周産期における好中球機能低下に着目した乳房炎発症機構の解明とその制御

牛好中球活性化のシグナル伝達機構の解明と、周産期において好中球機能を修飾する因子の同定およびその作用を明らかにすることを目的として研究を行った。牛好中球において、オプソニン化ザイモザンにより引き起こされたNADPHオキシダーゼの活性化は、protein kinase C(PKC)δ阻害剤であるrottlerinにより約半分に抑制された。しかしながら、この活性化に必須であるp47phoxの膜移行には影響を与えなかった。一方、広域PKC阻害剤であるGF109203XによりNADPHオキシダーゼ活性化およびp47phoxの膜移行は抑制された。同様に、好中球様に分化したHL-60細胞においても、GF109203X、rottlerin共にNADPHオキシダーゼの活性化を抑制するものの、p47phoxのリン酸化はrottlerinでは抑制されなかった。これはPKCがアイソフォームごとに異なるシグナル経路を介してNADPHオキシダーゼを制御していることを示唆している。次に、好中球機能修飾因子の探索の結果、好中球への分化時に見られるNADPHオキシダーゼコンポーネントの発現増加が、トランスフェリンおよびラクトフェリンにより抑制されることを見出した。牛ラクトフェリンは乳汁中に含まれ、乳房での免疫能に影響を与えている可能性が示唆されたため、炎症性サイトカイン誘導に対するラクトフェリンの効果を検討した。ラット単球/マクロファージ由来RAW264細胞をLPS刺激することにより誘導されるIFN-γとIL-1βのmRNAは、ラクトフェリン処理により強く抑制された。したがって、ラクトフェリンは乳房における炎症の制御に関与していることが示唆された。また、炎症における一酸化窒素(NO)の関与はよく知られるところであり、その生成酵素であるNO合成酵素(NOS)の活性化および発現調節機構について新たな知見を得るため、p66shcというタンパク質によるNOS調節機構について現在検討を行っている。この研究の一部は、2004年4月12日〜2005年1月22日の期間、米国Johns Hopkins大学において行われた。

牛好中球活性化のシグナル伝達機構の解明と、周産期において好中球機能を修飾する因子の同定およびその作用を明らかにすることを目的として研究を行った。牛好中球において、オプソニン化ザイモザンにより引き起こされたNADPHオキシダーゼの活性化は、protein kinase C(PKC)δ阻害剤であるrottlerinにより約半分に抑制された。しかしながら、この活性化に必須であるp47phoxの膜移行には影響を与えなかった。一方、広域PKC阻害剤であるGF109203XによりNADPHオキシダーゼ活性化およびp47phoxの膜移行は抑制された。同様に、好中球様に分化したHL-60細胞においても、GF109203X、rottlerin共にNADPHオキシダーゼの活性化を抑制するものの、p47phoxのリン酸化はrottlerinでは抑制されなかった。これはPKCがアイソフォームごとに異なるシグナル経路を介してNADPHオキシダーゼを制御していることを示唆している。次に、好中球機能修飾因子の探索の結果、好中球への分化時に見られるNADPHオキシダーゼコンポーネントの発現増加が、トランスフェリンおよびラクトフェリンにより抑制されることを見出した。牛ラクトフェリンは乳汁中に含まれ、乳房での免疫能に影響を与えている可能性が示唆されたため、炎症性サイトカイン誘導に対するラクトフェリンの効果を検討した。ラット単球/マクロファージ由来RAW264細胞をLPS刺激することにより誘導されるIFN-γとIL-1βのmRNAは、ラクトフェリン処理により強く抑制された。したがって、ラクトフェリンは乳房における炎症の制御に関与していることが示唆された。また、炎症における一酸化窒素(NO)の関与はよく知られるところであり、その生成酵素であるNO合成酵素(NOS)の活性化および発現調節機構について新たな知見を得るため、p66shcというタンパク質によるNOS調節機構について現在検討を行っている。この研究の一部は、2004年4月12日〜2005年1月22日の期間、米国Johns Hopkins大学において行われた。