受容体欠損マウスを用いた虚血-再灌流障害におけるプロスタグランジンE_2の役割解明

使用受体缺陷小鼠阐明前列腺素 E_2 在缺血再灌注损伤中的作用

基本信息

批准号：
15790374
负责人：
結城幸一
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、虚血-再灌流障害におけるプロスタグランジン(PG)E_2の役割を受容体欠損マウスを用いて解明することであった。本研究によって、以下のことが明らかになった。虚血-再灌流障害のモデルを用い、in vivoとex vivoの実験を行った。in vivoの実験では、マウスの左冠動脈前下行枝を1時間結紮し、その後、24時間再灌流を行い、梗塞サイズを測定した。この結果、心筋梗塞サイズは、野生型と比較してPGE_2受容体の一つであるEP_4の欠損マウスにおいて著しい増加を認めた。つまり、心筋の虚血-再灌流障害に対して内因性PGE_2は、EP_4を介して心筋保護に働くことを初めて明らかにした。ex vivoの実験では、摘出灌流心への灌流液の供給を遮断し、その後再灌流を行い、心機能の変化を解析した。その結果、野生型マウスに比較し、EP_4欠損マウスでは、再灌流時のdeveloped tensionの回復が抑制され、CK遊出量は高値を示した。つまり、内因性PGE_2の心筋保護作用には、EP_4を介した心臓への直接作用も含まれていることが初めて明らかとなった。さらに、野生型マウスに対し、虚血前、あるいは虚血中に選択的EP_4アゴニストを投与し、その後再灌流を行い、24時間後に心臓の梗塞サイズを解析した。その結果、虚血前、虚血中のいずれの投与においても、EP_4アゴニストは梗塞サイズの有意な低下を引き起こした。この効果は、EP_4欠損マウスにおいて完全に消失した。よって、外因性に投与したEP_4アゴニストは、EP_4を介して虚血心筋保護に働くことを初めて明らかにした。また、EP_3欠損マウスについても解析を行った結果、内因性PGE_2がEP_3を介した心臓保護作用も有することが明らかとなった。

这项研究的目的是阐明前列腺素（PG）E_2在使用受体缺陷型小鼠缺血 - 再灌注损伤中的作用。这项研究揭示了以下内容：使用缺血 - 再灌注损伤的模型进行体内和离体实验。在体内实验中，将小鼠连接1小时，然后再进行再灌注24小时，并测量梗塞大小。结果，与野生型相比，缺乏PGE_2受体之一的EP_4中，心肌梗塞大小显着增加。换句话说，首次揭示了内源性PGE_2通过EP_4起作用的心肌保护抗性 - 再灌注损伤。在离体实验中，对切除的灌注心脏的灌注供应被阻断，然后再灌注，并分析了心脏功能的变化。结果，与野生型小鼠相比，在EP_4缺陷型小鼠中抑制了在再灌注过程中发育的张力的恢复，并且CK流速很高。换句话说，首次揭示了内源性PGE_2的心肌保护作用还包括通过EP_4对心脏的直接影响。此外，在缺血之前或期间，对野生型小鼠进行选择性EP_4激动剂，然后再灌注，并在24小时后分析心脏梗塞大小。结果，EP_4激动剂导致缺血前或缺血期间的梗塞大小显着降低。在EP_4缺陷型小鼠中完全消除了这种效果。因此，首次通过EP_4首次揭示了外源施用的EP_4激动剂作为缺血性心肌保护。此外，对EP_3缺乏小鼠的分析表明，内源性PGE_2还通过EP_3具有心脏保护作用。