細菌性肺炎におけるToll-like receptorの関与

Toll样受体参与细菌性肺炎

• 批准号: 15790418
• 负责人: 山田 稚子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790418/
• 关键词: TLR 4遺伝子変異; 急性肺損傷; ペプチドグリカン; エンドトキシン; 肺内シグナル伝達; KC; CXCL10; NF-κB; Toll like receptor 4; C3H; HeJマウス; CD14

【目的】これまでにToll-like receptor 4(TLR4)遺伝子変異を有するマウスで、グラム陰性桿菌の細胞膜成分である大腸菌エンドトキシン(LPS)急性肺損傷が減弱することを報告した。今回、グラム陽性球菌である黄色ブドウ球菌由来のペプチドグリカン(PGN)を気道内に投与し、その後の炎症機転、肺内シグナル伝達にTLR4遺伝子変異が及ぼす影響を比較検討した。【方法】TLR4遺伝子変異を有するマウスC3H/HeJ(J)と野生型のC3H/HeN(N)を用い、LPS(100μg)またはPGN(30μg)を気管内投与した。6時間後に気管支肺胞洗浄(BAL)を施行した。BAL液中の総細胞数、好中球分画を測定し、また上清中のKC、CXCL10などの各種ケモカイン濃度をELISA法で測定した。また気管内投与3時間後に摘出した肺から核蛋白を抽出し、ゲルシフトアッセイ法によりNF-κB、STATの活性化を評価した。【結果】LPS投与後にNではBAL液中の総細胞数、好中球分画の有意な増加が見られたが、JではNと比較して有意に減少していた。PGN投与後にはBAL液中の総細胞数、好中球分画の有意な増加が見られ、両系統の間に差はなかった。またBAL液中のCXCL10はNにLPSを投与した場合にのみ、著明に上昇した。KCについても、LPS投与後JはNと比較して低値を示した。LPS投与後のNF-κBの活性はNで有意に上昇したが、JではNと比較して有意に抑制されていた。PGN投与後のNF-κB活性化には両系統で差がなかった。STATはLPS、PGNの投与後に活性化されたが、マウスの系統による差はなかった。【結論】TLR4遺伝子変異によりLPS投与後の肺内シグナル伝達が抑制されたが、PGNへの反応には差がなかった。菌体成分への生体反応の差にCXCL10などのケモカインが関与している可能性が示唆された。

[Objective] To investigate the effects of Toll-like receptor 4(TLR4) gene expression on the cell membrane composition of E. coli (LPS) in patients with acute lung injury (ALI). This paper compares the effects of TLR4 gene diversity on the pathogenesis, inflammatory mechanisms and lung infection of PGN and PGN. [Methods] TLR4 gene variants were found in C3H/HeJ(J), wild-type C3H/HeN(N), LPS(100μg) and PGN(30μg). 6 hours later, bronchial lavage (BAL) was performed. The total cell count and albumin concentration in BAL fluid were determined, and the concentrations of KC and CXCL10 in supernatant were determined by ELISA. 3 hours after the injection, nuclear protein was extracted from the lung, and the activation of NF-κB and STAT was evaluated by the method. [Results] After LPS administration, the total number of cells in BAL fluid increased significantly, while the total number of cells in BAL fluid decreased significantly. After PGN administration, the total number of cells in BAL fluid, the number of cells in BAL fluid, and the number of cells in BAL fluid increased intentionally. CXCL10 in BAL solution rises when LPS is injected KC The activity of NF-κB was increased intentionally and inhibited intentionally after LPS administration. NF-κB activation after PGN administration STAT LPS, PGN and post-activation [Conclusion] TLR4 gene expression is different from LPS and PGN gene expression is different from LPS. CXCL10 is the difference between biological reaction and biological reaction.