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LCMとcDNAマイクロアレイ手法を用いた肝臓幹細胞と肝癌細胞の遺伝子発現

使用 LCM 和 cDNA 微阵列技术研究肝干细胞和肝癌细胞中的基因表达

基本信息

批准号：
04F04226
负责人：
杉山俊博
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04226/
关键词：
肝細胞 p53 卵形細胞肝臓幹様細胞 HSLC レーザーマイクロダイセクション法

项目摘要

肝臓には胆管と肝細胞の二方向に分化できる肝臓幹細胞が存在しており、当教室ではすでにウィルソン病モデルラットから肝臓前駆細胞である「卵形細胞(oval cell)」や健常ラットから「肝臓幹様細胞(HSLC)」の樹立化に成功した。3'-Me-DABで誘発した肝がん発生過程において、正常・前がん病変・がん部組織をレーザーマイクロダイセクション法にて細胞を採取し、包括的な遺伝子発現変異を解析した。F344ラット肝化学発癌過程におけるGST-P陽性病巣と胆管線維症病変部において、p53 mRNAの発現量がまずはじめに増加し、経時的に徐々に減少した。逆に、p53遺伝子の変異率は経時的に上昇した。一方、p53の蛋白質の蓄積は肝化学発癌過程後期に認められた。LightCycler RT-PCR法によるmRNA発現の定量結果から、GST-Pは初期の前癌病変のマーカーとして有効であることを確認した。肝癌のマーカーであるAFPは、3'-Me-DAB誘発F344ラット肝発癌過程における増殖病変、胆管線維症で強く発現していたことから、胆管線維症は癌化と関係があると考えられた。アルブミンmRNAの発現量は初期の前癌病変でも明らかな減少を認めた。以上、発癌に長期間を要すること、前癌病変が存在することなどから遺伝子変化は一挙におこるのではなく、正常組織から前癌病変を経て癌に進行していく多段階過程で次第に蓄積すると考えられた。肝癌では前癌病変、初期肝癌、進行肝癌といった多段階の発癌過程において遺伝子の異常が注目されている。本研究では肝化学発癌過程における前癌病変の遺伝子の異常を解明するため、3'-Me-DABによるF344ラット化学肝発癌モデルを利用し、p53遺伝子の異常と肝腫瘍マーカーGST-P、AFPおよび肝臓特異的蛋白Albumin遺伝子mRNA発現量と蛋白質の変化を分析した。

The bile ducts and hepatocytes of the liver are differentiated in two directions and the stem cells of the liver are present and the classroom is open Oval cells of the liver cell)" and the successful establishment of "liver stem cell (HSLC)" by Ken Tsunehata. 3'-Me-DAB is used to treat liver disease, liver disease, normal development, normal disease, and internal tissue.レーザーマイクロダイセクション法にてcellをadoptedし、な伝子発 appear to be different and analyzedした. F344 liver chemical cancer process, GST-P positive disease, bile duct dimensional disease, p53 The amount of mRNA is increasing, and the amount of mRNA is decreasing. The reverse rate of p53 is the rising rate of the change. On the one hand, the accumulation of p53 protein can lead to the recognition of late stages of liver cancer and cancer. The LightCycler RT-PCR method has confirmed the quantitative results of mRNA detection, and the effectiveness of GST-P has been confirmed for early stage precancerous disease. Hepatocellular carcinoma, AFP, 3'-Me-DAB induced F344 liver cancer, liver cancer process, growth Reproductive disease, bile duct duct fibrosis, and biliary tract fibrosis are all related to cancer and are related to each other. The amount of アルブミンmRNA is present and the early stage of pre-cancerous disease is recognized and reduced. Above, the long-term maintenance of cancer is a long-term problem, and the existence of pre-cancerous disease is not a problem.はなく、Normal tissue からPre-cancerous disease 変を経てCancer にProcessing していくMulti-stage process でSecond にAccumulation するとtest えられた. Liver cancer is a pre-cancerous disease, early-stage liver cancer, and liver cancer is a multi-stage cancer process. In this study, the process of liver chemical hepatocarcinoma and the abnormality of precancer disease were explained and 3'-Me-DAB was used to analyze the chemical liver cancer process. , abnormality of p53 gene and hepatic tumor infection, GST-P, AFP, hepatic-specific protein, Albumin gene, mRNA expression and protein change analysis.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Roles of forkhead transcription factor Foxc2 (MFH-1) and endothelin receptor A in cardiovascular morphogenesis

DOI：
10.1016/j.cardiores.2004.10.017
发表时间：
2005-02-15
期刊：
CARDIOVASCULAR RESEARCH
影响因子：
10.8
作者：
Kanzaki-Kato, N;Tamakoshi, T;Miura, N
通讯作者：
Miura, N

Restoration of copper metabolism and rescue of hepatic abnormalities in LEC rats, an animal model of Wilson's disease, by expression of human ATP7B gene

通过表达人 ATP7B 基因恢复 LEC 大鼠（威尔逊病动物模型）中的铜代谢并挽救肝脏异常

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochim.Biophys.Acta 1690
影响因子：
0
作者：
Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.
通讯作者：
Yan M.Y.et al.

The Wilson disease protein ATP7B resides in the late endosomes with rab7 and the Niemann-Pick C1 protein

DOI：
10.1016/s0002-9440(10)62272-9
发表时间：
2005-02-01
期刊：
AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
影响因子：
6
作者：
Harada, M;Masaru, H;Sata, M
通讯作者：
Sata, M

Enhanced proliferation of hepatic progenitor cells in rats after portal branch occlusion

大鼠门静脉支闭塞后肝祖细胞增殖增强

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Liver Transpl. 10
影响因子：
0
作者：
Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.;Ise N.et al.
通讯作者：
Ise N.et al.

Prognostic value of the Cu-transporting ATPase in ovarian carcinoma patients receiving cisplatin-based chemotherapy