CaMKII導入によるシナプス可塑性の構築

通过引入CaMKII建立突触可塑性

• 批准号: 03J50161
• 负责人: 木村 昌弘
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J50161/
• 关键词: 可塑性; Calyx of Held; CaMKII; シナプス

(A) 通常状態でのCalyx-MNTBシナプスにおけるCaMKII分子の発現と機能確認(1)MNTB領域における・CaMKII、・CaMKIIのタンパク発現量が海馬の1%以下であることをwestern法によって定量化し確認。これにより通常な状態ではCaMKII分子によるシナプス伝達効率の効果はないと判断した。(2)Calyx-MNTBシナプス入力をLTPまたはLTDの誘発プロトコールで刺激してもLTP、LTDのいずれも誘発されないことを確認した。興奮性後細胞シナプス電流はLTPまたはLTDの誘発プロトコール刺激前後での変化を見せず、Calyx-MNTBシナプスは通常、海馬などで見られるLTPまたはLTDの誘発プロトコールでは可塑性の発現がないと判断した。(B)CaMKIIのシナプス部への強制導入(1)シナプス後細胞への導入活性型CaMKII をMNTB 細胞内に注入し、低頻度刺激時におけるEPSCの振幅に変化が生じるか否かを測定した。LTPまたはLTDなどの可塑性は観察されなかった。(2)シナプス後細胞強制導入時における頻回刺激100Hzの高頻度刺激を与え、シナプス後細胞を電位固定することで興奮性後細胞シナプス電流の観察を行った。結果、興奮性後細胞シナプス電流はLTPまたはLTDの誘発プロトコール刺激前後での変化を見せる場合と見せない場合があることがわかった。(C)シナプス部への強制導入の成果シナプス前細胞へCaMKiiを強制導入できる特殊電極システムを開発した結果、化合物(BAPTAなど)をはじめとした強制導入に成功している。この強制導入システム開発の途中でカルレチニンと呼ばれるCaMKIIと比較してやや低分子なタンパク質の導入に成功した。現在カルレチニンの機能について精査し論文の投稿準備をしている。またCaMKIIはその分子の大きさによって外部からの強制導入に成功しなかった。

(A) usually state で の Calyx - MNTB シ ナ プ ス に お け る CaMKII molecular の 発 now confirmed that (1) MNTB と function areas に お け る CaMKII, · CaMKII の タ ン パ ク 発 now が hippocampal の 1% the following で あ る こ と を western law に よ っ て quantitative し confirmation. The usual な state で で CaMKII molecule によるシナプス伝 effect rate <s:1> effect result と な と と と is used to determine the た. (2) Calyx - MNTB シ ナ プ ス を into force LTP ま た は LTD の 発 lure プ ロ ト コ ー ル で stimulus し て も LTP and LTD の い ず れ も 発 lure さ れ な い こ と を confirm し た. Excitatory cells after シ ナ プ ス current は LTP ま た は LTD の 発 lure プ ロ ト コ ー ル before and after stimulation で の variations change を see せ ず, Calyx MNTB シ ナ プ ス は usually, haima な ど で see ら れ る LTP ま た は LTD の 発 lure プ ロ ト コ ー ル で は plasticity の 発 now が な い と judgment し た. (B) CaMKII の シ ナ プ ス department へ の forced into (1) シ ナ プ ス cells after へ の import activity type CaMKII を に MNTB cell injection し, low frequency stimulation に お け る EPSC amplitude に の variations change が raw じ る か no か を determination し た. LTPまた な LTDな な <s:1> <s:1> plasticity <s:1> 観 examination されな されな った った. (2) シ ナ プ ス cells after mandatory import に お け る frequency back to stimulate 100 hz の high frequency stimulation を え, シ ナ プ ス を potential after fixed す る こ と で excitatory cells after シ ナ プ ス current の 観 examine を line っ た. Results, after the excitatory cells シ ナ プ ス current は LTP ま た は LTD の 発 lure プ ロ ト コ ー ル before and after stimulation で の variations change を see せ る occasions と see せ な い occasions が あ る こ と が わ か っ た. (C) シ ナ プ ス department へ の mandatory import の results シ ナ プ ス cells before へ CaMKii を mandatory import で き る special electrode シ ス テ ム を open 発 し た results, compounds (BAPTA な ど) を は じ め と し た mandatory import に successful し て い る. こ の mandatory import シ ス テ ム open 発 の way で カ ル レ チ ニ ン と shout ば れ る CaMKII と compare し て や や low molecular な タ ン パ ク qualitative の import に successful し た. Now, カ レチニ レチニ <e:1> <s:1> <s:1> functions に る て て て carefully check <s:1> papers <e:1> submission preparation を て て る る る. Youdaoplaceholder0 CaMKII そ そ <s:1> molecule <s:1> large さによって さによって external ら ら ら forced import に successful な な った った.

项目成果

Kimura M., Saitoh N., Takahashi T.: "Adenosine A_1 receptor-mediated presynaptic inhibition at the calyx of Held of immature rats"J Physiol.. 553. 415-426 (2003)

Kimura M.、Saitoh N.、Takahashi T.：“腺苷 A_1 受体介导的未成熟大鼠 Held 萼处的突触前抑制”J Physiol.. 553. 415-426 (2003)

Adenosine A1 receptor-mediated presynaptic inhibition at the calyx of Held of immature rats

• DOI: 10.1113/jphysiol.2003.048371
• 发表时间: 2003-12-01
• 期刊: JOURNAL OF PHYSIOLOGY-LONDON
• 影响因子: 5.5
• 作者: Kimura, M;Saitoh, N;Takahashi, T
• 通讯作者: Takahashi, T