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LCMとcDNAマイクロアレイ手法を用いた肝臓幹細胞と肝癌細胞の遺伝子発現

使用 LCM 和 cDNA 微阵列技术研究肝干细胞和肝癌细胞中的基因表达

基本信息

批准号：
04F04226
负责人：
杉山俊博
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04226/
关键词：
肝細胞 p53 卵形細胞肝臓幹様細胞 HSLC レーザーマイクロダイセクション法

项目摘要

肝臓には胆管と肝細胞の二方向に分化できる肝臓幹細胞が存在しており、当教室ではすでにウィルソン病モデルラットから肝臓前駆細胞である「卵形細胞(oval cell)」や健常ラットから「肝臓幹様細胞(HSLC)」の樹立化に成功した。3'-Me-DABで誘発した肝がん発生過程において、正常・前がん病変・がん部組織をレーザーマイクロダイセクション法にて細胞を採取し、包括的な遺伝子発現変異を解析した。F344ラット肝化学発癌過程におけるGST-P陽性病巣と胆管線維症病変部において、p53 mRNAの発現量がまずはじめに増加し、経時的に徐々に減少した。逆に、p53遺伝子の変異率は経時的に上昇した。一方、p53の蛋白質の蓄積は肝化学発癌過程後期に認められた。LightCycler RT-PCR法によるmRNA発現の定量結果から、GST-Pは初期の前癌病変のマーカーとして有効であることを確認した。肝癌のマーカーであるAFPは、3'-Me-DAB誘発F344ラット肝発癌過程における増殖病変、胆管線維症で強く発現していたことから、胆管線維症は癌化と関係があると考えられた。アルブミンmRNAの発現量は初期の前癌病変でも明らかな減少を認めた。以上、発癌に長期間を要すること、前癌病変が存在することなどから遺伝子変化は一挙におこるのではなく、正常組織から前癌病変を経て癌に進行していく多段階過程で次第に蓄積すると考えられた。肝癌では前癌病変、初期肝癌、進行肝癌といった多段階の発癌過程において遺伝子の異常が注目されている。本研究では肝化学発癌過程における前癌病変の遺伝子の異常を解明するため、3'-Me-DABによるF344ラット化学肝発癌モデルを利用し、p53遺伝子の異常と肝腫瘍マーカーGST-P、AFPおよび肝臓特異的蛋白Albumin遺伝子mRNA発現量と蛋白質の変化を分析した。

In the two-way differentiation of the liver, the bile duct and the liver, there is a cell in the liver. When the classroom is divided into two directions, the liver is divided into two directions. In 3'-Me-DAB, the whole process of pregnancy is complicated, and the tissue of normal pre-eclampsia is analyzed by the method of cell acquisition, including the analysis of the data. F344 during the course of liver chemical cancer, GST-P, biliary tract disease, biliary tract maintenance disease, p53 and mRNA, the number of patients increased significantly, and the number of chronic diseases decreased. The upside-down response rate of p53 gene was higher than that of normal control. On the one hand, the expression of p53 protein is responsible for the late stage of liver chemical cancer. LightCycler RT-PCR method was used to detect the quantitative results of mRNA and the early stage of GST-P. Pre-cancerous diseases were detected and confirmed. AFP, 3'-Me-DAB, F344, AFP, F344, F344. In the early stage of the disease, the precancerous disease was detected in the mRNA. The above, the long-term development of cancer, the presence of precancerous lesions, the presence of precancerous lesions, and the progression of precancerous and precancerous cancers in normal tissues. Pre-primary liver cancer, early liver cancer, multi-stage liver cancer, early liver cancer, liver cancer, early liver cancer, multi-stage liver cancer, early liver cancer, and multi-stage liver cancer. The purpose of this study is to investigate the process of liver cancer in the process of liver chemotherapy. in this study, the process of liver cancer was studied in this study. in this study, we used 3'-Me-DAB, F344, p53, p53, Albumin, mRNA, and mRNA, which are specific proteins in the liver, to analyze the protein of liver cancer.

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Roles of forkhead transcription factor Foxc2 (MFH-1) and endothelin receptor A in cardiovascular morphogenesis

DOI：
10.1016/j.cardiores.2004.10.017
发表时间：
2005-02-15
期刊：
CARDIOVASCULAR RESEARCH
影响因子：
10.8
作者：
Kanzaki-Kato, N;Tamakoshi, T;Miura, N
通讯作者：
Miura, N

Restoration of copper metabolism and rescue of hepatic abnormalities in LEC rats, an animal model of Wilson's disease, by expression of human ATP7B gene

通过表达人 ATP7B 基因恢复 LEC 大鼠（威尔逊病动物模型）中的铜代谢并挽救肝脏异常

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Biochim.Biophys.Acta 1690
影响因子：
0
作者：
Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.
通讯作者：
Yan M.Y.et al.

The Wilson disease protein ATP7B resides in the late endosomes with rab7 and the Niemann-Pick C1 protein

DOI：
10.1016/s0002-9440(10)62272-9
发表时间：
2005-02-01
期刊：
AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
影响因子：
6
作者：
Harada, M;Masaru, H;Sata, M
通讯作者：
Sata, M

Enhanced proliferation of hepatic progenitor cells in rats after portal branch occlusion

大鼠门静脉支闭塞后肝祖细胞增殖增强

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Liver Transpl. 10
影响因子：
0
作者：
Lee E-J.;Iai H.;Koizumi N.;Sano H.;Kanzaki-Kato N. et al.;Harada M. et al.;Kameda T. et al.;Yan M.Y.et al.;Ise N.et al.
通讯作者：
Ise N.et al.

A hypothermic-temperature-sensitive gene silencing by the mammalian RNAi