ホヤ胚の内胚葉細胞分化決定機構の解析

海鞘胚胎内胚层细胞分化的机制分析

• 批准号: 00J03588
• 负责人: 佐藤 薫 (今井 薫)
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J03588/
• 关键词: Bカテキン; ユウレイボヤ; 脊索

私はホヤ胚を研究材料にして、内胚葉分化や中胚葉誘導などをつかさどる一連の遺伝子カスケードを明らかにしたいと考え研究を進めてきた。私はまず、ユウレイボヤの内胚葉分化にはβ-cateninの働きが必須であることを明らかにした、そこで、β-cateninの下流で内胚葉分化や内胚葉から中胚葉への誘導に働く遺伝子を単離する目的で、β-catenin過剰発現胚とcadherin過剰発現胚との間でサブトラクションを行い、計13個のβ-catenin下流遺伝子を同定した。これらの遺伝子はすべて16細胞期から110細胞期までの間に内胚葉を含む植物極側の細胞で発現する。これらのうちのいくつかの遺伝子についてその機能解析を行った。Cs-FoxDはforkheadドメインを持つ転写因子で16および32細胞期の予定内胚葉割球で一過的に発現する。上流解析実験によりCs-FoxDがβ-cateninの直接のターゲット遺伝子であることが分かった。Cs-FoxDの機能をアンチセンスモルフォリノで阻害すると、脊索細胞が全く分化せず、予定脊索細胞は内胚葉細胞へと分化していた。Zinc finger転写因子をコードするCs-ZicLは32細胞期から予定脊索細胞と筋肉割球で発現を始めるが、Cs-ZicLの脊索細胞での発現はCs-FoxDの下流であることも明らかにした。Cs-ZicLの機能阻害実験をすると脊索細胞は分化せず、ホヤ胚の脊索形成のマスター遺伝子であるErachyuryの発現も抑制される。つまり、いままでのところβ-catenin→Cs-FoxD→Cs-ZicL→Brachyury→脊索細胞分化というカスケードが明らかになりつつある。一方、Cs-FGF4/6/9は16細胞期から予定内胚葉と脊索割球で発現し、機能阻害実験はCs-FGF4/6/9は間充織細胞と脊索細胞の部の誘導に必要であることを示している。

Private は ホ ヤ embryo を research materials に し て, germ layer in differentiation や mesoderm induction な ど を つ か さ ど る for の heritage 伝 son カ ス ケ ー ド を Ming ら か に し た い と を え test research into め て き た. Private は ま ず, ユ ウ レ イ ボ ヤ の germ layer differentiation within に は beta catenin の 働 き が must で あ る こ と を Ming ら か に し た, そ こ で, beta - catenin の nasty germ layer differentiation within で や germ layer in か ら mesoderm へ の induced に 働 く posthumous son 伝 を 単 from す る purpose で, beta catenin turning 発 now embryo と cadherin A total of 13 <s:1> β-catenin downstream 伝 offspring を jointly determine a た. こ れ ら の posthumous son 伝 は す べ 16 て cells か ら 110 cells ま で の に between germ layer in を の cell contains む plants extremely side で 発 now す る. The function analysis of the 伝 sub に てそ てそ てそ てそ を を く 伝 うち を てそ を った を 伝 を を った てそ を を を. Cs - FoxD は forkhead ド メ イ ン を hold つ planning write factor で 16 お よ び period の 32 cells within the designated germ layer to cut the ball after で に 発 now す る. Upper-level analytical experiment によ Cs-FoxDがβ-catenin <s:1> direct <s:1> タ ゲット ゲット derivative 伝 である <s:1> とが とが branch った った った Cs - FoxD の function を ア ン チ セ ン ス モ ル フ ォ リ ノ で resistance against す る と, notochord cells が full く せ ず, designated notochord cells within は germ layer へ と differentiation し て い た. Any Zinc finger planning write factor を コ ー ド す る Cs - ZicL は 32 cells period か ら designated notochord cells と brawn to cut the ball で 発 now beginning を め る が, Cs - ZicL の notochord cells で の 発 は Cs - now FoxD の obscene で あ る こ と も Ming ら か に し た. Cs - ZicL の function resistance against be 験 を す る と notochord cells は せ ず, ホ ヤ embryo の notochord form の マ ス タ ー heritage 伝 son で あ る Erachyury の 発 now も inhibit さ れ る. つ ま り, い ま ま で の と こ ろ beta - catenin - Cs - FoxD - Cs - ZicL to Brachyury, notochord cell differentiation と い う カ ス ケ ー ド が Ming ら か に な り つ つ あ る. One party, the Cs - FGF4/6/9 は 16 cells か ら germ layer within designated と notochord cut the ball で 発 し now, the function of resistance be 験 は filling knit cells between Cs - FGF4/6/9 は と の notochord cells induced に の necessary で あ る こ と を shown し て い る.

项目成果

Imai, KS., Satoh, N., Satoh, Y.: "Multiple functions of a Zic-like gene in the differentiation of notochord, central nervous system and muscle in Ciona savignyi embryos"Development. 129. 2723-2732 (2002)

Imai, KS.、Satoh, N.、Satoh, Y.：“Zic 样基因在 Ciona savignyi 胚胎脊索、中枢神经系统和肌肉分化中的多种功能”开发。

Imai, K., Takada, N., Satoh, N., Satoh, Y.: "β-catenin mediates the specification of endoderm cells in ascidian embryos"Development. 127. 3009-3020 (2000)

Imai, K.、Takada, N.、Satoh, N.、Satoh, Y.：“β-连环蛋白介导海鞘胚胎中内胚层细胞的规范”开发。 127. 3009-3020 (2000)

Imai, KS., Satoh, N., Satoh, Y.: "Early embryonic expression of FgF 4/6/9 gene and its role in the induction of mesenchyme and notochord in Ciona savignyi"Development. 129. 1729-1738 (2002)

Imai, KS.、Satoh, N.、Satoh, Y.：“FgF 4/6/9 基因的早期胚胎表达及其在海鞘间充质和脊索诱导中的作用”开发。

Imai, KS., Satoh, N., Satoh, Y.: "An essential role of a Fox D gene in notochord induction in ciona embryos"Development. 129. 3441-3453 (2002)

Imai, KS.、Satoh, N.、Satoh, Y.：“Fox D 基因在海鞘胚胎脊索诱导中的重要作用”开发。