LCMとcDNAマイクロアレイ手法を用いた肝臓幹細胞と肝癌細胞の遺伝子発現

使用 LCM 和 cDNA 微阵列技术研究肝干细胞和肝癌细胞中的基因表达

基本信息

  • 批准号:
    04F04226
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.77万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

肝臓には胆管と肝細胞の二方向に分化できる肝臓幹細胞が存在しており、当教室ではすでにウィルソン病モデルラットから肝臓前駆細胞である「卵形細胞(oval cell)」や健常ラットから「肝臓幹様細胞(HSLC)」の樹立化に成功した。3'-Me-DABで誘発した肝がん発生過程において、正常・前がん病変・がん部組織をレーザーマイクロダイセクション法にて細胞を採取し、包括的な遺伝子発現変異を解析した。F344ラット肝化学発癌過程におけるGST-P陽性病巣と胆管線維症病変部において、p53 mRNAの発現量がまずはじめに増加し、経時的に徐々に減少した。逆に、p53遺伝子の変異率は経時的に上昇した。一方、p53の蛋白質の蓄積は肝化学発癌過程後期に認められた。LightCycler RT-PCR法によるmRNA発現の定量結果から、GST-Pは初期の前癌病変のマーカーとして有効であることを確認した。肝癌のマーカーであるAFPは、3'-Me-DAB誘発F344ラット肝発癌過程における増殖病変、胆管線維症で強く発現していたことから、胆管線維症は癌化と関係があると考えられた。アルブミンmRNAの発現量は初期の前癌病変でも明らかな減少を認めた。以上、発癌に長期間を要すること、前癌病変が存在することなどから遺伝子変化は一挙におこるのではなく、正常組織から前癌病変を経て癌に進行していく多段階過程で次第に蓄積すると考えられた。肝癌では前癌病変、初期肝癌、進行肝癌といった多段階の発癌過程において遺伝子の異常が注目されている。本研究では肝化学発癌過程における前癌病変の遺伝子の異常を解明するため、3'-Me-DABによるF344ラット化学肝発癌モデルを利用し、p53遺伝子の異常と肝腫瘍マーカーGST-P、AFPおよび肝臓特異的蛋白Albumin遺伝子mRNA発現量と蛋白質の変化を分析した。
Routine liver に は bile duct と liver cells の two direction に で き る routine liver stem cells exist が し て お り, when the classroom で は す で に ウ ィ ル ソ ン disease モ デ ル ラ ッ ト か ら 駆 before a routine liver cells で あ る "oval cells (oval cell)" や health often ラ ッ ト か ら "liver cell (HSLC) viscera do others" の set the に successful し た. 3 '- Me - DAB で 発 lure し た liver が ん 発 birth process に お い て, normal before が ん disease - · が ん department organization を レ ー ザ ー マ イ ク ロ ダ イ セ ク シ ョ ン method に を て cells take し, including な of 伝 発 son now - different analytical し を た. Chemical 発 F344 ラ ッ ト liver carcinoma process に お け る GST -p positive disease 巣 と bile duct line d disorder disease - department に お い て, p53 mRNA の 発 now quantity が ま ず は じ め に raised plus し, 経 に xu 々 に reduce し た. The <s:1> variation rate of the 伝 offspring of に and p53 increases に over time た た. In the later stage of the liver chemogenic carcinogenesis process, に is identified as められた due to the accumulation of p53 <s:1> protein <e:1>. LightCycler rt-pcr method に よ る mRNA 発 quantitative result is の か ら, GST -p は の early before cancer - の マ ー カ ー と し て have sharper で あ る こ と を confirm し た. Liver cancer の マ ー カ ー で あ る AFP は, 3 '- Me - DAB 発 lure F344 ラ ッ ト 発 liver carcinoma process に お け る raised colonization disease - strong, bile duct line d で く 発 now し て い た こ と か ら, bile duct line d は canceration と masato is が あ る と exam え ら れ た. Youdaoplaceholder0, ブ, <s:1>, <s:1>, the amount of mRNA <s:1> in the early stage で, the precancerous lesion で, the ら, ら, な, and the を recognized めた. Above, 発 carcinoma between に long-term を to す る こ と, before the cancer - が exist す る こ と な ど か ら heritage 伝 sub - turn a 挙 は に お こ る の で は な く, normal tissue か ら before cancer - を 経 て cell に し て い く で Duan Jie process more time に accumulation す る と exam え ら れ た. Liver cancer で は variations, early liver cancer and liver cancer before cancer と い っ た more Duan Jie の 発 carcinoma process に お い て heritage 伝 child abnormal の が attention さ れ て い る. This study で は chemical 発 liver carcinoma process に お け る before cancer - の heritage 伝 child abnormal の を interpret す る た め, 3 '- Me - DAB に よ る F344 ラ ッ ト chemical 発 liver carcinoma モ デ ル を using し, p53, but 伝 の abnormal と liver abscess were swollen マ ー カ ー GST - P, AFP お よ び routine liver specific protein Albumin of 伝 son mRNA 発 quantity now Youdaoplaceholder0 protein <s:1> transformation を analysis た た.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Roles of forkhead transcription factor Foxc2 (MFH-1) and endothelin receptor A in cardiovascular morphogenesis
  • DOI:
    10.1016/j.cardiores.2004.10.017
  • 发表时间:
    2005-02-15
  • 期刊:
  • 影响因子:
    10.8
  • 作者:
    Kanzaki-Kato, N;Tamakoshi, T;Miura, N
  • 通讯作者:
    Miura, N
Restoration of copper metabolism and rescue of hepatic abnormalities in LEC rats, an animal model of Wilson's disease, by expression of human ATP7B gene
通过表达人 ATP7B 基因恢复 LEC 大鼠(威尔逊病动物模型)中的铜代谢并挽救肝脏异常
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.
  • 通讯作者:
    Yan M.Y.et al.
The Wilson disease protein ATP7B resides in the late endosomes with rab7 and the Niemann-Pick C1 protein
  • DOI:
    10.1016/s0002-9440(10)62272-9
  • 发表时间:
    2005-02-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    6
  • 作者:
    Harada, M;Masaru, H;Sata, M
  • 通讯作者:
    Sata, M
Enhanced proliferation of hepatic progenitor cells in rats after portal branch occlusion
大鼠门静脉支闭塞后肝祖细胞增殖增强
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.;Ise N.et al.
  • 通讯作者:
    Ise N.et al.
A hypothermic-temperature-sensitive gene silencing by the mammalian RNAi
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  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 0.77万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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