads excitatory/inhibitory imbalance and elevated seizure susceptibility
AMPA 受体棕榈酰化的破坏导致兴奋/抑制失衡和癫痫易感性升高
- DOI:
- 发表时间:
2017 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
伊藤 政之;山下 真梨子;山田 大輔;奥野 浩行;阿部 学;山崎 真弥;夏目 里恵;金子 雅規;貝塚 利恵;崎村 建司;関口 正幸;和田 司;星野 幹雄;三品 昌美;林 崇 - 通讯作者:
林 崇
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