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p53遺伝子導入を併用した悪性グリオーマの集学的治療

利用 p53 基因转移治疗恶性胶质瘤的多学科治疗

基本信息

批准号：
15790771
负责人：
庄野禎久
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度の研究でWild-type-p53発現アデノウイルス導入後どのタイミングで放射線治療、化学療法を施行するのが最も効果的かをin vivoで検討した。その結果、放射線照射や細胞周期非特異的に作用する抗癌剤(シスプラチンやBCNU)は遺伝子導入後、強制発現させたp53がピークに達する時期(48時間後)に行う方法が最も有効であった。一方、細胞周期特異的に作用するトポイソメラーゼI阻害剤(SN-38)ではp53遺伝子を導入前に薬剤を投与した方が、遺伝子導入後に投与するよりも細胞のアポトーシスを誘導した(論文準備中)。本年度はこのin vitroの結果が小動物を用いたin vivoの系でも再現できるかを検討した。さらにその機序を解明する目的で、強制発現されたp53遺伝子のセリン残基のリン酸化の詳細な検討を行った。昨年度の研究でセリン15、20、46のリン酸化が細胞アポトーシス誘導効果に比例することがわかっていたので、当初はこれらセリン残基をアラニンに変えたプラスミドを用いて、セリン残基のリン酸化を阻害することで、アポトーシス誘導効果が抑制されるかを検討した。しかしp53遺伝子の導入効率が悪いこともあり、有意な結果が得られなかった。そこでp53遺伝子のスレオニン18とセリン20をアスパラギン酸に変えたアデノウイルスおよびセリン15とセリン20をアスパラギン酸に変えたウイルスを使い、細胞のアポトーシス誘導効果を検討した。セリン残基をアスパラギン酸に変えることで、リン酸化したセリン残基を模倣した状態が作れるためである。その結果どちらのウイルスもWild-type-p53発現アデノウイルスよりも強力に、細胞のアポトーシスを誘導できるようになった。現在、これらのMutant-p53を遺伝子導入された場合に発現が誘導される遺伝子をmRNAレベルで解析中である。

Last year's study found that Wild-type-p53 was the most effective in vivo after introduction of radiation therapy and chemotherapy. As a result, radiation irradiation and cell cycle non-specific effects of anticancer agents (such as BCNU) were most effective after introduction of the gene and during the period (48 hours later) when stress appeared. A cell cycle specific inhibitor (SN-38) is used to induce cell cycle changes before and after p53 gene introduction (thesis preparation). This year's results in vitro use of small animals in vivo are discussed. A detailed analysis of the molecular structure of the p53 gene and its residues was carried out. In the previous year's study, the ratio of protein acidification to cell-derived protein induction effect was studied. In the beginning, the ratio of protein acidification to cell-derived protein induction effect was studied. The introduction rate of the p53 gene is different from that of the original gene. The p53 gene has been identified as the 18th and 20th genes, and the cell has been identified as the 15th and 20th genes. The residue of the acid is not removed. The result is that the Wild-type-p53 is found to be the most powerful, cellular, and inductive. Now, the Mutant-p53 gene was introduced into the gene expression system, and the gene expression system was analyzed.